Piezo1离子通道介导的流体剪切应力抑制MLO-Y4骨细胞凋亡

目的:研究Piezo1机械敏感性离子通道对骨细胞的调控作用。方法:应用课题组研发的流体剪切力（FSS）加载装置,使用免疫荧光探究FSS对Piezo1通道在MLO-Y4中影响的最佳强度;对Piezo1使用FSS、激动剂Yoda1或阻滞剂GsMTx4进行干预。使用Western Blot探究Cleaved Caspase-3、Bcl-2、Bax凋亡相关蛋白的表达量;使用Hoechst-33258以及流式细胞凋亡检测MLO-Y4骨细胞的凋亡比例。结果:免疫荧光染色结果表明FSS对MLO-Y4骨细胞中Piezo1的表达呈现先增加后降低的单峰趋势,其中以9 dyne/cm2加载30 min为最佳刺激条件。使用Yoda1抑制MLO-Y4细胞凋亡（P<0.05）,使用GsMTx4促进MLO-Y4细胞凋亡（P<0.05）。Piezo1介导的FSS抑制MLO-Y4细胞凋亡（P<0.05）。结论:Piezo1机械敏感性离子通道介导的FSS在9 dyne/cm2条件下抑制MLO-Y4骨细胞凋亡,且FSS在该条件下可以有效逆转Piezo1阻滞剂GsMTx4在4 μmol/L作用0.5 h下促进MLO-Y4细胞凋亡作用。     

Ⅰ型跨膜基质金属蛋白酶的功能及意义

膜型基质金属蛋白酶（MT-MMPs）是基质金属蛋白酶家族中的一类,迄今已经发现6种,其中Ⅰ型跨膜基质金属蛋白酶（MT1-MMP）因其在多种病理生理过程中的特殊作用而一直占据研究热点的位置。     

流体剪切力通过下调p21促进 MC3T3-E1成骨细胞增殖

目的 探讨流体剪切力(fluid shear stress, FSS)对成骨细胞p21表达的影响,并明确p21在FSS诱导的成骨细胞增殖过程中的作用。方法 对成骨细胞加载不同时间(0、15、30、45、60 min)、1.2 Pa FSS。用CCK-8实验、EdU实验检测成骨细胞增殖活性。用siRNA p21或pcDNA p21转染成骨细胞,并用Western blotting检测转染效果。Western blotting检测不同干预条件下p21、cyclin D1、CDK4的表达变化。结果 加载1.2 Pa FSS后,p21表达显著下调,且加载45 min后表达水平最低。加载FSS和下调p21表达都显著增强成骨细胞增殖,并增加cyclin D1、CDK4表达。而上调p21表达后,加载FSS不再具有增强成骨细胞增殖和增加cyclin D1、CDK4表达的作用。结论 1.2 Pa FSS能够下调成骨细胞p21表达,在加载45 min时下调最为明显。p21下调对成骨细胞增殖具有促进作用,且FSS通过下调p21促进成骨细胞增殖。     

CD117在胶质瘤中的表达及临床意义

采用免疫组化法检测CD117在135例人脑胶质瘤组织中的表达。发现CD117的阳性率在Ⅰ～Ⅳ级胶质瘤组织逐渐升高。提示表达CD117的胶质瘤患者可能会在针对酪氨酸抑制剂的化疗方案中受益。     

坐骨神经股神经阻滞在下肢手术中的应用（附274例分析）

在下肢手术中应用坐骨神经股神经阻滞，收到较好效果，现报告如下。 1 资料与方法 1．1 一般资料 本组274例，男235例，女39例，年龄9～78岁，均为骨科手术。其中胫腓骨骨折30例，髌骨骨折42例，内外踝骨折42例，趾骨骨折10例，膝关节半月板及十字韧带损伤10例，马蹄足3例，跟骨骨折9例，胫骨平台髁间粉碎性骨折5例，胫骨软骨瘤3例，腓总神经探查术5例，膝关节镜检查2例，术后取钢板及螺钉13例。     

I型跨膜基质金属蛋白酶的功能及意义

膜型基质金属蛋白酶(MT-MMPs)是基质金属蛋白酶家族中的一类,迄今已经发现6种,其中Ⅰ型跨膜基质金属蛋白酶(MT1-MMP)因其在多种病理生理过程中的特殊作用而一直占据研究热点的位置。1 MT1-MMP结构特点MT1-MMP与以前发现的MMPs结构上相似,也含有5个基本结构域:①信号肽;②前肽结构域;③催化结构域,含Zn2+结合位点;④铰链区;⑤血红素结构蛋白同源序列(HLD)。然而,MT1-MMP最大特点是质膜锚定结构域的存在,其包括2部分:①由20个疏水氨基酸序残基组成的横跨区域(transmembrane domain,TM/TMD);②TM后大约有20个氨基酸长度的胞浆…     

高级别胶质瘤中基质金属蛋白酶-2及其中介体含量与预后相关分析

目的探讨高级别胶质瘤中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2活性及其中介体与患者预后的关系。方法 26例高级别胶质瘤患者,进行明胶酶谱定量检测,将MMP-2及其中介体的表达情况与患者术后生存时间进行统计学分析。结果Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤MMP-2水平差异有统计学意义(P=0.000),MMP-2水平与分级呈正相关(rs=0.727,P=0.000);Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤中均有MMP-2中介体出现,在Ⅳ级胶质瘤中出现中介体的患者生存时间少于未出现中介体的患者(P=0.002);Cox回归分析显示,高级别胶质瘤中MMP-2的水平及其中介体的有无是影响患者生存时间的独立预后因子(P=0.003,P=0.004)。结论高级别胶质瘤中MMP-2水平与其中介体的存在与否是影响患者术后生存时间的重要因素。     

人脑胶质瘤中MMP-2与MMP-9酶活性改变和蛋白的表达及其意义

目的:探讨基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)与基质金属蛋白酶9(matrix metallopro-teinase 9,MMP-9)的表达与人脑胶质瘤恶性行为之间的关系。方法:采用明胶酶谱与免疫组化方法对50例人脑胶质瘤和4例正常脑组织中的MMP-2及MMP-9进行检测。结果:各级别组中,MMP-2和MMP-9的酶原形式无差别;在正常、Ⅰ级和Ⅱ级的胶质瘤组织中无活性酶存在,在Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤组织中,MMP-2活性酶的含量分别为42.586±10.245A.mm2/g.L和62.983±6.454A.mm2/g.L,MMP-9酶的含量分别为74.559±8.398A.mm2/g.L和176.117±11.922A.mm2/g.L,经免疫组化染色,从正常脑组织到Ⅳ级胶质瘤组织,MMP-2的阳性率分别为25%,0,23.8%,70%,87.5%;MMP-9的阳性率为0,33.3%,19%,60%,87.5%,MMP-2,9的酶含量及阳性率在各级别中的差异具有统计学意义。结论:在人脑胶质瘤中,MMP-2和MMP-9酶的活性变化与其病理分级密切相关,可作为判断胶质瘤恶性程度的重要参考指标。     

低浓度布比卡因加小剂量芬太尼联合阻滞麻醉用于人工髋关节置换术的临床观察

目的采用低浓度布比卡因加小剂量芬太尼硬膜外联合阻滞麻醉（CSEA）用于人工髋关节手术，肌松充分，麻药毒副作用小。感觉神经、运动神经分离麻醉，通过脑脊液作用于脊髓的阿片受体，从而起到镇静及切皮前超前镇痛。方法术前30min肌注安定10mg，入室后开放静脉通路，输入平衡液200—300ml。选患侧在下的麻醉体位，穿刺点于L2～L3或L3～L4间隙，常规行CSEA，蛛网膜下腔注入合剂2ml（0．5％布比卡因2ml加芬太尼1ml加10％葡萄糖2ml），内含布比卡因4mg，芬太尼20μg。注药速度8～10s，术中连续行鼻导管吸氧（2L／min），常规监测BP、P、R、MAP、SpO2、ECG。结果．腰麻后3～5min出现麻醉平面，平面控制在Tg～L10上限。感觉、运动神经分离麻醉，双下肢可自动。肌松充分，麻醉效果满意，血流动力学平稳。结论CSEA综合了腰麻和硬膜外的双重特点，既起效迅速，肌松充分阻滞完善降低了手术的应激反应。且小剂量芬太尼通过脑脊液作用于脊髓的阿片受体并作用于中枢从而起到镇静及切皮前超前镇痛的作用。也可经硬膜外导管注药增加麻醉平面及麻醉时间的可控性。对其手术引起的血浆皮质醇和葡萄糖增加受抑制，可阻断手术的应激反应减少出血量。对纤溶活性抑制较轻，这对有效的溶解术中或术后形成的血栓十分有利，还有改善术后第1天氧合的优点。     

胶质母细胞瘤中MMP-2中介体与肿瘤细胞侵袭力的相关性

目的探讨胶质母细胞瘤中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)活性酶及其中介体对原代培养肿瘤细胞侵袭力的影响。方法对21例胶质母细胞瘤组织进行明胶酶谱检测、原代培养及Boyden小室侵袭性实验,分析MMP-2酶原、活性酶及其中介体与原代培养肿瘤细胞侵袭能力之间的关系。结果 21例胶质母细胞瘤组织中9例出现MMP-2中介体,有中介体表达组原代培养的肿瘤细胞侵袭能力高于无中介体表达组(F=15.275,P=0.001),MMP-2活性酶的含量与各时段肿瘤细胞侵袭力均呈正相关(r均0,P均0.05),pro-MMP-2及中介体含量与肿瘤细胞侵袭力无相关性(P0.05)。结论胶质母细胞瘤组织中MMP-2活性酶的含量及中介体的有无是决定肿瘤细胞侵袭能力的关键因素。