人细胞周期蛋白cyclin D1基因RNAi表达载体的构建与鉴定

[目的]构建针对人细胞周期蛋白cyclinD1基因的RNAi真核表达载体,检测其对人卵巢癌HO-8910细胞cyclinD1基因表达的干扰效率。[方法]以cyclinD1为靶向设计,合成的4条互补寡核苷酸链克隆至pSUPER载体中,得到重组质粒pSUPER-C1￣4,行双酶切分析后测序鉴定;运用脂质体介导转染HO-8910细胞,G418筛选;采用RT-PCR检测对cyclinD1基因mRNA表达的干扰,并筛选有效的siRNA干扰序列。[结果]经酶切测序鉴定证实,重组质粒中已插入目的序列;RT-PCR表明有4个重组载体均不同程度抑制目的基因的转录,但以pSUPER-C2的干扰效率最强。[结论]在卵巢癌细胞系筛选出有效干扰cyclinD1基因表达siRNA序列,成功构建针对cyclinD1基因的RNAi真核表达载体有效抑制目的基因的表达。     

微粒子化学发光免疫测定促甲状腺素敏感性方法的建立与应用

目的 :建立一种低成本、高敏感性检测血清促甲状腺激素(TSH)的微粒子化学发光免疫分析 (CLEIA)方法。方法 :采用碱性磷酸酶标记的抗TSHβ亚单位特异性单克隆抗体 (mAb) ,与FITC偶联的抗TSHα亚单位的另一mAb配对 ,构成双抗体夹心免疫结合 ,用抗FITC多抗免疫磁珠做固相分离载体 ,用金刚烷胺CSPD为发光底物的非均相免疫分析法。结果 :方法灵敏度 4 μIU/L ,批内变异系数 (CV)平均为7.4 5 % ,批间CV平均为 10 .4 5 % ,回收率为 91.4 %～ 10 2 .4 %。将实际样品测定与ACS 180  系统检测的结果相比较有较好的相关性。结论 :微粒子化学发光定量测定TSH的成本低、灵敏度及特异性高和稳定性好 ,具有广阔的应用前景     

化学发光磁酶免疫法检测O157:H7大肠埃希菌

目的：建立灵敏稳定检测O157：H7大肠埃希菌的化学发光磁酶免疫法.方法：利用AMPPD-ALP化学发光体系,通过磁珠酶联免疫法对O157：H7大肠埃希菌进行检测.结果：其检测灵敏度达到850个,线性范围为1 000～50 000个,批间变异小于15%,批内变异小于20%,与人工计数培养检测相比相关系数达0.9807.结论：化学发光磁酶免疫分析法操作简便,检测精密度和灵敏度高,是一种很有发展前景的可靠方法.     

化学发光磁酶免疫法检测O157∶H7大肠埃希菌

目的建立灵敏稳定检测O157∶H7大肠埃希菌的化学发光磁酶免疫法。方法利用AMPPD-ALP化学发光体系,通过磁珠酶联免疫法对O157∶H7大肠埃希菌进行检测。结果其检测灵敏度达到850个,线性范围为1000~50000个,批间变异小于15%,批内变异小于20%,与人工计数培养检测相比相关系数达0.9807。结论化学发光磁酶免疫分析法操作简便,检测精密度和灵敏度高,是一种很有发展前景的可靠方法。     

脑脊液置换治疗蛛网膜下腔出血的护理

目的：做好脑脊液置换治疗蛛网膜下腔出血的术前术后护理。方法：从脑脊液置换病人术前、术中、术后三个方面进行观察与护理。结果：经精心治疗和护理，病人均痊愈出院。结论：脑脊液置换能及时消除部分血性脑脊液，能迅速缓解头痛等脑膜刺激症状，预防脑血管痉挛发生。技术操作关键在于要穿刺准确，要严格无菌操作，避免中枢神经系统感染。     

改良大鼠急性心肌梗死模型的制备方法

目的 探讨对大鼠急性心肌梗死模型方法进行改良的可靠性、稳定性及可重复性.方法 40只SD大鼠腹腔内注射苯巴比妥钠全身麻醉后,气管切开并插管,小动物呼吸机辅助呼吸.常规消毒铺巾后,切开左胸前区皮肤,经左侧第3、4肋间进入胸腔暴露心脏,明确左前降支冠状动脉后结扎造成急性心肌梗死.对围术期各种可导致结扎失败和死亡的原因进行分析.结果 成功建立了大鼠急性心肌梗死模型.术后24h大鼠存活率为95％,4w时存活率为92.5％.结论 通过方法改进能够快速有效建立大鼠急性心肌梗死模型并降低大鼠死亡率.     

69例癌症病人的心理护理体会

通过对69例癌症病人进行直接或间接的观察与访谈，发现69例病人均存在不同程度的心理变化，较常见的心理反应有焦虑、悲观失望、依赖、恐惧、怀疑与否定等。通过耐心劝导、适度告知、增强信心、关心体贴、巧妙暗示、亲情温暖等不同的心理护理措施，可明显改善癌症病人的不良情绪，减轻痛苦，增强战胜疾病的信心，增进身心健康，提高了病人及家属对护理工作的满意度。     

多支冠脉血管病变分次PCI的近期临床疗效

目的 比较多支冠状动脉病变患者经皮冠状动脉介入术（percutaneous coronaryintervention,PCI）进行一次完全性血运重建术和分次完全性血运重建术的近期临床疗效。方法2005年12月至2008年10月接受PCI的多支冠脉血管病变完全血运重建患者,其中分次完全血运重建185例（88．1％）,一次完全血运重建25例（11．9%）对比分析两组PCI术中及术后1年随访结果。结果两组术中、术后住院期间主要并发症（巨大血肿、假性动脉瘤、急性或亚急性血栓、再次血运重建等）、严重夹层、心律失常、住院期间死亡率均有统计学差异（P〈0．05）,分次完全血运重建组均低于一次完全血运重建组;术后12月随访：再狭窄率、心绞痛复发率、再次血运重建、非致死性急性心肌梗死及心功能无显著差异（P＞0．05）,心源性死亡发生率有统计学差异（P〈0．05）,分次完全性血运重建组低于一次完全性血运重建组（P〈0．05）。结论多支冠状动脉病变完全血运重建行分次PCI近期临床疗效较好。     

冠心病经皮冠状动脉介入治疗1000例体会

经皮冠状动脉介入（percutaneous coronary interv-ention,PCI）治疗是恢复心肌血流再灌注,治疗冠心病的一种很好的策略。本文回顾性分析了应用PCI治疗的1000例患者的临床资料,探讨冠心病的介入治疗操作体会,为冠心病的介入治疗操作提供参考。