轮状病毒肠炎患儿血清免疫球蛋白和补体的动态变化及其临床意义

目的探讨轮状病毒(RV)肠炎患儿血清免疫球蛋白(Ig)和补体(C)的动态变化及其临床意义。方法利用透射比浊法对81例RV肠炎患儿及22例健康儿童进行血清IgG、IgA、IgM和补体C3、C4水平的测定。并进行了急性期和恢复期的动态观察。结果RV肠炎患儿血清IgG、IgA、IgM和C3水平均较对照组明显降低(P均<0.001)。恢复期血清IgG、IgA、IgM和C3水平均较急性期明显升高(P<0.01或<0.05),但IgG、IgA仍比对照组低(P<0.05)。C4急性期和恢复期与对照组比较均无明显变化(P>0.05)。结论RV肠炎患儿存在体液免疫抑制,免疫球蛋白和C3参与了RV肠炎的发病过程。     

乙型肝炎病毒I97L变异核壳蛋白对诱导HepG2细胞凋亡的影响

目的研究I97L变异核壳蛋白对诱导HepG2细胞凋亡的影响。方法构建EGFP-野毒株核壳蛋白、I97L变异核壳蛋白融合表达载体(pEGFP-WT和pEGFP-L97),酶切和测序鉴定;将pEGFP-WT、pEGFP-L97和对照质粒分别转染HepG2细胞,筛选阳性细胞株;荧光显微镜观察阳性克隆细胞荧光蛋白表达,Western-blot检测核壳蛋白表达;以TNF-α、Act-D诱导HepG2细胞株凋亡,0、16、32和48h采用流式细胞术检测细胞凋亡,32h时采用共聚焦检测细胞凋亡比例。结果成功建立了融合表达蛋白表达载体;荧光显微镜显示各细胞克隆有较好的荧光蛋白表达,Western-blot检测各细胞系核壳蛋白表达没有差异;16、32、48h时,pEGFP-WT、pEGFP-L97表达细胞株凋亡率均明显低于pEGFP-C1细胞株(P<0.05);32h和48h时,pEGFP-L97细胞株凋亡率明显高于pEGFP-WT细胞株(P<0.05);32h时激光共聚焦检测结果与流式细胞术检测结果一致。结论乙型肝炎病毒I97L变异核壳蛋白对诱导HepG2细胞凋亡的影响与野毒株核壳蛋白不同,与野毒株核壳蛋白相比,I97L变异核壳蛋白对凋亡因素可能更敏感。     

重型肝炎患者医院内腹腔感染的特点和发病因素分析

目的探讨重型肝炎患者医院内腹腔感染的临床特点和防治对策。方法回顾性调查2001年10月-2004年9月在某院感染科住院的重型肝炎患者的病历资料。结果3年内该科收治的80例重型肝炎患者中有46例(57．50％)发生医院内腹腔感染。腹腔感染者行腹水细菌培养有14例获阳性结果，其中5例为多种细菌感染，菌种以条件致病菌为主，耐药率高。伴有腹腔感染者亦常见其他部位感染及合并真菌感染，肝性脑病和肝肾综合征的发生率高，治疗效果差；病死率(56．52％)明显高于无腹腔感染的重型肝炎患者(29．41％)。结论重型肝炎患者易发生医院内腹腔感染，病原菌以条件致病菌为主。腹腔感染常与其他部位感染或并发症并存，病死率高；预防和治疗需采取综合措施。     

乙型肝炎病毒L60V、I97L变异核壳蛋白对诱导HepG2细胞凋亡的影响

目的研究L60VI、97L变异核壳蛋白对诱导HepG2细胞凋亡的影响。方法构建变异核壳蛋白融合表达载体pEGFP-V60和pEGFP-L97和变异核壳蛋白阳性HepG2细胞株;荧光显微镜和western blotting检测核壳蛋白表达;以TNF-α、Αct-D诱导HepG2细胞株凋亡,0、16、32h和48h采用流式细胞术检测细胞凋亡,32h时采用共聚焦检测细胞凋亡比例。结果成功建立融合蛋白表达载体和融合变异核壳蛋白表达细胞系,各细胞株核壳蛋白表达量基本相同;16、32、48h时,pEGFP-WT、pEGFP-V60和pEGFP-L97表达细胞株凋亡率均明显低于pEGFP-C1细胞株(P<0.05);32h和48h时,pEGFP-V60和pEGFP-L97细胞株凋亡率均明显高于pEGFP-WT细胞株(P<0.05);32h时激光共聚焦检测结果一致。结论乙型肝炎病毒L60VI、97L变异核壳蛋白对诱导HepG2细胞凋亡的影响与野毒株核壳蛋白不同,L60VI、97L变异可能是慢性肝炎活动的原因之一。     

慢性重型乙型肝炎患者隐孢子虫感染的研究

目的探讨慢性重型肝炎与隐孢子虫感染的关系，为防治该病提供依据。方法用金胺-酚染色法(AA—P)和改良抗酸染色法(MAF)检测218例慢性重型乙型肝炎(慢重肝)患者和140例腹泻儿童粪便标本隐孢子虫卵囊，用PCR技术检测其DNA，并进行内切酶分析；对隐孢子虫感染影响因素进行分析。结果经AA-p、MAF和PCR检测，慢重肝患者隐孢子虫感染率分别为4．1％、3．2％和6．0％；腹泻儿童感染率为0．7％、0．7％和1．4％、PCR结果显示，慢重肝患者隐孢子虫感染率高于腹泻儿童；阳性患者腹泻史、动物接触史明显高于阴性患者，农村患者感染率高于城市患者结论慢性重型肝炎患者对隐孢子虫的易感性增加，隐孢子虫感染是引起慢性重型肝炎患者腹泻和可能加重其病情的因素之一。     

靶向性血小板衍生生长因子siRNA表达质粒的构建及鉴定

目的 构建靶向性血小板衍生生长因子(PDGF)B链的小分子干扰RNA(siRNA)表达质粒,为进一步研究PDGF基因功能奠定基础.方法 根据PDGF-B链序列设计合成含靶向PDGF基因siRNA转录模板的茎环结构,与两端分别有Bam HI、HindIII酶切位点的pSilencer3.1-Hlhygro质粒连接,转化大肠杆菌,扩增、纯化得到所需质粒,通过琼脂糖凝胶电泳及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列.结果 PCR扩增片段与预期结果相符,双酶切证实PDGF siRNA表达载体克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致.结论 成功构建了靶向性PDGF基因的siRNAs表达质粒. Abstract： Objective To construct the small interfering RNA (siRNA) expressing plasmids targeting platelet-derived growth factor(PDGF)and study the function of PDGF with RNA interference technology. Methods Two complementary 63-nt oligonucleotides targeting PDGF were synthesized with 5 single-stranded over-hangs according to the PDGF-B gene sequence in the Genebank and the kit manual,which were ligated with the linearized pSilencer3.1-Hlhygro.The plasmids were transformed into DH5α bacteria to amplify and then purified.The purified plasmids were identified by gel electrophoresis and sequencing.Results PDGF siRNA expression vectors were successfully constructed and identified by double endonuclease digestion.Sequence analysis of inserted fragment revealed the same sequence as synthesized siRNA oligonucleotides.Conclusions siRNA expression plasmids targeting PDGF have been successfully constructed.     

护理干预对肝穿刺术后疼痛的影响

目的:通过对肝脏穿刺术患者实施护理干预的效果观察,摸索出减轻患者穿刺术后疼痛的有效护理措施。方法:随机抽取本院肝穿刺术患者52例,分为护理干预组和对照组,分别观察记录术后疼痛情况,并对其结果进行t检验和χ2检验。结果:护理干预组患者比对照组患者的疼痛程度减轻、疼痛持续时间缩短,且有显著性差别(P<0.01)。结论:对肝穿刺术患者采取科学、合理的护理干预措施,有利于减轻其疼痛。     

轮状病毒肠炎患儿体液免疫活性检测及临床意义

目的探讨轮状病毒(RV)肠炎患儿血清免疫球蛋白(Ig)和补体(C)的变化及其在发病制中的作用。 方法对2004年7月至2005年9月广东省东莞市人民医院收治的81例RV肠炎患儿及22例健康儿童(对照组),利用透射比浊法进行血清IgG、IgA、IgM和补体C3、C4质量浓度的测定。 结果RV肠炎患儿急性期血清IgG、IgA、IgM和C3质量浓度较恢复期及正常对照组明显降低(P<001或<005)。RV肠炎中、重型患儿血清IgG、IgA、IgM和C3明显低于轻型患儿(P<001或<005)。IgG、IgA、IgM和C3质量浓度与病情严重程度呈负相关(r分别为-0389,-0547,-0775,-0743,均P<001)。C4质量浓度与病情无相关性(rs=-0061,P>005)。 结论RV肠炎患儿体液免疫活性变化在RV肠炎发病机制中起重要作用,对判断病情严重程度和指导治疗有一定实用价值。     

脑活素致过敏性休克1例

脑活素致过敏性休克１例李发武周绍国曾莲弟（湖南省郴州市第一人民医院郴州４２３０００）患者，男性，４６岁。因头昏、精神不振、注意力及记忆力轻度障碍１个月收住院。既往体健，无药物过敏史，查体无阳性体征。经颅脑ＣＴ检查发现，双侧基底节钙化，轻度脑萎缩。在给...     

靶向性血小板衍生生长因子siRNA对肝星状细胞增殖的影响

目的探讨小干扰RNA（siRNA）降低血小板衍生生长因子B链（PDGF-B）基因对肝星状细胞（HSCs）增殖与细胞外基质表达的影响。方法构建PDGF-B靶向siRNA重组表达质粒pSilencer3.l-Hlhygro-PDGF-B siR-NA,将重组质粒转染HSCs细胞,噻唑蓝（MTT）法测定转染后12 h、24 h、36 h、48 h、60 h的增殖抑制率;半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）与免疫印迹检测转染后36 h HSCs细胞PDGF-B表达。放免法检测HSCs细胞株上清液中透明质酸和Ⅲ型前胶原的表达。结果经酶切鉴定和测序结果证实PDGF-B靶向siRNA重组表达载体构建成功,转染重组质粒36 h后,PDGF-B siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3干预组的HSCs增殖抑制率明显高于对照质粒转染组（34.04%、14.89%、25.53%VS 3.19%;均P〈0.01～0.05）;RT-PCR和免疫印迹显示：各siRNA表达质粒阳性HSCs细胞PDGF-B mRNA和蛋白表达明显降低,与空脂质体组及对照质粒组比较,差异具有统计学意义（均P〈0.05）,放免法显示：siRNAs干预组HSCs细胞透明质酸和Ⅲ型前胶原表达明显降低,与空脂质体组及对照质粒组比较,差异具有统计学意义（均P〈0.05）。结论靶向PDGF-B链的siRNA可降低HSCs的PDGF-B基因表达,具有抑制HSCs增殖和分泌细胞外基质的能力。