静脉注射免疫球蛋白非敏感型川畸病4例

目的：分析静脉注射免疫球蛋白（IVIG）非敏感型川畸病的特点及评估小剂量糖皮质激素治疗效果。方法：结合文献，对4例IVIG非敏感型川畸病进行临床分析，在治疗基础上加用小剂量地塞米松，观察疗效。结果：IVIG治疗不敏感的4例川畸病患儿，加用地塞米松静注后48h内均退热，预后满意。结论：对于IVIG非敏感型川崎病，在排除感染和抗凝治疗前提下，小剂量糖皮质激素作为二线药物是安全有效的。     

单侧臀大肌皮瓣推移修复骶部大褥疮

近几年来,我们应用单侧臀大肌皮瓣推移治疗骶部大褥疮获得成功,经随访1～2年无复发。 手术以梨状肌表面投影标志,以梨状肌下缘中点为中心顺肌纤维方向棱形切取大小适度的臀大肌肌皮瓣,游离臀下血管神经蒂,再将肌皮瓣推至准备好的创面上,进行无明显     

人疱疹病毒6型导单细胞产生IL—10

目的 探讨人疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）感染的免疫发病机理。方法 用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测白细胞介素＾－１０（ＩＬ－１０）等细胞因子的产生。结果 ＨＨＶ－６诱导单核细胞表达和产生ＩＬ－１０，细胞因子ｍＲＮＡ动力学研究发现ＴＮＦ－α（肿瘤坏死因子）、ＩＬ－１β及ＩＬ－６随ＩＬ－１０ｍＲＮＡ积累而减少，用抗人ＩＬ－１０单克隆抗体阻断ＨＨＶ－６诱     

哮喘患儿IL-4近侧启动子区克隆和多态性分析

目的：对哮喘症患儿白细胞介素-4(IL-4)近侧启动子区进行克隆并分析其DNA序列的多态性。方法：对40名有明显家族及过敏史哮喘患儿和１０名正常儿童，以多聚酶链式反应（PCR）结合单链构象多态性（SSCP）扩增、筛选IL-4近侧启动子片段，进一步构建正常对照和异常条带PCR产物的重组质粒pIL-4-Jx2，并用双脱氧链终止法对重组质粒进行序列测定。结果：在对40名患儿SSCP分析中发现了7组异常条带。DNA测序结果显示有４外变异位点于已知的调控元件之内或毗邻位点，１名病人-229位C被A所替代，该变异恰好位于IL-4正性调节元件-I(PRE-I)之内；２名病人负性调节元件-Ⅱ（NRE-Ⅱ）毗邻C被T所替代，TATA框前增加1个G；1名病人STAT-6元件附近缺少了ATTTT五碱基核苷酸。结论：过敏性哮喘患儿IL-4近侧启动子区DNA序列存在多态性，这可能与IL-4基因异常表达及哮喘的发病有关。     

外源性IL-4基因表达对K562细胞增殖及死亡的影响

目的：观察外源性ＩＬ－４对Ｋ５６２增殖及死亡的影响。方法：用逆转录病毒载体将ＩＬ－４ｃＤＮＡ导入Ｋ５６２细胞,检测其增殖反应,用流式细胞依及ＤＮＡ片段凝胶电泳检测细胞增殖周期及凋亡情况,用台盼蓝排除法计数死亡细胞。结果：高表达ＩＬ－４的Ｋ５６２细胞增殖反应明显低于表达株。亲代Ｋ５６２株;前者２过程中死亡细胞百分率明显升高且可被ＩＬ－４单克隆抗体阻断,但其自发凋亡细胞数及增殖周期均无改变。结论Ｌ：外     

人IL-4基因修饰诱导肝母细胞瘤细胞凋亡及分化的研究

目的　研究人白细胞介素 4(IL 4)基因修饰对肝母细胞瘤细胞凋亡及分化的影响及可能机制。方法　以逆转录病毒为载体将人IL 4基因导入人肝母细胞瘤细胞系 (HepG2 )细胞。台盼蓝拒染、瑞氏染色、放射免疫测定、流式细胞仪细胞周期分析、原位杂交等方法检测人IL 4基因修饰后细胞形态、甲胎蛋白合成以及原癌基因c fos、c jun、c myc表达的变化。流式细胞仪AnnexinⅤ /PI双染色法及间接免疫荧光染色法检测凋亡细胞及凋亡调控基因p5 3、bcl 2的蛋白表达。结果　 (1)人IL 4基因修饰较空载体修饰及野生型HepG2细胞的细胞周期发生G0 /G1期阻滞 ,甲胎蛋白分泌量及原癌基因c fos、c jun、c myc表达降低 (P <0 .0 0 1)。细胞在形态及功能上趋向正常肝细胞转化 ;(2 )较空载体修饰及野生型HepG2细胞 ,IL 4基因修饰后部分细胞形态上出现核固缩等典型凋亡细胞的特征 ,流式细胞仪亦检测到 18.5 %± 4.7%的凋亡细胞 ;(3)人IL 4基因修饰增加p5 3而抑制bcl 2表达 (P <0 .0 5 )。结论　人IL 4基因修饰可诱导肝母细胞的凋亡及分化 ,诱导凋亡细胞可能与上调p5 3蛋白及抑制bcl 2蛋白表达有关。     

儿童特发性肾病综合征低IgG血症机制：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白过表达对滤泡辅助性T细胞数量的可能影响

目的探讨儿童特发性肾病综合征(INS)的低免疫球蛋白(Ig)G血症可能机制。 方法选择2015年9月至2016年10月,于深圳市儿童医院接受治疗的40例激素敏感型INS患儿为研究对象。按照患儿病情,将其分为INS初发组(n＝20)和INS缓解组(n＝20),选择同期在该院接受健康体检的同年龄健康儿童纳入对照组(n＝20)。采用流式细胞术(FCM)检测受试儿外周血单个核细胞(PBMC)中滤泡辅助性T细胞(Tfh,CD4^＋CXCR5^＋ICOS^highT)、初始B细胞(CD19^＋CD27^－IgD^＋B细胞)、转化前记忆B细胞(CD19^＋CD27^＋IgD^＋ B细胞)、转化后记忆B细胞(CD19^＋CD27^＋IgD^－ B细胞)及浆细胞(CD19^＋CD27^＋IgD^－CD38^highB细胞)百分比;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),检测受试儿外周血CD4^＋T细胞相关基因mRNA表达水平;采用酶联免疫吸附试验、免疫荧光吸附试验,分别检测受试儿血浆白细胞介素(IL)-2水平、丙二醛浓度。采用单因素方差分析及最小显著性差异(LSD)-t法,对上述指标分别进行3组间及组间两两比较;对其中部分指标的相关性,采用Pearson相关分析法。本研究通过深圳市儿童医院伦理委员会批准(批准日期：2016-04-11),所有受试对象监护人知情并同意。 结果①INS初发组患儿血清总蛋白及白蛋白水平,以及血浆总IgG、IgG1、IgG2、IgG4水平等6项指标,均显著低于对照组健康儿童,血清总胆固醇浓度,则显著高于对照组,并且差异均有统计学意义(P<0.05)。②INS初发组患儿PBMC中Tfh百分比为(3.9±1.2)%,显著低于对照组的(5.2±1.1)%及INS缓解组的(4.9±1.2)%,并且差异均有统计学意义(P＝0.001,P＝0.021)。③INS初发组患儿PBMC中,转化后记忆B细胞、浆细胞百分比为(8.4±3.6)%、(7.5±2.0)%,均低于INS缓解组患儿的(11.6±2.7)%、(11.4±3.9)%及对照组健康儿童的(12.2±3.7)%、(12.5±3.4)%,并且差异均有统计学意义(均为P<0.001)。④INS初发组患儿的8项指标,如CD4^＋T细胞相关基因B淋巴细胞诱导成熟蛋白(Blimp)-1、IL-2Rα、IL-2Rβ、IL-2Rγ、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及雷帕霉素结合蛋白复合物(mTORC)1mRNA表达水平为(3.2±1.1)、(14.4±5.7)、(18.5±4.6)、(7.2±1.7)、(10.3±3.6)、(2.2±0.3)、(1.84±0.68)、(7.2±1.4),均高于INS缓解组患儿的(2.4±1.1)、(10.5±2.5)、(15.5±3.5)、(5.5±1.1)、(8.5±2.2)、(1.8±0.5)、(1.44±0.29)、(6.1±1.2)及对照组健康儿童的(2.4±1.1)、(10.3±5.5)、(14.6±4.8)、(5.6±2.5)、(1.56±0.42)、(2.4±1.1)、(10.3±5.5)、(14.6±4.8);而B细胞淋巴瘤因子(BCL)-6 mRNA表达水平为(1.22±0.29),则低于INS缓解组患儿的(1.49±0.35)及对照组健康儿童的(1.56±0.42),并且上述差异均有统计学意义(均为P<0.05)。⑤INS初发组患儿血浆IL-2水平及丙二醛浓度为(28.9±6.1) ng/L、(15.0±9.2) μmol/L,均高于INS缓解组患儿的(18.0±5.9) ng/L、(7.3±5.4) μmol/L及对照组健康儿童的(16.2±7.6) ng/L、(8.8±5.1) μmol/L,并且差异均有统计学意义(P<0.001、P＝0.022,P<0.001、P＝0.004)。⑥INS缓解组患儿与对照组健康儿童上述21项指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。⑦60例受试儿PBMC中Tfh百分比与血浆IgG水平、浆细胞百分比,均呈正相关关系(r＝0.692、0.809,P<0.001)。INS初发组20例患儿血浆丙二醛浓度与mTOR、mTORC1mRNA表达水平,亦均呈正相关关系(r＝0.627、P＝0.003,r＝0.794、P<0.001)。 结论INS患儿PBMC中Tfh百分比下降影响B细胞分化成熟,可能是导致患儿低IgG血症的原因之一。血浆IL-2水平升高和高脂血症导致的mTOR和mTORC1过表达,可能是抑制INS患儿Tfh分化的重要原因。     

川崎病患儿血清趋化因子检测及意义

为探讨血清趋化因子-单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和正常T细胞表达和分泌的活化调节蛋白(RANTES)水平与川崎病及其发生冠状动脉并发症的关系及意义,应用双抗体夹心ELISA法,检测36例健康体检儿童及52例川崎病患儿静脉注射丙种球蛋白(IVIG)治疗前后血清MCP-1、RANTES水平。结果显示,川崎病患儿急性期血清MCP-1、RANTES水平明显高于正常儿童(P<0.01);川崎病合并冠状动脉损伤(CAL)患儿急性期血清MCP-1水平明显高于无冠状动脉损伤者(P<0.01);静脉注射丙种球蛋白治疗可明显降低川崎病患儿血清MCP-1、RANTES水平(P<0.01)。提示趋化因子MCP-1、RANTES可能参与川崎病的免疫发病机制,急性期血清MCP-1水平可作为判断川崎病冠状动脉损伤的一个指标;降低趋化因子水平是IVIG治疗川崎病的可能机制。     

他巴唑引起严重弥漫性关节炎1例

患儿女 ,6岁 ,于 2 0 0 2年 8月因“多饮、多食、多汗、易怒 3个月”第 1次入院。查体 :心率 14 0 /min ,Bp 15 / 7kPa ,眼球轻度突出 ,甲状腺Ⅱ度肿大。实验室检查 :T3 8 71nmol/L (正常值 0 95～ 2 5 0 ) ,T4>32 0 0 0nmol/L(正常值 6 0～ 12 0 ) ,FT3 4 3 76 pmol/L(正常值 4 0～ 8 3) ,FT4>70 0 0 pmol/L(正常值 9～ 2 0 ) ,TSH <0 0 5mU/L(正常值 0 2 5～ 5 0 0 )。甲状腺B超示甲状腺弥漫性肿大。经他巴唑 5mg日三次口服 ,心得安 10mg日二次口服 ,治疗 8d后 ,基础代谢率由 73%降为 4 3% ,复查甲状腺功能为T36 38nmol/…     

小儿原发性肾病综合征Tamm-Horsfall蛋白与β_2微球蛋白水平改变的意义

目的：研究小儿原发性肾病综合征（ＰＮＳ）Ｔａｍｍ－Ｈｏｒｓｆａｌ蛋白（ＴＨＰ）与β２微球蛋白（β２ＭＧ）水平改变的意义。方法：对小儿ＰＮＳ６０例活动期和缓解期血ＴＨＰ、β２ＭＧ水平和尿ＴＨＰ、β２ＭＧ排泄量进行测定。结果：血ＴＨＰ、β２ＭＧ值均在正常范围。尿ＴＨＰ排泄量持续增高，且以激素治疗耐药和依赖者增高为著。β２ＭＧ排泄ＰＮＳ－Ｉ完全正常；ＰＮＳ－Ⅱ活动期增高，缓解期恢复正常；ＰＮＳ－Ⅲ持续增高。肾合成ＴＨＰ功能增强，原因不明。尿β２ＭＧ排泄增多可能系近曲小管功能受损所致。结论：ＴＨＰ和β２－ＭＧ水平改变对ＰＮＳ有重要意义