Lp-PLA2的检测在冠状动脉狭窄患者中的临床意义

目的探讨血浆脂蛋白相关性磷脂酶A2(LP-PLA2)水平与冠状动脉不同分支狭窄的关系,进一步分析LP-PLA2水平的检测在冠心病患者中的临床意义。方法本次研究共包括268例患者,根据经皮冠状动脉造影术(CAG)结果分组为,对照组(无狭窄),粥样硬化组(主要冠脉分支狭窄≤50%,≥20%),单支病变组(单支狭窄>50%),双支病变组(双支狭窄>50%)和三支病变组(三支或以上狭窄>50%)。采用横断面分析LP-PLA2以及高密度脂蛋白C(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、载脂蛋白B(ApoB)、载脂蛋白A1(ApoA1)、葡萄糖(GLU)、尿酸(BUA)等生化指标和患者基本情况与冠状动脉狭窄的关系。结果经单因素分析,与对照组比较冠心病传统因素高血压、GLU、HDL-C、ApoA1、BUA或从粥样硬化组,或从单支病变组、双支病变组、三支病变组开始与冠状动脉狭窄相关(P <0.05),而LP-PLA2从单支病变组开始与冠状动脉狭窄显著相关(P <0. 01);通过比较各组间LP-PLA2水平发现,随着冠状动脉病变支数增加Lp-PLA2显著增加(P<0.01),而双支病变组与三支病变组比较其值变化不明显(P>0.05);进一步多元回归分析发现,从单支病变开始LP-PLA2与冠状动脉狭窄独立相关,OR值1.013,95%CI(1.006,1.020),<0.01。结论从冠状动脉单支变化开始LP-PLA2显著增加,并且与冠状动脉狭窄独立相关,因此检测LP-PLA2对冠状动脉狭窄患者病情的评估有重要的临床意义。     

弓形虫培养上清体外对CD4+CD25+T细胞的影响

目的探讨体外培养条件下弓形虫培养上清对CD4+CD25+T细胞的影响。方法用弓形虫培养上清和自小鼠脾脏分离的CD4+CD25+T细胞共同孵育，Annexin-v染色法检测CD4+CD25+T细胞的凋亡情况，淋巴细胞增殖实验检测CD4+CD25+T细胞对CD4+CD25-T细胞的抑制功能。结果  用弓形虫培养上清孵育10 h的小鼠脾脏CD4+CD25+T细胞有(36. 90±0.36)%出现凋亡，和RPMI-1640孵育组相比，凋亡率上升了（13. 60士2.15）%。与RPMI-1640孵育组相比，用弓形虫培养上清处理5、10 h的小鼠脾脏CD4+CD2 5+T细胞对CD4+CD25 -T细胞的抑制功能下降(P<0.01)。结论  弓形虫培养上清中可能存在某些成分能够诱导CD4+CD25+T细胞出现凋亡，并使CD4+CD25+T缅胞对CD4+CD25-T细胞的抑制功能下降。     

Th17细胞在自身免疫疾病中的研究

自身免疫疾病是威胁人类健康的常见疾病之一。免疫系统异常是导致自身免疫疾病发生、进展和预后的关键。CD4+T细胞作为效应T细胞的重要成分,参与免疫应答的各个阶段,在免疫调节中发挥关键作用。经典免疫学将CD4+T细胞分为Th1和Th2两个亚群,两者在免疫应答反应过程中相互     

两台血细胞分析仪的测定结果进行方法对比及偏倚评估

目的 通过对比不同仪器测定同一标本而对两台仪器进行方法对比和偏倚评估.方法 同时采用SYSMEX XE2100型和SYSMEX 800i型两种血细胞分析仪检测血液白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)值.将SYSMEX XE2100作为标准仪器,SYSMEX 800i作为对比仪器进行检测,对检测结果进行评估.根据直线回归方程和相关系数(r)进行制图和制表.结果 两台仪器具有良好的相关性,检测结果相对偏差都在允许范围之内.结论 同一实验室的不同仪器应定时进行对比,以保证检测结果的准确性.     

日本血吸虫感染诱导产生的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞免疫抑制功能的观察

目的观察日本血吸虫感染小鼠CD4^＋CD25^＋T细胞的免疫抑制功能及特征。方法日本血吸虫尾蚴（10&#177;2条）感染BALB/c小鼠,在感染后6周（急性期,10只）和13周（慢性期,10只）取脾脏,制成脾单个核细胞,用免疫磁珠分选出CD4^＋CD25^＋T细胞。体外实验,将急性期和慢性期来源的CD4^＋CD25^＋T细胞与CD4^＋CD25ˉT细胞共培养,^3H-TdR掺入法检测细胞增殖情况,ELISA检测细胞培养上清中的细胞因子。体内实验,将CD4^＋CD25^＋T细胞被动转移到日本血吸虫辐照致弱尾蚴免疫的小鼠体内,2周后剖杀取脾,用流式细胞仪检测脾组织中白细胞介素4＋（IL-4＋）、IL-10＋和干扰素γ＋（IFN-γ＋）CD4^＋T细胞比例,ELISA检测血清抗辐照致弱尾蚴抗原IgG1和IgG2a水平。结果体外实验显示,在血吸虫虫卵可溶性抗原（SEA）刺激下,与单纯CD4^＋CD25ˉT细胞培养组（脉冲指数即cpm值为7615&#177;1058）相比,CD4^＋CD25^＋T细胞对CD4^＋CD25ˉT细胞增殖具明显的抑制作用（P〈0.01）,并且感染慢性期来源的CD4^＋CD25^＋T细胞抑制作用（cpm值为2336&#177;490）强于急性期来源的CD4^＋CD25^＋T细胞（cpm值为4467&#177;144）（P〈0.05）;并对IL-4、IFN-γ和IL-2等细胞因子分泌也具有抑制作用,其中急性期来源的CD4^＋CD25^＋T细胞对各细胞因子的抑制率分别为32.0%（P〈0.05）、66.3%（P〈0.01）和63.2%（P〈0.01）;慢性期来源的CD4^＋CD25^＋T细胞对各细胞因子的抑制率分别为28.4%（P〈0.05）、60.1%（P〈0.01）和58.3%（P〈0.01）。体内实验显示,在辐照致弱尾蚴诱导的免疫应答中,转移慢性期血吸虫感染小鼠的CD4^＋CD25^＋T细胞对IFN-γ和IgG2a抗体的产生明显抑制作用（P〈0.05）。结论日本血吸虫感染诱导的CD4^＋CD25^＋T细胞具明显免疫抑制作用,并呈现优势抑制Th1应答的特征。     

老年慢性心力衰竭患者辅助性T细胞17及白介素-17的检测及临床意义

目的研究老年慢性心力衰竭（chronic heart failure,CHF）患者外周血中辅助性T细胞17（Thl7）的比例及白介素-17（IL-17）的变化及临床意义。方法选择老年CHF住院患者作为CHF组（n=30）,同时设置对照组（n=30）,利用流式细胞技术和ELISA法分别检测2组患者外周血中Thl7细胞比例和IL-17的水平。结果CHF组外周血中Thl7／CD4＋T细胞比例显著高于对照组[（3．83±1．04）％比（2．25±0．78）％,P〈0．05];CHF组患者外周血中IL-17水平显著高于对照组[（8．97±3．06）ng／L比（6．12±2．34）ng／L,P〈0．05]。结论老年C／IF患者外周血中Thl7细胞比例及IL-17水平升高,调节Th17细胞的治疗可能为CHF治疗提供新思路。     

胆汁中外泌体及外泌体RNA提取方法比较

目的比较超速离心法和聚合沉淀法分离胆汁外泌体及外泌体RNA的差异。方法收集2017年6月至2018年12月在南京医科大学第二附属医院消化内科行内窥镜逆行胆囊-胰腺造影术(ERCP)患者术中胆汁,分别采用超速离心法和聚合沉淀法对胆汁进行分离。采用透射电镜法观察提取外泌体的形态;采用粒径分析所得粒子的直径;采用流式细胞术检测表面标记物CD63和CD81的表达差异;Trizol法提取RNA,分析RNA水平及A260/A280;采用实时荧光定量(RT-PCR)检测4种miRNA表达,分析两种方法所得平均CT值的差异。结果超速离心法和聚合沉淀法所得外泌体形态和粒径分布无明显差异;流式细胞术分析显示,超速离心法所得外泌体CD63和CD81阳性率较高。RNA分析显示,聚合沉淀法提取RNA水平较高,检测的miR-671-5p、miR-126-3p、miR-210-3p、miR-483-5p平均CT值较小。结论超速离心法和聚合沉淀法均可提取出一定数量的外泌体,其中超速离心法得到的RNA较纯,而聚合沉淀法得到的RNA水平较高,可用于稀缺标本的检测。因此,进一步寻找高敏感、高特异、经济便捷的方法仍然十分必要。     

Combi xs全自动尿沉渣分析仪与人工显微镜检测尿液细胞结果的比较与分析

目的 探讨Combi xs全自动尿沉渣分析仪检测的精密度以及与人工显微镜检测尿液中细胞结果的相关性.方法 同时用Combi xs和人工显微镜对尿液标本的红细胞、白细胞进行检测,并且分析计算两种检测方法的精密度和相关性.结果 红细胞计数在(937～15)×106/L之间时,Combi xs检测的批内不精密度(即变异系数,CV)为3.1%～29.8%;白细胞的计数在(1 026～16)×106/L之间时,CV为3.0%～26.1%.在细胞数为(1 128～22)×106/L之间的批间不精密度为3.2%～21.3%.Combi xs与人工显微镜检细胞计数的相关性良好(相关系数r＞0.95),但是Combi xs计数结果相对人工镜检的结果偏低,相关方程的斜率分别为0.859(红细胞计数)和0.886(白细胞计数).结论 总体上,Combi xs检测结果可信度较高,与人工检测结果相关性良好.因此,大多数尿液标本不需要人工显微镜复检便可以发出检测报告.     

冠状动脉狭窄患者血浆脂蛋白相关性磷脂酶A2相关因素分析

目的探讨冠状动脉狭窄患者血浆脂蛋白相关性磷脂酶A_2(Lp-PLA_2)水平升高的影响因素。方法选择2015年10月至2017年5月该院收治的具有心绞痛且怀疑冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者263例,根据冠状动脉造影结果分为对照组(无狭窄或狭窄程度小于20%,35例)、粥样硬化组(主要冠状动脉狭窄程度20%～50%,21例)、单支病变组(狭窄程度大于或等于50%的单支病变,66例)、双支病变组(狭窄程度大于或等于50%的双支病变,46例)和三支病变组(狭窄程度大于或等于50%的三支或三支以上病变,95例)。分析Lp-PLA_2水平与CHD危险因素血脂、脂蛋白及血糖等的相互关系。结果从冠状动脉狭窄单支病变开始Lp-PLA_2水平显著增加,与Lp-PLA_2呈正相关的因素为患者年龄、载脂蛋白B(ApoB)、血糖(r=0.155、0.179、0.260,P=0.025、0.003、0.001),与Lp-PLA_2呈负相关的因素为高密度脂蛋白胆固醇、ApoA1、游离三碘甲状腺原氨酸(r=-0.264、-0.312、-0.332,P=0.001、0.001、0.007);年龄、ApoB与Lp-PLA_2独立相关(B=2.85、123.67,Beta=0.315、0.275,P=0.026、0.026)。结论从冠状动脉狭窄单支病变开始LpPLA_2水平显著增加,且与患者年龄和ApoB独立相关。