复方二精灵多糖对谷氨酸诱导的海马神经元凋亡的保护作用

目的探讨中药复方二精灵多糖(EJL)预防阿尔茨海默病的机制。方法实验分为正常对照组、模型(100μmol.L-1谷氨酸诱导)组、阳性对照组(50μmol.L-1多奈哌齐)及EJL实验组(0.5,1.0,2.0及3.0g.L-1)。体外培养9d的海马神经元先用各药物预处理一定时间后,加入谷氨酸。采用MTT法、Hoechst 33258荧光染色、流式细胞术和Western蛋白质印迹法等方法检测细胞凋亡。结果MTT检测发现,随着EJL浓度的增加,细胞的存活率也增加;与模型组〔(59.6±4.6)%〕比较,EJL2.0及3.0g.L-1组细胞存活率明显升高〔(82.8±2.8)%和(89.4±4.1)%;n=3,P<0.05〕。荧光染色观察形态学变化发现,EJL预处理组凋亡细胞明显减少。FITC-Annexin Ⅴ和PI双染,在直方图中可以发现,模型组的凋亡率为32.33%,EJL预处理组则分别为24.33%,22.01%及12.12%。Western蛋白质印迹法结果显示,与模型组比,EJL2.0g.L-1预处理可以显著提高Bcl-2蛋白表达量,减少Bax蛋白表达量。结论EJL对海马神经元有一定的保护作用。     

人二型大麻受体激动剂高通量筛选模型的建立

目的:基于二型大麻受体(CB2)的信号传递通路,建立体外高通量筛选CB2受体激动剂的药物模型。方法:将目的基因质粒pIRES2-EGFP-CB2、报告基因质粒pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro]、内参质粒PRL-TK共转染CHO细胞,通过检测双荧光素酶报告基因的表达水平变化来筛选人CB2受体的激动剂。并对加入激动剂的浓度和作用时间进行优化及考察模型的稳定性。结果:给予10μmol/L JWH-015 6 h后能取得最大相对诱导率。成功建立CB2受体激动剂的高通量筛选模型,筛选模型Z’因子为0.81,表现为良好的稳定性。结论:成功地建立了CB2受体激动剂的筛选模型,为从中药中高通量筛选有效物质奠定了良好的基础。     

合成棕点湍蛙抗菌肽的抗菌活性评价

目的对合成棕点湍蛙抗菌肽的抗菌作用进行分析,探讨合成产物与天然产物的一致性以及临床应用价值。方法体外抗菌试验测定合成抗菌肽及与庆大霉素、青霉素和链霉素联合应用对金色葡萄球菌和大肠埃希菌的最小杀菌浓度(MBC)。结果合成抗菌肽对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌均有一定的杀菌作用,MBC值分别为200 mg.L-1和100 mg.L-1,但活性低于生物化学方法提取的天然产物。合成抗菌肽与青霉素、链霉素联合使用后抗菌作用有增强趋势,其中与青霉素联合使用的效果较明显,MBC值达到青霉素/合成肽为0.625 mg.L-1/25 mg.L-1。结论抗菌肽的联合应用可能有助于改善病原性细菌对传统抗生素的耐药性。     

趋化因子受体CCR7 依赖的树突状细胞迁移的调控机制

树突状细胞(DC)是机体功能最为强大的抗原提呈细胞,不仅能够活化获得性免疫以促进机体对病原的清除,还能够诱导免疫耐受,维持免疫稳态。树突状细胞在不同免疫器官的定位及迁移是其发挥免疫功能和维持机体稳态的基础。外周的未成熟DC摄取病原体后成熟活化,上调趋化因子受体CCR7的表达。由淋巴结基质细胞所分泌的趋化因子CCL19/CCL21作用于DC表达的CCR7,促进DC向次级淋巴器官的T细胞区迁移,启动并调控T细胞介导的获得性免疫应答。CCR7信号触发一系列胞内信号通路,并受到胞内骨架系统、代谢通路及表观修饰等多种层面的调控。越来越多的研究表明DC迁移的紊乱可能导致DC在炎症部位的过度聚集及活化,引起组织过度炎症,甚至引发自身免疫性疾病。在这篇综述中,我们将讨论DC迁移过程的调控机制及其在炎症性疾病、自身免疫性疾病等免疫相关疾病中作用的研究进展。     

吸入用布地奈德对哮喘儿童生长速度和身高影响的meta分析

目的探讨吸入用布地奈德(i-BUD)对哮喘儿童生长速度及身高的影响。方法检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网和万方数据库(截至2022年4月30日), 收集i-BUD对哮喘儿童生长速度和身高影响的随机对照试验(RCT)和高质量队列研究。观察组治疗药物为i-BUD, 对照组为安慰剂或未用药物治疗;结局指标为短期和/或长期应用i-BUD儿童的身高及生长速度。采用Cochrane协作网偏倚风险评估工具对RCT研究进行方法学质量评价, 采用纽卡斯尔-渥太华量表(NOS)对队列研究进行质量评价。采用Stata 11.0软件进行meta分析, 效应值为均数差(MD)及其95%置信区间(CI)。结果总共16项研究纳入meta分析(15项RCT和1项队列研究), 其中观察组2 578例, 对照组2 422例。15项RCT研究中9项为低风险偏倚, 2项为高风险偏倚, 4项为风险偏倚不清楚;1项前瞻性队列研究NOS评分为8分(高质量研究)。6项研究观察了i-BUD对儿童身高影响的短期效应, 观察组儿童i-BUD的暴露时间为2～8周, meta分析结果显示, 观察组儿童...     

人参皂苷Rg1的提取纯化及其含量测定

目的:提取和纯化人参皂苷Rg1,并测定其含量。方法:采用超声法提取人参总皂苷,使用硅胶柱层析法分离、纯化人参皂苷Rg1,采用高效液相色谱法测定人参皂苷Rg1含量。结果:采用硅胶柱层析分离50g人参,可得到人参皂苷Rg19.91g,其纯度为89.63%。结论:此提取方法简单、准确,成本较低,所获产品纯度较高,可作为获得人参皂苷Rg1的有效方法。     

灵丹草软胶囊制备工艺的研究

目的:确定灵丹草软胶囊的制备工艺。方法:对灵丹草软胶囊的处方进行了优选研究。结果:内容物以大豆油为基质,添加以大豆磷脂为乳化剂和蜂蜡为助悬剂,所选取工艺大豆油-蜂蜡-大豆磷脂比例为1:0.03:0.05。结论:所制得的软胶囊工艺稳定,质量可控,适合于工业生产。     

复方二精灵多糖的分离纯化与结构的初步研究

目的从复方二精灵中分离多糖并研究其结构。方法以黄精和枸杞子为材料,经热水提取、乙醇沉淀得二精灵多糖,通过二乙氨基乙基纤维素柱、凝胶渗透柱层析分离纯化,并采用高效液相色谱、红外吸收光谱、气相色谱进行结构分析。结果得两个多糖组分2 JLⅠ-和2 JLⅡ,2 JLⅠ主要是由阿拉伯糖、木糖、半乳糖、甘露糖和葡萄糖组成,相对分子量为811000;2 JLⅡ由半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成,相对分子量为2000。结论首次从复方二精灵中提取分离出两种纯多糖,该实验方法为以后二精灵多糖的研究提供了基础。     

红花中羟基红花黄色素A的分离纯化工艺

目的:分离纯化红花中羟基红花黄色素A(HSYA)。方法:采用ZTCⅡ澄清剂进行初步除杂,以吸附量、吸附率和解吸附率为指标,筛选分离HSYA的大孔树脂型号、工艺以及聚酰胺树脂纯化HSYA的工艺。结果:选取X-5型大孔树脂,分离工艺要求吸附流速为1mL·min-1,最佳吸附pH值为3,上柱量为柱体积的2%,洗脱溶剂为50%乙醇溶液。聚酰胺树脂纯化工艺要求径高比1∶14,上柱量为柱体积的2%,流速为1.5mL·min-1,洗脱溶剂为乙酸乙酯-甲醇-3.6%盐酸(1∶3∶6),反复上柱6次。得到HSYA的产率为25.63%,纯度为83.65%。结论:所选工艺成本低、所获产品纯度较高,可作为获得HSYA的有效方法。