盆腔炎动物模型的建立

目的建立临床盆腔炎的动物模型。方法以健康成年新西兰兔为研究对象将大肠埃希菌接种到输卵管系膜及注射到输卵管,7d后剖腹探查,通过肉眼、光镜及电镜观察炎症形成情况。结果盆腔腹膜和盆腔器官明显充血、水肿、粘连。光镜见明显的炎细胞浸润,电镜下细胞核核膜不清,染色体线粒体肿胀。结论3×108cfu/kg大肠埃希菌注射至输卵管可建立典型的盆腔炎动物模型,其重复性强,可用于实验研究。     

缺血性老年大鼠部分脑区及小脑内源性神经生长因子的变化

背景：神经生长因子(nerve growth factor，NGF)在神经元的生长、存活、分化、保护神经元的退行性改变及神经损伤的自我保护与修复中具有重要作用，目前NGF保护神经元的分子病理学机制还有许多需要深入探讨的。目的：观察脑缺血老年大鼠部分脑区及小脑内源性神经生长因子的变化。设计：完全随机对照实验研究。地点与材料：本研究的地点为广州军区广州总医院实验科：材料为36只SD大鼠2～2．5年龄，雌雄不限。干预：用夹闭两侧颈总动脉法建立不完全性脑缺血动物模型，将SD大鼠随机分成正常对照组(A组)、假手术组(B组)、缺血30min再灌注6h(C组)、12h(D组)、24h(E组)、48h(F组)、7d(G组)和14d(H组)，用免疫组织化学ABC染色法检测部分脑区神经元及小脑NGF的表达。在透射电镜下观察各组神经元超微结构变化。主要观察指标：各组神经元NGF表达定性及定量观察。结果：除A、B组外，各组顶叶皮质神经元均有NGF表达，其中E组和G组中量表达，神经元数量分别为(58．4&;#177;9．18)mm^2和(56．2&;#177;10．87)mm^2；除A组、B组、F组和H组外各组海马均有少量表达，神经元数量C组为(28．8&;#177;6．42)mm^2、D组(30．4&;#177;12．12)mm^2、E组(24．2&;#177;5．18)mm^2、G组(15．6&;#177;4．39)mm^2；小脑均没有表达；再灌注超过48h组海马神经元和小脑蒲肯野细胞损伤较重，顶叶皮质神经元轻度水肿；结论：老年大鼠在受到缺血性脑损伤时，内源性NGF在大脑皮质和海马有部分表达，小脑始终没有表达。内源性NGF对脑组织具有一定的保护作用，早期注射外源性NGF可能对脑组织损伤后修复具有重要意义。     

骨唾液酸蛋白在体外培养人骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中的角色

目的：骨唾液酸蛋白在骨矿化形成方面扮演重要角色，实验观察其是否能诱导体外培养的人骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。方法：实验于2005—10／2006—12在解放军广州军区广州总医院医学实验科完成。①材料来源：选取在本院体检的健康志愿者2人，对本实验均知情同意。采用Ni-NTA亲和纯化技术，从本室构建的毕赤酵母GS115／pPICZaA-hbsp发酵上清中纯化重组人骨唾液酸蛋白。②实验方法：对健康志愿者进行髂骨穿刺抽取骨髓液，采用贴壁法培养得到骨髓间充质干细胞。设立4组：骨唾液酸蛋白组添加0．1nmol／L骨唾液酸蛋白；成骨诱导液组添加10nmol／L地塞米松、10mmol／L磷酸甘油、50mg／L抗坏血酸；联合组添加上述两组的所有试剂；空白对照组不添加任何处理因素；各组均处理细胞12d。⑧实验评估：光镜及电镜观察培养的细胞形态；以细胞计数法测定生长曲线，应用流式细胞仪分析细胞周期，采用免疫荧光细胞化学法和流式细胞分析检测干细胞标志物STRO-1的表达；生化试剂盒测定碱性磷酸酶活性；von Kossa染色法检测钙沉积。结果：①单个骨髓间充质干细胞为长梭形，经骨唾液酸蛋白处理后细胞大而扁平，原来密集的克隆分散开。②与空白对照组比较，骨唾液酸蛋白组引起细胞生长曲线右移，细胞Go／G，期比例平均增加12．09％（P〈0．01），S期比例减少65．92％（P〈0．01），STRO-1阳性细胞百分率下降26．54％（P〈0．01）。⑧与空白对照组比较，骨唾液酸蛋白组细胞碱性磷酸酶活性增加50．0％，成骨诱导液组增加59．5％，联合组增加71．43％，并且随着处理时间的延长，活性增加越显著。④空白对照组细胞vonKossa染色呈阴性，其余各组均呈阳性。其中联合组的黑色矿化结节体积最大、数目最多；骨唾液酸蛋白组的结节体积较小、数目较少；成骨诱导液组居中。结论：骨唾液酸蛋白对人骨髓间充质干细胞有促进成骨分化和矿化作用，且与成骨诱导液联用效果更佳。     

安可梦口服液对慢性疲劳小鼠免疫调节功能的影响

目的:探讨中药复方制剂安可梦口服液治疗慢性疲劳综合征的作用机制。方法:选用BALB/c小鼠,应用强制冷水游泳加进食时电击复合应激因素建立慢性疲劳动物模型,除正常组(n=12)外,成模小鼠分为4组:模型组、复方阿胶浆组犤50g/(kg·d)复方阿胶浆灌胃犦、安可梦口服液小剂量组和大剂量组犤分别以25g/(kg·d)和50g/(kg·d)安可梦口服液灌胃犦,每组12只。正常及模型组灌胃生理盐水0.5mL。各组灌胃2次/d,连续14d。对各组动物白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)、干扰素、自然杀伤细胞的活性进行了检测。结果:模型组的IL-2、干扰素、自然杀伤细胞活性比正常组显著降低,差异有显著性(q=12.88,P<0.01);安可梦口服液大、小剂量组的IL-2、干扰素、自然杀伤细胞活性与模型组比较均有显著升高,差异有显著性(q=10.06,8.28;P均<0.01),且作用优于复方阿胶浆组(q=6.68,2.12;P<0.05～0.01)。结论:提高和调整机体低下的IL-2-干扰素-自然杀伤细胞免疫调节网水平,可能是安可梦口服液发挥滋补肝肾、健脾养心、安神定志功效,治疗慢性疲劳综合征的机制之一。     

锂-匹罗卡品颞叶癫癇模型的建立及苔藓纤维出芽的动态变化

目的 研究锂-匹罗卡品颞叶癫癇模型大鼠致癇后NFDA2性发作的行为学特点及海马结构病理改变的动态变化.方法 将所有Wistar大鼠随机分为对照组和实验组,实验组大鼠腹腔依次注射氯化锂、匹罗卡品诱发癫癇持续状态(SE)后,观察其自发性癫癇发作(SRS),分别于SE后1周至10周5个不同时间点取材,Nissl染色和Timm染色分别观察海马神经元损伤及苔藓纤维出芽 (MFS)的变化.结果 注射匹罗卡品后84%的大鼠可诱发出SE,经过10～20 d的缄默期后,可观察到Ⅰ～Ⅲ级的反复SRS,病理学检查可见海马神经元的损伤及齿状回内分子层MFS.结论 锂-匹罗卡品颞叶癫癇模型与人类颞叶癫癇有类似发作特点及病理改变,是一种理想的颞叶癫癇动物模型.     

性别、年龄、微生物因素对Wistar大鼠血常规值的影响

目的　研究性别、年龄、微生物因素对Wistar大鼠血常规值的影响。方法　Coulter JT全自动血常规检测仪自动检测。结果　SPF级雌、雄老龄Wistar大鼠红细胞、血红蛋白、红细胞平均体积、红细胞平均血色素量、血小板计数、红细胞平均分布宽度差异有非常显著意义 (P <0 0 1 ) ;白细胞、中性粒细胞差异有显著意义 (P <0 0 5 )。SPF级、普通级老龄Wistar大鼠白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、红细胞、血小板平均分布宽度、血小板平均体积差异有非常显著意义 (P <0 0 1 ) ;血红蛋白、红细胞压积、红细胞平均体积、血小板计数差异有显著意义 (P <0 0 5 )。SPF青年、老龄Wistar大鼠中性粒细胞、单核细胞、血红蛋白、红细胞平均血色素量、血小板平均分布宽度、血小板平均体积差异有非常显著意义 (P <0 0 1 ) ;白细胞、血小板计数差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论　性别、年龄、微生物对Wistar大鼠血常规值有显著影响     

不同种属骨髓间充质干细胞体外培养特性的比较研究

目的比较体外培养条件下不同种属骨髓间充质干细胞(BMSC)的生物学特性。方法采用贴壁法和离心法,对小鼠、大鼠、家兔和人BMSC进行分离培养。采用光镜和电镜观察细胞形态,MTT法测定生长曲线,免疫荧光细胞化学法和流式细胞仪分析表面分子Stro-1的表达,并通过试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活性、免疫组化检测骨钙素表达以及Von Kossa法显示钙盐沉积等手段评价BMSC对成骨诱导液(10 nmol/L地塞米松,10 mmol/L磷酸甘油和50 mg/L抗坏血酸)的反应性。结果贴壁法细胞得率是离心法的10余倍。各种属BMSC光镜下形态不同,电镜下形态相似;生长曲线基本一致。人原代贴壁细胞Stro-1阳性率为(91.4±8.3)%,小鼠为(83.5±6.2)%。在成骨诱导液中,小鼠BMSC向脂肪细胞分化,家兔BMSC死亡,大鼠和人BMSC可被成功诱导为成骨细胞。BMSC在培养中有自发分化现象。结论小鼠、大鼠、家兔和人BMSC可在体外被大量扩增,所得到的细胞是以低(未)分化细胞为主、不同分化程度的细胞混合物。不同种属BMSC在形态学和对同一诱导液的反应性上存在差异。     

普通级、SPF级SD大鼠、Wistar大鼠血常规的测定与比较

目的　测定普通级、SPF级SD大鼠、Wistar大鼠血常规指标并进行比较。方法　Coulter -JT全自动血常规检测仪自动检测。结果　普通级、SPF级SD大鼠白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、血小板计数、血小板平均分布宽度、红细胞平均分布宽度相差非常显著 (P <0 0 1) ;中性粒细胞、单核细胞相差显著 (P <0 0 5 )。普通级、SPF级Wistar大鼠白细胞计数、中性粒细胞、单核细胞、红细胞计数、红细胞平均体积、平均红细胞血色素量相差非常显著 (P <0 0 1) ;血红蛋白、血小板计数、血小板平均分布宽度相差显著 (P <0 0 5 ) ,其他指标相差不显著。结论　不同微生物学环境对SD、Wistar大鼠血常规指标有较大影响     

兔下尿路缺血模型的制备与改进

有研究表明下尿路缺血在下尿路疾病病程中发挥重要作用[1-3].通过球囊损伤髂动脉内膜研究人员成功制造了兔下尿路缺血模型以研究其在下尿路疾病中作用机制[4],但该方法存在一定缺点.我们对兔下尿路缺血模型进行改进并与原模型对比观察.     

新西兰兔脑局灶性缺血模型的建立

新西兰兔 2 6只 ,体重 2 8～ 3 5kg ,雌雄各半。将新西兰兔分成对照与缺血组 ,对照组 10只 ,实验组 16只。以氯胺酮肌内注射麻醉。眶后入路开颅暴露大脑中动脉 ,于左侧眶上缘取一切口 ,咬骨钳咬除部分左颞顶骨 ,暴露位于嗅束及大脑下静脉之间的一段大脑中动脉。置一小片脑棉保护血管周围脑组织 ,将吸有约 2 0 μlFeCl3 溶液的小片定量滤纸敷在该段大脑中动脉上 (对照组的大脑中动脉敷上吸有约 2 0μl生理盐水的小片定量滤纸 ) ,3 0min后去掉滤纸 ,用生理盐水冲洗局部组织 ,逐层缝合后回笼饲养 ,观察动物行为改变。术前先行数字减影脑血管…