失神经骨骼肌提取液对雪旺细胞体外增殖的作用

目的：观察去神经支配骨骼肌粗提液在体外培养条件下对雪旺细胞（Schwann cells,SCs)增殖的作用,了解外周神经损伤后SCs大量增殖的机理。方法：将新生大鼠SCs培养标本分为加正常骨骼肌提取液组,加失神经支配骨骼肌提取液组和正常对照组,每组10个标本。通过活细胞计数和S－100免疫细胞化学染色证实,观察两种肌肉提取液对SCs增倍时间的影响。结果：对照组SCs增倍时间为8天,正常骨骼肌提取液组为7天,而去神经支配骨骼肌提取液组为5．5天。结论：周围神经损伤后SCs可能受失神经支配骨骼肌产生的某些物质的刺激而增殖加快。     

冷冻保存的雪旺细胞对损伤后坐骨神经再生影响的实验研究

目的比较原代培养雪旺细胞(Schwann cells,SCs)和冷冻保存的 SCs移植对损伤后坐骨神经再生的作用.方法原代培养和液氮保存的 SCs分别移植到桥接缺损坐骨神经的硅胶管内.在移植后不同时间,硅胶管远端神经干内注射 HRP,逆行追踪背根神经节和脊髓前角的标记神经元数量;测量再生神经纤维的复合动作电位传导速度;电镜观察再生神经纤维的髓鞘形成.结果原代培养和冷冻保存 SCs在移植后不同时间其背根神经节(术后 6周 3967.41± 305.91与 3890.55± 315.63, t=0.55, P > 0.05;术后 8周 4029.33± 313.80与 4184.90± 305.75, t=1.11, P > 0.05)和脊髓前角神经元 HRP标记细胞数量(术后 6周 404.87± 40.05与 429.77± 43.40, t=1.33,P > 0.05; 术后 8周 474.49± 42.74与 470.99± 38.82,t=0.19,P > 0.05)、再生神经纤维的复合动作电位传导速度 (m/s)基本一致(术后 6周 32.28± 1.96与 32.05± 2.31,t=0.24,P > 0.05; 术后 8周 43.60± 1.88与 43.84± 2.19,t=0.26,P > 0.05; 术后 12周 43.78± 1.71与 43.83± 1.75,t=0.06,P > 0.05),再生神经纤维髓鞘的形成未见明显差别.结论冷冻保存的 SCs仍具有促进损伤后周围神经再生的能力.     

肥大细胞与神经系统的相互作用

肥大细胞是正常情况下存在于中枢神经系统内并和外周神经有密切关系的一类免疫反应细胞。肥大细胞在脑和脑膜内主要围绕血管周围分布,血管壁内和脑实质内为散在;肥大细胞和周围神经末梢在广泛部位有密切接触,有时呈胞膜对胞膜接触,但并不形成类似突触的关系。神经系统经典递质、肽类递质、嘌呤类递质、一氧化氮以及很多神经来源的细胞因子都对肥大细胞的数量及功能有调节作用;这些作用有些是对机体有益,有些则不利。肥大细胞对神经系统的生理作用可能包括参与摄食、体温、生殖、生殖内分泌活动及神经免疫内分泌调节。有趣的是有些研究认为肥大细胞不但参与I型变态反应,而且也有可能激活肾上腺皮质反应对抗I型变态反应。     

DHRS4基因簇缺失型神经母细胞瘤细胞株的克隆和鉴定

目的 单克隆培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y-细胞株,并鉴定其在基因水平缺失DHRS4基因簇,包括DHRS4、DHRS4L2和DHRS4L1的基因序列.方法 有限稀释法培养实验室偶得的低表达DHRS4基因的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,相差显微镜观察细胞的生长和增殖,PCR、RT-PCR检测DHRS4、DHRS4L...     

MARDHRS4的鉴定及其对DHRS4转录的调节

目的： 筛选新的小鼠DHRS4反义链转录本并对其功能进行研究。方法：采用快速cDNA末端扩增方法,从小鼠正常肝细胞株NCTC1469中克隆DHRS4反义链转录本,据此转录本设计合适siRNA,然后转染NCTC1469细胞,转染成功36 h后应用RT-qPCR检测细胞内DHRS4 mRNA水平的改变。结果：成功克隆出1个新的天然反义RNA,全长835 nt,属于长链非编码RNA (long non-coding RNA,LncRNA),命名为MARDHRS4,应用siRNA干扰MARDHRS4后,DHRS4 mRNA降低约40%。结论：来自DHRS4反义链的LncRNA MARDHRS4具有增强DHRS4转录的作用。     

SRY基因检测在性分化异常诊断中的应用

目的 研究SRY基因在性分化和发育中的作用。方法 细胞遗传学核型分析技术以及PCR技术检测外周血SRY基因。结果 在12例性分化异常患者中，有7例核型为46,XY，SRY（ ），其中1例是睾丸女性化综合征。说明性腺病理有睾丸与外周血SRY相符，另有5例核型为46，XX，其中1例餐周血SRY（ ），显示性反转综合征；1例为Tumer嵌合型综合征，核型为46，XX/45，X，SRY（-），但睾酮升高（12.7nmol/L)。正常成年女性睾酮参考值（0.7-2.8nmol/L)。3例外周血SRY基因。除SRY基因外，可能存在多个参与性别决定和分化的基因。性分化异常表现出高度遗传异质性。     

慢性酒精中毒及酒精戒断后小鼠肝细胞IL-28和mac-3的表达

目的：观察慢性酒精中毒及酒精戒断后小鼠肝细胞IL-28和mac-3的表达。方法：昆明小鼠随机分为酒精灌胃不同时间（4、8、12周）的3个实验组,每组16只,同时设对照组（8只）。各实验组小鼠每天用40%医用酒精按8mg/g剂量灌胃,对照组则灌胃等量生理盐水。各组小鼠分别于第4、8、12周末取半数处死,剖取肝脏,其余半数小鼠延时24h处死,在延时期间不再酒精灌胃。用HE染色观察肝组织病理学改变,用免疫组化方法检测肝细胞中IL-28和mac-3的表达。结果：灌胃4、8、12周实验组小鼠肝组织均出现脂肪变性、炎性改变及肝纤维化等慢性酒精性肝病的表现,且随灌胃时间的延长病变加重,而对照组则未出现此种改变。各实验组肝细胞IL-28和mac-3的表达较对照组减弱（P均〈0.05）,但在酒精戒断后的表达增强,与各组戒断前的差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：慢性酒精中毒造成肝枯否细胞损伤,酒精戒断后在肝内可能发生一过性炎症反应。     

人睾丸细胞中一种新的辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶mRNA剪接变体

目的:研究辅酶II依赖性视黄醇脱氢/还原酶(NRDR)在生殖细胞中的剪接亚型,并对表达蛋白进行预测分析。方法:用快速cDNA末端扩增法从人睾丸细胞株(Hs 181.Tes)中克隆NRDR全长cDNA序列;对获得的序列进行生物信息学分析,通过查找开放阅读框架(ORF),预测并分析剪接新亚型的蛋白质序列和功能:从Hs 181.Tes中克隆了一种新的全长1 164bp的cDNA片段,序列分析表明其属于NRDR缺失4、5外显子的截短剪接体,其ORF可编码237个氨基酸,拥有短链醇脱氢酶家族的保守模序和过氧化物体定位信号。结论:NRDR在不同细胞的基因转录表达调控具有选择性差异,进而表达不同蛋白,构成SDR家族,该新亚型可能参与生殖系统相关酶类的代谢,控制生殖细胞增殖分化。     

DHRS4反义RNA结合蛋白的高通量检测与分析

目的 DHRS4是细胞内NADP(H)依赖性视黄醇脱氢/还原酶家族成员4的编码基因。与人类DHRS4基因以头对头形式存在的反义转录本AS1DHRS4,可以调控DHRS4基因的转录。本研究高通量检测分析DHRS4反义RNA结合的蛋白以探讨DHRS4反义转录本调控正义基因表达的作用机制。方法采用甲醛交联细胞内的核酸-蛋白复合物,然后通过生物素标记的奇数组和偶数组寡核苷酸作为探针pull-down AS1DHRS4结合的蛋白,LCMS/MS鉴定后数据库比对分析DHRS4反义RNA结合的蛋白。结果奇数组和偶数组探针pull-down后分别鉴定得到650种和508种蛋白,两组探针检测的共同蛋白434种。大部分蛋白为结合蛋白并与RNA的加工和修饰相关。结论 DHRS4反义RNA结合的蛋白的检测和分析为今后进一步研究反义RNA功能和机制提供了线索和基础。     

VEGF和MVD表达在早期周围性肺癌影像学诊断中的应用价值及相关性分析

目的探讨内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）表达在早期周围型肺影像学诊断中的应用价值。方法对68例经手术病理证实的周围型肺癌（腺癌32例,鳞癌30例,小细胞癌6例）采用LDP免覆组化法,检测肿瘤标本中VEGF和MVD的表达,并分析其与影像学征象之间的关系。结果VEGF和MVD值呈正相关关系（r=0．691,p〈0．01）,VEGF和MVD表达与周围型肺癌的组织学类型无关（P〉0．05）,与肿瘤的大小、分叶征、棘状突起、胸膜凹陷征、血管集束征、纵隔淋巴结转移及胸腔积液等影像学征象均有关（P〈0．05）,而与毛刺征无关（p〉0．05）。结论周围型肺癌的影像学征象与VEGF和MVD表达密切相关,当肿瘤直径大于3cm,出现分叶征、棘状哭起、胸膜凹陷征、血管集束征、纵隔淋巴结转移及胸腔积液等征象,提示肿霜可能有较高的恶性程度。