鰤鱼诺卡氏菌全肽聚糖的提取及鉴定

以鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)为研究材料,经扩大培养,离心集菌,用三氯乙酸处理以除去细胞壁上的磷壁酸及菌体内的核酸,甲醇、丙酮脱脂后,再经胰蛋白酶及中性蛋白酶复合酶解去除菌体内部的蛋白质,离心清洗、冻干即可制得肽聚糖.经过溶菌酶溶解试验,紫外可见光谱扫描分析证明所得产物为肽聚糖,透射电镜观察显示所提取的肽聚糖为囊状结构,且仍保持着原有的细菌细胞形态,证实所提取的肽聚糖为全肽聚糖.     

鲫鱼维隆气单胞菌和腐败希瓦菌的分离鉴定、致病性和药敏分析

从患病鲫鱼肝、肾、血体内分离到JYV1605101和JYF1605102 2株细菌,人工感染试验和溶血活性测定表明这2株菌对健康鲫鱼具有较强毒力,菌株JYV1605101对鲫鱼LD_(50)为3.31×10~3cfu·g~(-1),对绵羊、小鼠、乌鳢、鲫鱼、鲤鱼、加州鲈等6种动物血细胞呈β溶血;菌株JYF1605102对鲫鱼LD_(50)为1.48×10~2cfu·g~(-1),对乌鳢、鲫鱼、鲤鱼、加州鲈的血细胞呈β溶血,但对绵羊和小鼠血细胞呈α溶血.经形态学观察,生理生化试验及16S rDNA基因序列分析,鉴定菌株JYV1605101为维隆气单胞菌(Aeromonas veronii),菌株JYF1605102为腐败希瓦菌(Shewanella putrefaciens).菌株JYV1605101具有胞外蛋白酶、明胶酶、淀粉酶活性,不具有脲酶、脂酶和卵磷脂酶活性;菌株JYF1605102具有胞外蛋白酶、明胶酶活性,不具有脲酶、脂酶、淀粉酶和卵磷脂酶活性.药敏试验表明,2株菌都对其中的18种药物较敏感,根据渔业用药规定和常用药情况,氟苯尼考、四环素、米诺环素、强力霉素可作为鲫鱼维隆气单胞菌和腐败希瓦菌感染的候选控制药物.     

不同品系大黄鱼致死低温的研究

在室内人工降温条件下，研究了2个品系大黄鱼（岱衢族DJ、闽-粤东族M-YD）对低温的耐受力，计算得出每个品系的半致死低温，并对降温过程中大黄鱼行为活动的变化进行了观察．试验结果表明岱衢族大黄鱼死亡温度范围是6．7-4．2℃，闽-粤东族大黄鱼是7．2-4．7℃．对2个品系半致死低温的研究表明，闽-粤东族大黄鱼对低温的耐受力较弱．     

梭子蟹乳化病的间接荧光抗体快速诊断技术

以梭子蟹乳化病的病原菌-溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)为抗原制备兔抗血清,利用异硫氰酸荧光素标记的羊抗兔血清建立了梭子蟹乳化病的间接荧光抗体快速诊断技术,并应用该技术对人工感染梭子蟹、养殖现场梭子蟹及养殖水体进行溶藻弧菌检测.结果表明:该技术检测溶藻弧菌有较高的灵敏度,最低检测量为105cfu·mL-1.人工感染24 h后,就能在梭子蟹鳃和血淋巴中检测到溶藻孤菌.现场检测显示表观有病蟹的阳性检出率为90%,表观健康蟹的阳性检出率为20%,说明间接荧光抗体技术不仅可以用于诊断已感染发病的梭子蟹,而且也可检测出带菌但病症不明显的梭子蟹.     

乌鳢伊丽莎白菌的分离鉴定及致病性研究

为解明宁波某养殖场乌鳢死亡的原因,从患典型症状病鱼体内分离到1株细菌WLY01,经形态学观察、生理生化表型鉴定和16S rDNA序列分析,鉴定该菌为伊丽莎白菌(Elizabethkingia sp.).该菌最适生长温度为37℃,其对绵羊血、小鼠血、乌鳢血和鲫鱼血等都有较强溶血活性,呈β溶血.人工感染试验表明:该菌主要通过鱼体表受伤部位感染,发病症状和死亡速度与创伤程度呈明显相关性,其8 d的LD_(50)为1.69×10~6cfu·g~(-1),对乌鳢具有较强致病性.药敏试验显示:该菌对米诺环素、恩诺沙星、利福平、强力霉素、磺胺异唑、依诺沙星等6种药物较敏感,因此,可把米诺环素、利福平、强力霉素、磺胺异唑等作为治疗鱼类伊丽莎白菌病的候选药物.