孕妇下生殖道解脲脲原体感染与妊娠结局关系的探讨

应用聚合酶链反应技术，对２１６例妊娠１２－３７周孕妇的宫颈阴道分泌物和其中１０９例有孕妇分娩时的羊水进行解脲脲原体ＤＮＡ检测，同时临床观察２１６例孕妇的妊娠结局。结果：宫颈阴道分泌物ＵＵ ＤＮＡ阳性率为４３．０６％，宫颈阴道ＵＵ ＤＮＡ阳性组对应的羊水ＵＵ检出率明显高于阴性组，两组平均孕周，平均出生体重，平均Ａｐｇａｒ评分以及胎儿窘迫，早产，剖宫产，低出生体重儿，低Ａｐｇａｒ评分和瘭生儿畸形的发五     

人瘦素分离纯化的实验研究

背景：瘦素是脂肪组织产生的一种激素，具有广泛的生理作用，也是近年能量代谢研究的热点之一，所用瘦素主要是大肠杆菌的表达产物，后者以不溶解的包含体形式存在，需要通过烦琐的复性过程才能获得具有生物学活性的人瘦素。目的：为获得天然溶解形式的人瘦素．探索其非亲和层析纯化条件，为进一步可能的产业化提供依据。设计：实验观察。单位：一所医学院的生化教研室分子生物学实验室。材料：选择强阴离子交换剂(Sepharose Q)和疏水介质(Phenyl Sepharose 6)在不同条件下进行层析的方法，以尽可能除去样品中的杂质。方法：将培养获得的上清液在pH7．5的条件下首先经过Q柱柱层析纯化，收集目的蛋白；随后在高盐[mol／L(NH4)2SO4]状态下通过疏水层析进一步纯化。主要观察指标：经凝胶扫描分析，纯化前的培养上清液人瘦素纯度为42．3％，Q柱柱层析纯化后纯度达到89．6％，疏水层析进一步纯化后纯度达到96．2％。结果：纯化产物在SDS-PAGE上呈现单一条带。经凝胶扫描分析，纯化前的培养上清液人瘦素纯度为42．3％，Q柱柱层析纯化后纯度达到89．6％，疏水层析进一步纯化后纯度达到96．2％。结论：通过强阳离子交换层析和疏水层析的合并应用，可将毕赤酵母表达系统表达的人瘦素进行有效纯化，纯度可达镍柱亲和层析的纯化结果，为进一步可能的产业化生产人瘦素提供了可靠依据和方法，为围绕瘦素的相关领域研究奠定了实验学基础。     

核仁素蛋白调节嗅觉介导素4 mRNA表达的研究

目的：探讨核仁素（nucleolin,NCL或C23）蛋白与嗅觉介导素4（olfaetomedin 4,OLFM4）mRNA之间是否存在相互作用,以及NCL对OLFM4转录水平的调控。方法：本研究利用RNA染色质免疫共沉淀（RNA chromatin immunoprecipitation assay,RNA chip）结合RT-PCR确定NCL是否能与OLFM4 mRNA相互作用,以及双荧光素酶报告基因试验检测NCL对OLFM4报告基因的影响。结果：在SGC-7901细胞内,NCL能与OLFM4 mRNA结合,且过表达NCL质粒的相对荧光素酶活性约为对照质粒的1.15倍,敲低NCL质粒的相对荧光素酶活性约为对照质粒的0.8倍,NCL对OLFM4具正向调节作用。结论：NCL与OLFM4 mRNA可以相互结合,且NCL可以通过增加OLFM4转录水平和延长OLFM4 mRNA的半衰期来增加OLFM4 mRNA的稳定性。     

胰岛素对胎盘肥胖基因表达的影响

目的 :探讨胰岛素水平升高对胎盘肥胖基因表达瘦素的影响。方法 :采用放射免疫法分别检测 35例糖尿病产妇、40例正常产妇的外周血胰岛素、瘦素水平 ,同时分别检测两组的脐血瘦素水平。采用 RT- PCR和荧光定量分析法分别检测两组的胎盘肥胖基因表达的 m RNA水平。并对结果进行统计学相关分析。结果 :1糖尿病产妇外周静脉血胰岛素水平、瘦素水平均高于正常产妇 (P<0 .0 1) ,胰岛素与瘦素水平两者具有明显的相关性 (r=0 .5 5 ,P<0 .0 0 0 1) ;2两组产妇的胎盘肥胖基因表达的 m RNA水平有明显的差异 (P<0 .0 1) ;3胎盘肥胖基因表达的 m RNA水平与脐血瘦素水平有明显的相关性 (r分别为 0 .5 2、0 .48,P<0 .0 0 1) ;4两组产妇的新生儿体重的比较也有明显的差异 (P<0 .0 1)。结论 :高胰岛素对糖尿病人胎盘肥胖基因的表达有上调作用 ,它可能是糖尿病产妇的胎儿容易出现超体重儿 (巨大儿 )的重要原因之一     

有双重活性的重组胸腺素α1与复合α干扰素融合蛋白的分离纯化

背景: 研究表明,将干扰素与胸腺素α1联合应用可增强干扰素的抗病毒作用。 目的：获得既具有干扰素抗病毒活性又有胸腺素α1增强免疫功能的双重活性重组融合蛋白。 设计、时间及地点：体外对比试验,于2003-03/2004-12在重庆康尔威药业股份有限公司药物研究所完成。 材料：融合基因片断由上海生工合成,人羊膜细胞、水泡性口炎病毒购自上海生化与细胞生物所,对照品IFNα1b、IFNα2a和胸腺素α1为市售药品。 方法：选择大肠杆菌偏爱的密码子,将合成的胸腺素α1与复合干扰素编码序列构成的融和基因克隆至大肠杆菌表达载体pET-22b(+)、在宿主菌BL21(DE3)-Codon plus-RP-X中表达融合蛋白。通过硫酸铵沉淀、疏水层析、阴离子交换层析、阳离子交换层析、分子筛层析等方法进行分离纯化。采用细胞病变抑制法测定融合蛋白的抗病毒活性,采用细胞增殖实验检测融合蛋白对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。 主要观察指标：重组融合蛋白抗病毒的活性和促小鼠脾淋巴细胞增殖活性。 结果：①在大肠杆菌中表达的融合蛋白呈胞内可溶性表达,表达量占细菌总蛋白的20%以上。②纯化后,融合蛋白的纯度达96%以上。③融合蛋白的抗病毒活性优于市售的IFNα1b、IFNα2a。④融合蛋白的促淋巴细胞增殖活性与市售胸腺素α1相似。 结论：在大肠杆菌中表达的胸腺素α1与复合干扰素融合蛋白既具有干扰素抗病毒活性又有胸腺素α1的增强免疫功能。     

重组人瘦素的分离纯化

目的：探索毕赤酵母表达的人瘦素的非亲和层析纯化方法。方法：采用强阴离子交换柱(Sepharose Qfast flow)和疏水层析柱(Phenyl Sepharose 6 fast flow)在pH7．5的条件下进行纯化。结果：经Q柱一步纯化后，产物纯度由42．3％到达89．6％，随后通过疏水层析纯化后，产物纯度达到96．2％。经SDS—PAGE证实为单一蛋白条带。结论：通过上述手段已成功分离纯化得到纯度较高的由毕赤酵母表达的重组人瘦素。     

聚合酶链反应及其应用

聚合酶链反应(Polymerase ChainReaction)简称PCR.它由引物介导的在体外将特定DNA序列在DNA聚合酶的作用下进行扩增的方法.为要从生物材料中获得某一段特定的DNA序列(基因),往往需要经过非常繁琐的步骤并花费大量的时间,PCR技术的发明则是在该方面取得了重大突破.这种技术无需构建含目的基因的重组载     

与海洛因依赖有关的特异性mRNA研究

目的：寻找与海洛因依赖有关的特异性基因。方法：用递增法建立海洛因依赖小鼠模型。纳洛酮催瘾后，分别提取实验组及对照组小鼠脑内的总RNA、mRNA，然后进行抑制性消减杂交，杂交产物扩增，凝胶电泳分析。结果：实验组小鼠脑内mRNA含量高于对照组，并于实验组小鼠脑内分离出差异表达的cDNA片段。结论：海洛因依赖小鼠脑内可能存在特异性基因表达。     

山葵叶片、叶柄混合物的润肠通便作用及其功效物质的初步研究

目的:探讨山葵(Wasabi Japonica)叶、叶柄混合物的润肠通便作用及其相关的功效物质,为进一步开发利用这一山葵种植中的副产品作为医药用途提供依据.方法:将新鲜山葵叶、叶柄采用冷冻干燥,粉碎后获得叶、叶柄混合物,通过酶-重量法测定了其总膳食纤维、可溶性膳食纤维(Soluble dietary fibre,SDF...