留学生医学胚胎学全英文教学的实践

<正>组织学与胚胎学是一门重要的基础医学课程。胚胎学同属形态学和发育生物学的范畴,是儿科、妇产科等临床学科的基础课程,是研究人体发生、生长和发育机制的科学~([1])。根据以往教学情况,学生理解和记忆都较为困难,另对于留学生,国内教师采用英文授课,其课堂讲授和教学效果对教师是挑战。笔者通过教学实践,就我校留学生授课的准备工作和课堂情况总结几点体会。     

一种细胞核质蛋白分离方法的建立

目的 拟建立一种方便快捷、经济有效的细胞核质蛋白分离方法.方法 利用自建方法、Ambion和Thermo公司的试剂盒分别提取细胞核蛋白和质蛋白,利用Western blot检测Bag-1、ING5和parafibromin蛋白亚细胞定位,通过选择不同的内参蛋白标记细胞组分蛋白的污染.结果 自建核质蛋白提取方法与试剂盒相比,在操作时间和分离效果上无显著差别.发现大小不同Bag-1蛋白在胃癌细胞质和核中定位不同,ING5和parafibromin蛋白分别定位在胃癌和肺癌细胞系的细胞核中.结论 自建方法可用于实验室常规细胞核质蛋白分离,具有操作简单、方便快捷和经济有效的特点,对后续蛋白组学研究有重要作用.     

冻结破碎法提取组织蛋白方法初探

目的 比较冻结破碎法和匀浆法提取组织蛋白的效率,拟建立一种提取组织蛋白的新方法.方法 分别用冻结破碎器具SK-100和匀浆机处理小鼠不同部位的组织,提取总蛋白后进行蛋白定量,然后用Western blot检测β-actin蛋白表达.结果 冻结破碎法虽比匀浆法耗时稍长,但与匀浆法提取的总蛋白浓度以及β-actin蛋白表达无明显统计学差异.结论 匀浆法与冻结破碎法均可以用于提取小鼠各种组织的蛋白,都可以在实验室中展开,进而在蛋白质水平上进行相关功能的研究.     

胃黏膜特异表达JC病毒T抗原质粒构建及表达鉴定

 目的利用鼠胃黏膜上皮细胞中高活性的角蛋白19(K19)启动子构建K19-JCVT抗原表达质粒并进行鉴定。方法利用PCR方法突变JC病毒T抗原中的NdeⅠ位点,并在两端插入BclⅠ位点,通过BamHⅠ位点将DNA片段与K19启动子连接,构建K19-JCVT抗原质粒。利用酶切和DNA测序确认其DNA序列。免疫组化筛选细胞角蛋白19阳性胃癌细胞,对细胞角蛋白19表达阳性的胃癌细胞系AGS进行K19-JCVT抗原质粒转染,用Western
      blot方法检测JCVT抗原的表达情况。结果K19-JCVT抗原表达质粒成功构建,AGS胃癌细胞系高表达细胞角蛋白19并用于K19-JCVT抗原表达质粒转染,转染K19-T抗原质粒的AGS细胞系有T抗原表达。结论同义突变和相似连接在质粒构建中起到关键作用,酶切位点的甲基化也是值得注意的问题。