三聚氰胺人工抗原及多克隆抗体的制备

采用戊二醛法将三聚氰胺(Melamine,MEL)偶联到牛血清白蛋白(BSA)上合成免疫原三聚氰胺-牛血清白蛋白(MEL-BSA).三聚氰胺甲醛树脂法对三聚氰胺衍生化,再偶联到鸡卵清蛋白(OVA)合成包被原三聚氰胺-鸡卵清蛋白(MEL-OVA).对纯化后的合成抗原进行紫外扫描、红外扫描和SDS-PAGE电泳鉴定.免疫新西兰大白兔,检测抗体的生成.结果表明,免疫兔血清的效价达到了1∶20 000,从而为进一步建立三聚氰胺的免疫检测方法奠定了基础.     

茶叶中镉、铅、砷的浸出规律及快速测算方法研究

为明确茶叶中镉、铅、砷的浸出规律,探索茶叶中相应重金属元素的快速测算方法,分别采用微波消解和沸水浸提方法进行前处理,运用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)测定了茶叶、茶水和茶渣中的镉、铅、砷的含量,研究了3种元素的浸出规律及快速测算方法。结果表明,所测茶叶中镉、铅、砷的含量均未超过国家限定标准。在本研究提取条件下,镉、铅、砷三种元素在浸提20min茶水中的含量与其在茶叶中的含量均呈线性关系,镉的线性方程为Y=7.40623X+0.0235(r=0.9999),铅的线性方程为Y=5.44998X+0.03008(r=0.9935),砷的线性方程为Y=2.25405X+0.01115(r=0.9822)。因此,可以通过测定茶水中的镉、铅、砷含量来评估茶叶中的镉、铅、砷总量,以实现对茶叶中镉、铅、砷含量的快速测算;本研究明确了镉、铅、砷的浸出规律,提供了一种快速提取和检测茶叶镉、铅、砷含量的新方法。     

链霉素人工抗原及多克隆抗体的制备与鉴定

通过研究链霉素(SM)人工抗原的合成和多克隆抗体的制备,建立链霉素残留的免疫分析方法。以氧-缩甲基羟胺肟化链霉素的醛基,引入羧基,再用碳二亚胺法将半抗原与蛋白质载体连接,合成免疫原SM-cBSA。用戊二醛法合成包被原SM-OVA。用紫外扫描、SDS-PAGE分析偶联情况,计算得链霉素与cBSA、OVA的分子偶联比分别为7.6:1与17.7:1。经动物免疫获得效价为1:40000的链霉素多克隆抗体,采用间接竞争ELISA测定IC50为3.32ng/mL,与双氢链霉素的交叉反应率为105.21%,与同类的其他药物均无交叉反应。     

缓蚀阻垢剂ZH372SGR-2在电厂实现循环水“近零排放”中的应用

缓蚀阻垢剂ZH372SGR-2在浓缩系数3,补水含30%中水的条件下,阻垢、缓蚀性能优良,对节约水资源、实现日钢污水"近零排放",即对资源节约型和环境保护型的战略性目标有重要作用。     

赭曲霉毒素A直接竞争ELISA试剂盒的研制

在多克隆抗体的基础上研制了赭曲霉毒素A(OTA)直接竞争酶联免疫检测(cd-ELISA)试剂盒.在0 ～ 10 ng/mL范围内,该试剂盒50％抑制率(IC50)为1.09 ng/mL,检测灵敏度(IC15)为0.08 ng/mL;与赭曲霉毒素B、C的交叉反应率分别为6.28％和0.16％,而与黄曲霉毒素B1等生物毒素未见有交叉反应;板内与板间平均变异系数分别为2.21％和2.79％;花生、玉米和玉米粉3种样品中OTA的检测低限分别为1.71,1.26和1.85 μg/kg,平均添加回收率在83.80％～ 91.40％;与HPLC检测方法具有较高的相关性,相关系数(R2)分别为0.94、0.88和0.90;检测时间只需20 min,可用于花生、玉米及玉米粉中OTA的批量快速筛查.     

人血浆载脂蛋白B100分离纯化方法的研究

通过硫酸右旋糖苷(dextransulfate,DS)法沉淀人血浆中低密度脂蛋白(LDL)及利用SDS-PAGE电泳分离出其中载脂蛋白B100(apolipoprotein B100,ApoB100),与弗氏佐剂充分乳化后免疫新西兰大白兔,获得ApoB100特异性多克隆抗体,经过protein A纯化后制备抗体亲和层析柱,并利用该亲和层析柱分离纯化SDS-PAGE电泳ApoB100条带的电洗脱液和人血浆LDL中ApoB100.结果发现,所制备层析柱对电洗脱液中ApoB100具有较好纯化效果.     

化学发光免疫法检测食品中恩诺沙星残留的研究

建立了基于多克隆抗体的化学发光免疫检测技术,用于测定动物源性食品中恩诺沙星残留含量。反应条件优化结果为:抗体包被最佳稀释倍数为64000倍,最佳酶标抗原稀释倍数为256000倍。结果显示:该方法的回归曲线方程为y=-13.898x+110.38(R2=0.9893),检测线性范围为3~810pg/mL,IC50为69.63pg/mL,IC10为1.41pg/mL;鸡肉、鱼肉、虾肉、蜂蜜、牛奶空白组织样品中恩诺沙星的最低检测限分别为3.76、4.59、2.85、2.65、4.20pg/mL,最低定量限分别为6.13、7.35、3.57、3.73和6.48pg/mL,回收率在88.28%~102.6%,板内和板间的平均变异系数分别为2.61%和4.71%。表明本研究建立的化学发光免疫检测方法满足动物源性食品恩诺沙星残留的检测要求。     

苏丹红Ⅰ号多克隆抗体的制备与特异性鉴定

采用琥珀酸酐法,分别以BSA、OVA为载体蛋白合成了免疫抗原和包被抗原并通过SDS-PAGE凝胶电泳和紫外扫描法鉴定了合成的抗原为载体蛋白和苏丹红I号的复合物.将合成的免疫抗原用弗氏佐剂乳化后免疫新西兰大白兔,制备出多克隆抗体,经辛酸纯化,间接ELISA法测得有高效价血清抗体;进一步采用琼脂双扩散试验和免疫金试纸法鉴定出血清中含有苏丹红Ⅰ号特异性抗体.     

玉米赤霉烯酮单克隆抗体制备及免疫分析

采用活泼酯法将玉米赤霉烯酮(Zaralenone,ZEN)分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成免疫原ZEN-BSA和包被原ZEN-OVA,经紫外扫描和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定后免疫BALB/c小鼠;挑选产生高效价和高敏感性抗体的小鼠进行抗原超强免疫,取脾细胞与SP2/0细胞融合获得1株稳定分泌抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的杂交瘤细胞(3D8),经鉴定,该抗体亚类为IgG1,轻链为k型。经体内诱生腹水并纯化获得效价为1∶2.048×106的单克隆抗体。建立了基于单克隆抗体的ZEN间接竞争ELISA法(ic-ELISA),该方法IC50和检出限分别为22.89pg/mL和10.07pg/mL。与α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、α-玉米赤霉醇和β-玉米赤霉醇的交叉反应率分别为95%、8%、12%、6%和5%,而与黄曲霉毒素B1、呕吐毒素、伏马毒素B1和赭曲霉毒素A未见有交叉反应。在玉米、大麦、小麦和燕麦中加标的回收率在86.4%~104.8%之间。该方法灵敏特异,可作为快速检测谷物中玉米赤霉烯酮的初筛方法。     

生物计量及其在检验检疫中的应用研究

随着现代生物技术的发展和国际贸易的加剧,以生物检测标准和基准比对等为基础的生物计量和相关技术成为提高国际贸易有效性和安全性的重要手段.文章综述了生物计量的国内外研究进展,同时阐述了生物计量的意义、定义、存在的问题和应用范围,提出了生物计量今后发展的方向.