抗幽门螺杆菌rHpaA鸡蛋黄抗体的研制

目的：采用基因工程技术表达重组幽门螺杆菌黏附素rHpaA，以此蛋白为抗原制备抗rHpaA的高特异性鸡蛋黄抗体。方法：诱导重组质粒pQE30-HpaA在大肠杆菌中大量表达rHpaA蛋白，用rHpaA免疫鸡，以水稀释法联合盐析法提取纯化IgY，采用Bradford法测定含量，SDS—PAGE电泳分析纯度，Western blot鉴定抗原特异性，ELISA测定效价和巴氏消毒后的活性。结果：IgY提纯后含量为24．6mg／ml，纯度约为90％，Western blot显示在相对分子量30000处出现单一条带，ELISA效价为1：12800，巴氏消毒后未见效价损失。结论：成功获得了高浓度、高纯度、高效价、耐巴氏消毒的特异性IgY，为进一步制备预防幽门螺杆菌感染的特异性IgY制剂奠定了基础。     

幽门螺杆菌重组中性粒细胞激活蛋白蛋黄抗体的制备

目的:制备高效价的.抗Nap蛋黄抗体(IgY).方法:大量诱导、培养重组菌pQE30-NapA-DH5α获得重组蛋白Nap,经Ni2 -NTA树脂纯化后,Bradford法测定蛋白浓度.用纯化的Nap蛋白免疫鸡,水稀释结合氯仿有机沉淀法提取IgY.ELISA法测定抗体产生的时间-效价变化.将效价高的Nap-IgY用硫酸铵沉淀法纯化浓缩,间接ELISA法检测效价,Bradford法测定蛋白含量.Western blot检测制备的Nap-IgY的抗体活性.结果:Nap重组蛋白主要以包涵体形式表达,蛋白含量为0.37 g/L.免疫鸡的蛋黄提取物可与Nap发生特异性反应,IgY效价随免疫时间增加而升高,在110 d达最高效价.经纯化浓缩后,Nap-IgY的效价为1:12800,蛋白浓度为23.67 g/L.结论:成功制备了高浓度、高效价的Nap特异性IgY.     

幽门螺杆菌体内试验的研究现状

幽门螺杆菌（Hp）体内试验是研究Hp致病机制与免疫机制,验证致病因子的依据,并用于临床药品、疫苗与治疗方案的探索,它包括动物体内和人体内试验,常用于该试验的动物有猪、小鼠、蒙古沙鼠、大鼠、狗、猴等.本文就幽门螺杆菌体内试验的类型、方法、特点等方面对该领域现状作了综述.     

幽门螺杆菌napA-ctxB融合蛋白的基因克隆与表达

目的 克隆、表达幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白napA与霍乱毒素B亚单位ctxB融合基因napA-ctxB(nctB),为制备预防H.pylori感染的疫苗奠定基础.方法 用PCR方法扩增ctxB目的基因片段,克隆至pQE30-napA质粒的napA基因上游,构建含双基因的表达质粒pQE30-napA-ctxB(pQE30-nctB),经测序分析确认后转化E.coli DH5α,经IPTG诱导表达融合蛋白NCTB,融合蛋白NCTB经镍离子柱纯化.结果 PCR扩增出807 bp的目的基因片段nctB.工程菌pQE30-nctB-DH5α经IPTG诱导后,SDS-PAGE显示有新生的蛋白表达条带,Mr为30 000,与预期的一致,约占菌体总蛋白的27%,重组蛋白用Ni2 -NTA 树脂提纯,纯化后的蛋白质经SDS-PAGE分析可见单一条带,图象软件分析表明纯度可达94%以上.Western blot 显示重组蛋白质有良好的抗原性.结论 构建含双基因的表达质粒pQE30-nctB成功,并在大肠杆菌DH5α中高效的表达.     

肾肝宁胶囊治疗慢性肾功能衰竭患者的疗效观察

目的：观察肾肝宁胶囊治疗慢性肾功能衰竭的疗效。方法：将86例慢性肾功能衰竭患者随机分成两组,两组基础治疗相同,治疗组加用肾肝宁胶囊,均8周为1个疗程。观察疗效并检测治疗前后患者的尿素氮及血肌酐水平。结果：治疗组总有效率为88.5%,明显优于对照组的52.9%,治疗组治疗后生化指标改善情况明显优于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：肾肝宁胶囊治疗慢性肾功能衰竭的疗效肯定。     

120例缺血性脑卒中患者的颈动脉超声检查的临床意义

目的研究超声检查在缺血性脑卒中患者颈动脉粥样硬化的重要临床意义。方法对120例缺血性脑卒中患者颈动脉粥样硬化（CAS）斑块的好发部位和超声分型进行检测分析。结果发现缺血性脑卒中患者颈动脉粥样硬化斑块检出率100%,以颈总动脉分叉部居多,以左侧为多见,且多为软斑、扁平斑,软斑是脑梗死的主要栓子来源之一。结论应用超声技术检测缺血性脑卒中患者颈动脉粥样硬化、斑块,有助于了解疾病的不同状态,便于判断病程及预后,对临床工作具有很大的指导意义。     

融合蛋白VacA-HpaA卵黄抗体的体外研究

目的：研究VacA-HpaA融合蛋白的鸡卵黄抗体（IgY）的理化特性和生物学活性,为制备集预防与治疗为一体的抗H.pylori感染的制剂奠定基础。方法：以纯化的VacA-HpaA融合蛋白免疫产蛋鸡,水稀释法获取蛋黄抗体（VacA-HpaAIgY）。（1）用硫酸铵沉淀法纯化IgY后,用SDS-PAGE分析其纯度,Bradford法测定蛋白含量。（2）用间接ELISA法检测该IgY的耐热性、耐酸性及其对酶消化的耐受作用。（3）采用Western blot分析IgY的特异性并检测其效价。（4）用MTT法检测不同浓度VacA-HpaAIgY对细胞毒活性的中和作用。（5）用扫描电镜观察VacA-HpaA IgY对AGS细胞粘附的中和作用。结果：（1）该IgY纯度为60%,蛋白浓度为22g/L;（2）具有一定的耐热性、耐酸性和耐胃蛋白酶能力;（3）Western blot分析显示IgY的特异性,在相对分子量约27000和30000处出现在相应的条带;（4）该IgY对VacA细胞毒活性有中和作用,且具有量效性和时效性;（5）IgY可阻止H.pylori菌体蛋白的粘附作用。结论：该IgY具有良好的理化和生物学特性,可用于制备抗H.pylori感染的防治制剂。     

门冬氨酸洛美沙星治疗34例院内肺部感染的疗效分析

目的探讨应用注射用门冬氨酸洛美沙星治疗老年人院内肺部感染的有效性与安全性。方法选取65例老年人院内肺部感染患者,随机分为门冬氨酸洛美沙星组（34例）与盐酸左氧氟沙星组（31例）,痰菌分离均为革兰氏阴性杆菌占优势,观察两组疗效。结果门冬氨酸洛美沙星组与盐酸左氧氟沙星组临床有效率分别为94．1％和90．3％,两组细菌消除率分别为95．6％和84．2％,两者无显著性差异。门冬氨酸洛美沙星不良事件多于盐酸左氧氟沙星组。此外,药敏试验显示：门冬氨酸洛美沙星与左氧氟沙星敏感率均为91．8％。结论注射用门冬氨酸洛美沙星治疗院内肺部感染疗效肯定,但对于老年患者,其不良反应出现的机率相对增多,对合并有糖尿病的患者易引起血糖紊乱,所以应谨慎使用。     

蛛网膜下腔出血患者血中内皮素、一氧化氮水平及相关性的研究

目的 研究一氧化氮(NO)和内皮素(ET)与蛛网膜下腔出血(SAH)的关系。方法 应用硝酸还原法和放免分析法检测56例SAH患者急性期与缓解期血清NO和血浆ET水平。结果 SAH患者急性期和缓解期血清NO水平显著低于对照组，血浆ET水平显著高于对照组。发生再次出血的患者血清NO水平明显低于其他患者，血浆ET水平无明显差异。结论 NO和ET与SAH的发生、发展有关。血清NO水平可能成为判断预后的一项指标。     

幽门螺杆菌体内试验的研究现状

幽门螺杆菌(Hp)体内试验是研究Hp致病机制与免疫机制,验证致病因子的依据,并用于临床药品、疫苗与治疗方案的探索,它包括动物体内和人体内试验,常用于该试验的动物有猪、小鼠、蒙古沙鼠、大鼠、狗、猴等。本文就幽门螺杆菌体内试验的类型、方法、特点等方面对该领域现状作了综述。