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目的:探究四妙勇安汤含药血清对ox-LDL诱导的泡沫化巨噬细胞活化与自噬的影响,并探讨其抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:灌胃给予SD大鼠不同剂量四妙勇安水煎液制备含药血清。油红O染色观察泡沫化巨噬细胞脂滴变化;CCK-8法观察含药血清对泡沫巨噬细胞活化的影响;ELISA检测炎症性细胞因子IL-6、IL-10和IFN-γ表达;透射电镜观察细胞自噬水平;免疫荧光标记法检测LC3Ⅱ表达;RT-PCR及Western blot检测细胞AMPK/mTOR/p70S6K通路相关因子表达变化。结果:油红O染色显示,ox-LDL干预后胞质内可见大量橘红色脂滴;CCK-8显示浓度30%以下的含药血清干预泡沫化巨噬细胞OD值无明显变化(P>0.05)。与模型组相比,含药血清刺激后,IL-6、IFN-γ表达降低,IL-10表达升高(P<0.05),含药血清组及雷帕霉素组细胞自噬小体形成增加,LC3Ⅱ、AMPK表达提高,mTOR、p70S6K表达降低(P<0.05)。结论:四妙勇安汤含药血清可调节ox-LDL诱导的泡沫化巨噬细胞活化以及AMPK/mTOR/p70S6K信号通路,抑制炎... 相似文献
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目的 探讨四妙勇安汤含药血清对LPS刺激的M1/M2巨噬细胞极化及NF-κB/NLRP3通路的影响。方法 SD大鼠分别给予四妙勇安汤水煎液、生理盐水灌胃制备含药血清及正常对照血清。细胞分组为正常对照组、模型组、四妙勇安汤组、JSH-23组,除正常对照组外,其余组均用LPS诱导RAW264.7巨噬细胞。CCK8法检测细胞活性;ELISA检测细胞上清IL-4、IL-18水平;qRT-PCR法检测细胞i NOS、CD197、CD206、NLRP3 mRNA表达;免疫荧光标记测i NOS、CD197、CD206、NF-κB表达;Western blot检测NF-κB磷酸化、NLRP3炎症小体蛋白表达。结果 CCK8显示30%浓度以下的含药血清干预LPS诱导的巨噬细胞OD值无明显变化（P>0.05）。与正常对照组比较,模型组细胞iNOS、CD197、IL-18、NF-κB、NLRP3表达升高,CD206、IL-4表达降低（P<0.01）。与模型组比较,四妙勇安汤组及NF-κB抑制剂JSH-23组细胞iNOS、CD197、IL-18、NF-κB、NLRP3表达降低,CD206、IL-4... 相似文献
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目的:探究黄连解毒汤对脓毒症大鼠急性心肌损伤的保护作用与自噬相关蛋白的关联。方法:将35只SPF级SD雄性大鼠随机分为Sham组、CLP组、HLJDD组、H+RAP组、H+3MA组共5组(n=7)。连续给药7 d,通过盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型。术后3 d仍存活的大鼠采血行血常规检测；苏木素-伊红(HE)染色观察心脏组织的病理变化；蛋白免疫印迹法检测心脏组织中自噬相关蛋白(LC3、Beclin-1、P62)的表达；Q-PCR法检测大鼠心脏组织中ATG9 m RNA的表达差异。结果:与Sham组比较，CLP组小鼠血常规中感染指标(WBC、Gran、Gran%)水平明显升高(P<0.05),心肌细胞坏死、炎症细胞浸润明显，自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1、ATG9 m RNA的表达明显下调，P62蛋白累积明显(P<0.05);与CLP组比较，HLJDD组脓毒症大鼠感染指标明显降低(P<0.05),心脏组织损伤明显减轻，LC3-Ⅱ、Beclin-1、ATG9 m RNA的表达明显上调，P62蛋白明显下降(P<0.05);H+RAP组模拟了HLJDD组的趋势，... 相似文献
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目的 探讨黄连解毒汤对脓毒症肺损伤的保护作用及其机制。方法 雄性SD大鼠被随机分为假手术组(Sham)、模型组(CLP组)、黄连解毒汤组(H+CLP组),雷帕霉素组(H+Rap组)和3-甲基腺嘌呤组(H+3-MA组),每组各7只。除Sham组外，其他组均使用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型。H+CLP组、H+Rap组和H+3-MA组术前一周开始灌胃给药，其他组给等量生理盐水。术后1h按分组分别腹腔注射相应药物或等量生理盐水。术后24h取材，检测大鼠肺部组织湿干重之比；Elisa法检测肺部组织炎症因子白介素6(interleukin-6, IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子α(tumornecrosis factor-α, TNF-α)的水平；HE染色观察肺组织病理形态学变化；透射电镜观察肺部细胞亚显微结构，主要是自噬小体的形成情况；蛋白印迹法检测肺组织中自噬相关蛋白的表达情况，包括微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3, LC3)、Beclin-1、P62。结果 与Sham组相比，CLP组大鼠肺部出现明... 相似文献
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