我国通过植入前胚胎遗传学检测技术阻断罕见遗传病的发展现状

        出生缺陷是我国乃至全球所面临的严峻挑战，指婴儿出生前发生的身体结构、功能或代谢异常，与环境、遗传因素密切相关，其中遗传因素又包括染色体异常与基因突变［1］。罕见遗传病作为出生缺陷的重要组成部分，80%~85%具有遗传基础，且绝大多数由基因突变导致［2］。 浏览更多请关注本刊微信公众号及当期杂志。     

沉默信息调节因子家族参与病理妊娠的研究进展

异常的母体炎症反应及氧化应激是病理妊娠的两大致病机制。沉默信息调节因子（sirtuin）家族是一类高度保守的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖性脱酰基酶,通过调控蛋白的翻译后修饰,广泛参与包括氧化应激和炎症反应在内的多种生理过程,与病理妊娠的发生发展密切相关。其表达下降可通过促进子宫收缩及胎膜破裂引起自发性早产、通过干扰糖代谢关键酶活性及促进氧化应激诱发妊娠糖尿病、通过降低滋养细胞增殖及侵袭能力导致子痫前期、通过促进辅助性T细胞1型细胞因子及胆汁酸的生成引起妊娠肝内胆汁淤积症,也可通过诱发线粒体功能障碍导致胎儿生长受限。此外,sirtuin的表达及活化可通过饮食调节,故未来有望成为妊娠相关疾病预防和治疗的新靶点。本文回顾了sirtuin家族在病理妊娠发生发展中的作用及其对此类患者子代发育影响的最新研究进展。     

单细胞人白细胞抗原多基因位点检测的配型预选性研究及意义

目的　探索单细胞扩增前引物延伸法 (PEP)全基因组扩增 ,后续多重巢式聚合酶链反应 (MN PCR)同步扩增人类白细胞抗原 (HLA) A、B和DR基因位点检测技术 ,进行配型预选研究的价值。方法　采用PEP MN PCR方法测定单个淋巴细胞和单个胚胎细胞的HLA A、B和DR基因型。结果　PEP MN PCR对单个淋巴细胞的扩增率、扩增准确率、假阴性率和假阳性率分别为 91 7%、95 7%、3 0 %和 1 7% ,而单个胚胎细胞则分别为 97 7%、97 5 %、2 3%和 2 6 % ,两种细胞检测结果比较差异均无显著性意义 (P >0 0 5 )。结论　单细胞PEP MN PCR检测HLA多基因位点有较高的扩增效率和扩增准确率 ,具有应用于植入前胚胎遗传学分析 ,筛选HLA匹配胚胎 ,提供脐血造血干细胞移植治疗同胞疾病的应用价值。     

年龄与颗粒细胞卵泡刺激素受体表达的关系

目的:探讨卵巢正常反应型妇女中,年龄与颗粒细胞卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)表达的关系。方法:根据年龄将90例卵巢正常反应型妇女分为A组:>37岁(30例),B组:35～37岁(30例),C组:<35岁(30例)。采用蛋白印迹法测定颗粒细胞FSHR蛋白的水平。电化学发光法测定卵泡液(follicularfluid,FF)中的FSH浓度。比较各组成熟卵泡数、重组FSH(rFSH)使用剂量的差异。结果:3组之间rFSH使用剂量(A组:3494.0±1086.9IU,B组:3000.8±902.9IU,C组:2510.0±726.8IU)、卵泡液FSH浓度(A组:8.6±0.6pmol/L,B组:8.2±0.7pmol/L,C组:7.2±0.6pmol/L)和成熟卵泡数(A组:6.9±1.9,B组:7.9±1.9,C组:9.1±1.6)有显著差异(P均<0.01)。随着年龄增长,FSHR蛋白相对表达量显著降低(A组:20.28±0.08,B组:0.32±0.08,C组:0.36±0.06),P<0.01。结论:年龄与颗粒细胞FSHR蛋白表达有关。临床上对大龄妇女采取增加rFSH剂量的方法并不能增加成熟卵泡数的原因可能与FSHR表达下降有关。     

DNA甲基转移酶1和组蛋白去乙酰化酶1在子宫内膜异位症在位内膜的表达

目的 探讨DNA甲基转移酶1（DNMT1）和组蛋白去乙酰化酶1（HDAC1）在子宫内膜异位症患者子宫内膜中的表达及其两者在子宫内膜异位症发生、发展中的作用。方法 选取子宫内膜异位症患者在位内膜18例, 无子宫内膜异位症的对照子宫内膜20例,应用免疫组织化学法测定DNMT1的分布,应用免疫印迹法检测内膜组织中DNMT1和HDAC1蛋白的表达。结果 免疫组织化学提示,DNMT1主要分布于子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞的胞核;子宫内膜异位症在位内膜中DNMT1的表达强度显著高于对照组子宫内膜（P<0.01）。免疫印迹发现,子宫内膜异位症在位内膜DNMT1和HDAC1蛋白的表达高于对照组子宫内膜, 差异有统计学意义（P<0.05）;且两者的表达呈正相关 （P<0.05）。结论 DNMT1和HDAC1在EMs患者的高表达可能在子宫内膜异位症的发生、发展中起着重要作用。     

生殖安全研究进展

生殖安全的理念在2005年中华医学会生殖医学分会成立大会上提出至今,受到了国内外学者前所未有的关注。胚胎源性疾病的新概念已在国家重大基础研究计划———"ART致胚胎源性疾病机制研究"中立项开篇探索。辅助生殖技术(ART)涉及的超促排卵、体外受精、体外培养、配子/胚胎冻融、卵裂球活检等非生理性的过程,引发了相应的"生殖安全性问题"。其可能与高流产率、早产、先天畸形、低出生体质量等不良健康风险、遗传病、染色体异常、表观遗传修饰异常、神经系统发育异常、肿瘤等成年期疾病发生有联系。除了ART本身,亲代生殖障碍相关疾病可通过干扰分子表达、信号通路等影响配子发生、受精、胚胎发育及着床。亲代妊娠期并发症引起的宫内环境异常可能通过干扰基因、蛋白表达导致子代迟发性疾病的发生。亲代感染性疾病则可通过配子垂直传播给子代,影响子代健康。生殖安全还依赖于环境安全,环境中各种有害因素包括物理和化学因素均可能对生物生殖行为产生不良影响。     

Polo-样激酶1在子宫内膜异位症患者在位和异位子宫内膜中的表达

目的探讨Polo－样激酶1（PLK1）在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法采用逆转录（RT—PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blotting）及免疫组织化学的方法检测子宫内膜异位症患者的异位子宫内膜组织29例和在位子宫内膜组织20例及正常子宫内膜组织30例中PLK1的表达。结果PLK1蛋白在内异症组增殖期异位（2．19±0．63）和在位子宫内膜组织（1．78±0．59）上的表达量明显高于对照组子宫内膜组织（1．21±0．30）上的表达量（P〈0．05）。PLK1蛋白在内异症组分泌期异位（1．15±0．332）和在位子宫内膜组织（1．00±0．33）上的表达量明显高于对照组子宫内膜组织（0．82±0．24）上的表达量（P〈0．05）。内异症组增殖期和分泌期异位和在位子宫内膜组织上PLK1的表达量比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论PLK1蛋白的高表达可能与子宫内膜异位症的发生发展有关。     

IGF-Ⅰ,胰岛素和雌二醇对雌性大鼠垂体细胞分泌LH的

ＬＨ分泌受到性激素正、负反馈调节的控制。胰岛素样生长因子 Ⅰ (ＩＧＦ Ⅰ )可能也参与ＬＨ分泌的调节〔1〕。本实验观察在有或无血清的培养条件下 ,ＩＧＦ Ⅰ和Ｅ2 对雌性大鼠垂体细胞ＬＨ分泌的影响。一、材料和方法1.材料 :人重组ＩＧＦ Ⅰ、胰岛素、Ｅ2 和ＧｎＲＨ购于Ｓｉｇｍａ公司。无酚红的Ｍ199培养液购于德国柏林生物化学公司。2 .方法 :(1)垂体细胞的制备 :从成年 (2 0 0～ 30 0ｇ)发情期的雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 (ＣｈａｒｌｅｓＲｉｖｅｒ,ＢｏｒｃｈｅｎＫｉｒｃｈｂ)获取垂体。胰酶消化法制备垂体细胞悬液〔2〕。将垂体细…