酵母双杂交系统筛选CLN8P相互作用蛋白

目的：应用酵母双杂交系统筛选CLN8P相互作用蛋白质，通过对相互作用蛋白质的筛选及研究，探讨CLN8的功能，为NCL8和NCLs疾病群的发病机制研究提供线索，并为疾病的蛋白质相互作用网络提供资料。方法 应用酵母双杂交技术，以pLexA-CLN8为诱饵质粒筛选人胎脑cDNA文库，得到Leu+LacZ+阳性克隆，进一步进行验证，并对验证后的阳性克隆的外源性片断进行测序及同源性分析。结果 从人胎脑cDNA文库中筛选得到60个Leu+LacZ+阳性克隆；将获得的具有外源性片段的文库质粒与诱饵质粒一对一重新转入酵母体内对相互作用进行验证，共获得阳性克隆22个；对验证后阳性克隆测序并进行同源性分析，共获得不同的候选基因序列10个。结论 应用酵母双杂交系统，共筛选得到10个不同的基因，其编码蛋白与CLN8P有相互作用，可能与NCLs 发病机制相关。     

生物化学双语教学的实践与探讨

21世纪是知识经济时代,为了适应新时代的要求,培养高素质的复合型人才及专业人才已成为各高等院校面临的挑战。为此,各高校进行了一系列的教学改革,其中实行双语教学是高校教育改革的新举措,加强学生英语水平和专业能力的培养是各高校实施双语教学改革的重要目标。现将我校生物     

生物技术省级特色专业建设的探索与实践

结合南华大学的实际,生物技术专业经过积极的探索与实践,提出了培养具有"医药"特色的应用型生物技术创新人才的目标与思路,围绕培养方案、课程建设、教学改革、实践教学等环节阐述了生物技术省级特色专业建设的实践过程.     

脆性X相关蛋白Ⅰ结构及功能研究进展

脆性X相关蛋白Ⅰ(FXR1P)是脆性X蛋白家族成员,与脆性X智力低下蛋白(FMRP)的氨基酸序列60%以上相似。FXR1P分子中存在KH-Ⅰ结构域、RGG结构域、Agenet结构域、NLS、NES信号、NoS等结构;FXR1P可作为转录调节因子参与特定mRNA的转录与翻译。研究表明,FXR1P可以参与miRNA调控途径,实现对靶mRNA的调节。从结构和功能方面对FXR1P研究进展作一综述。     

甲醇提取柑橘皮总黄酮及其体外抗氧化活性研究

目的:以柑橘皮为原料,利用甲醇为溶剂,采用浸提法从柑橘皮提取生物活性物质总黄酮,通过体外实验评价柑橘皮总黄酮的抗氧化活性,以提高柑橘资源的开发利用效率。方法:通过单因素实验和正交实验确定柑橘皮总黄酮的最佳提取工艺条件。以芦丁为对照,体外测定柑橘皮总黄酮提取物对超氧阴离子自由基(O-2.)、羟自由基(.OH)及二苯代苦味酰基苯肼(DPPH.)自由基的清除率。结果:以甲醇为溶剂提取柑橘皮总黄酮的最佳提取工艺条件为:料液比1:30、溶剂浓度70%、温度60℃、浸提时间4 h的提取条件下,总黄酮产量为4.96%。体外抗氧化活性研究结果表明,柑橘皮总黄酮具有较高的自由基清除能力,其清除效果随提取物浓度的增加而增强。柑橘皮总黄酮对O-2.和DPPH.自由基的清除率高于芦丁,而对于.OH自由基的清除率比芦丁稍低。结论:柑橘皮总黄酮具有明显的抗氧化能力,为综合开发利用柑橘资源提供了科学依据。     

从少数民族班学员学业成绩的分析看边远地区医学生降分录取的可行性

我院从1981年起,对湘西土家族苗族自治州的招生工作试行了降分录取、定向招生、定向分配的特殊方案,已毕业两届学生。现对掌握资料完整的87年毕业的82级医疗专业少数民族班学员的学习情况作一分析报导。1982年秋,我院医学系招收新生306人,其中湘西少数民族学生30名,来自湘西8个     

FXR2酵母双杂交饵载体的构建及酵母菌转化

目的构建FXR2酵母双杂交系统的“饵”质粒，并转化酵母菌，为筛选FXR2P互作蛋白作基础。方法提取pMD18-T—FXR2，酶切后将FXR2基因连接到MATCHMAKER LexA Two—Hybrid System中的plexA质粒上，得到“诱饵”(Bait)-plexA—FXR2，导入大肠杆菌扩增，筛选阳性克隆并提取重组Bait质粒，再转入酵母菌EGY48(p8op—lacZ)。结果通过遗传学方法筛选得到构建成功的plexA—FXR2；通过营养缺陷筛选，证明Bait重组质粒转入酵母菌中。结论成功构建Bait质粒并使酵母菌转化。     

不同民族人群FMR1基因CGG重复序列检测与分析

目的 检测和分析脆性X综合征致病基因FMR1 CGG重复序列在汉族和壮族人群中的多态性分布。方法 采用PCR扩增技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对1060例汉族人（男280人，女780人）和283例壮族人（男85人，女198人）FMR1基因CGG重复序列进行分析，并用Southern blot技术对结果进行了验证。结果 汉族人群中共检测到33种等位基因，其中CGG重复序列范围为6～43，壮族人群共检测到27种等位基因，CGG重复序列范围为6～57，两类人群中最大频率等位基因分别为28和29。结论 应用PCR扩增技术进行了脆性X综合征大面积筛查，中国汉族和壮族人群中FMR1基因CGG重复序列变异分布略有差异。     

实验性大鼠肝癌早期病变形成过程中氧自由基的产生与清除

本文在对大鼠用二乙基亚硝胺和N—2—乙酰氨基笏诱发肝癌的过程中,系统观察了肝组织黄嘌呤氧化酶,超氧化物歧化酶、过氧化脂质和维生素E的动态变化情况。结果表明,在病变形成的早期,各项指标均呈规律性改变,提示自由基的产生增多与清除机能受损在肝癌的形成中具有重要作用。并依此对临床肝癌的抗氧化防治提出了理论性探讨。     

CLN8P与ND1相互作用的鉴定

目的验证CLN8P与线粒体NADH脱氢酶亚基1(NADH dehydrogenase subunit1，ND1)蛋白质相互作用。方法将用酵母双杂交技术筛选出的阳性克隆提取质粒后测序，与CLN8基因表达载体重新共转入酵母细胞，用β-半乳糖苷酶滤膜分析检测，通过滤膜上菌落颜色的改变来确认是否有相互作用。结果滤膜上菌落印迹变蓝色，CLN8P与ND1有相互作用。结论本试验将筛选得到的阳性克隆质粒：ND1与CLN8P一对一重新转入酵母细胞，进一步确认了其相互作用，为下一步的CLN8功能研究奠定基础。