膜蛋白电镜结构检测的研究进展

膜蛋白是生物蛋白家族的重要组成部分,由于膜蛋白所处的特殊的空间位置,对膜蛋白结构和功能的研究越来越多。单颗粒研究方法和冷冻断层方法是利用电子显微镜结构解析研究膜蛋白结构的两种主要方法。近些年以来,由于数据处理能力以及制样技术的迅速进步,膜蛋白的电镜结构研究已经取得了巨大的进展。本文主要对膜蛋白结构研究方法中的冷冻断层成像技术和单颗粒研究方法作了一个简单的介绍。     

可复用短信平台在数字化校园中的应用

就现有数字化校园平台中无缝植入Web短信平台以实现信息快速传递的方法进行了相关研究。以Visual Studio 2008为开发工具,使用短信猫（GSM MODEM）相关设备,建立了可根据需求即时发送短信息的可复用短信平台。应用实践表明所设计的平台系统稳定高效,基于BS和CS2种开发模式相结合的解决方案复用性强,可推广应用到各类信息管理平台应用中,能够在节约软、硬件资源和人力、物力投入的同时,大大提高系统的工作效能。     

纳米金棒诱导A549细胞产生自噬的机制研究

纳米金棒(AuNRs)具有众多独特的属性,已广泛运用于生物医学领域,但其是否具有潜在的生物危害尚有争议.作者运用了激光扫描共聚焦显微镜技术、western blotting技术和其他分子生物学方法从细胞氧化应激的角度探讨了AuNRs诱导A549细胞产生自噬的分子机制.研究结果表明,4μg·mL-1的AuNRs处理6 h能够诱导A549细胞自噬标志蛋白LC3-Ⅱ表达增加,LC3蛋白从细胞核转移至细胞质并形成自噬小泡.进一步研究发现,AuNRs能够降低A549细胞线粒体膜电位、ATP含量、UCP2蛋白表达水平以及细胞抗氧化能力并导致活性氧蓄积,后者可能最终引起细胞产生自噬.而10 mmol·L-1抗氧化剂NAC能够逆转上述线粒体及细胞功能的改变,并抑制自噬的发生.这一研究为深入认识其生物危害及可能机制提供了有力的实验证据.     

心力衰竭时大鼠心肌细胞肌浆网钙回摄的变化

目的：探讨心力衰竭时心肌细胞肌浆网钙回摄异常的机制。方法：结扎大鼠冠状动脉左前降支制备慢性心衰模型。4周后采用酶解法分离假手术组和心衰组大鼠心室肌细胞,利用激光扫描共聚焦显微镜检测心肌细胞肌浆网钙含量。采用western?blot技术检测心肌细胞肌浆网钙调蛋白SERCA2a、PLN、PP1的表达水平。结果：心衰组的大鼠心肌细胞荧光强度小于假手术组,并且心衰组大鼠心肌细胞咖啡因诱导的钙瞬变也低于假手术组;心衰组大鼠心SERCA2a表达水平降低,PP1的水平升高,PLN总体水平不变,但磷酸化的PLN水平降低。结论：钙泵表达量下降和钙泵活性降低是心力衰竭时心肌细胞肌浆网钙回摄减少的主要原因。     

基于．NET的医学实验室监控平台设计

实验人员可通过医学实验室监控平台对实验室运行状态进行有效管理,降低苛刻实验环境带来的管理复杂度,突破了传统监控方法在场地和时间上的局限。系统以．NET3．5作为开发框架,使用微软Silverlight技术和WCF技术,以面向对象的方法,结合可利用短信平台及OA系统,建立起一体化医学实验室监控平台。     

利用膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时系统观察心肌细胞浆内钙离子的释放

目的:采用膜片钳和激光扫描共聚焦显微镜同步实时系统观察心肌细胞钙离子的释放.方法:在体外培养的单个心室肌细胞上进行全细胞模式膜片钳技术和共聚焦显微镜钙成像技术相结合,同步实时记录钙火花和钙离子浓度变化.结果:在全细胞模式膜片钳记录心肌细胞膜钙电流的同时,激光扫描共聚焦显微镜可准确记录到胞浆内出现的钙火花.此技术有可能对于明确钙火花的特征.准确理解兴奋一收缩偶联的微观机制有重要意义.     

可溯源电镜图像管理与检索信息系统的研究与应用

针对电镜分析测试工作中存在的实验信息、样品资料和电镜图像间相互割裂,用户不能便捷地获取实验结果图像和难以进行溯源监管等问题,研发了可溯源电镜图像管理与检索信息系统,实现了实验信息、样品资料和电镜图像的一体化管理和电镜图像即时传递,采用以“图搜图”的反向图片搜索算法,实现电镜图像的可溯源管理.     

Presenilin1基因对心肌细胞肌浆网钙容量的影响

目的:探讨Presenilin1基因对心肌细胞肌浆网钙容量的影响.方法:本实验以AAV-9为载体构建心肌特异性PS1-shRNA重组腺相关病毒,通过尾静脉注射PS1-shRNA重组腺相关病毒干扰大鼠心肌组织中Presenilin1基因的表达,并利用激光扫描共聚焦显微镜检测并记录心肌细胞肌浆网钙容量及舒张期自发钙释放事件的变化;同时,采用western blot技术分析各组大鼠心肌组织中雷诺丁受体及钙泵表达水平的改变.结果:与对照组相比,PS1-shRNA重组腺相关病毒干预组大鼠心肌细胞肌浆网钙容量显著降低,自发钙释放事件明显增加;雷诺丁受体表达水平略降低,钙泵表达水平无显著性变化.结论:Presenilin1基因表达水平降低会引起心肌细胞钙泄漏,从而造成心肌细胞肌浆网钙容量降低.