光动力疗法对人工龋口腔生物膜菌斑的影响

为探讨光动力疗法(PDT)对人工龋菌斑生物膜的的作用,选用变形链球菌在体外构建符合人体生理环境的人工龋模型,选择血卟啉单甲醚(HMME)为光敏剂,激光照射选用半导体激光器,波长为635 nm,输出功率为10 mW,能量密度为12.47 J/cm2.用50个釉质块形成人工龋模型,随机分成5组,每组10块,分别为:1)HMME组;2)激光照射组;3)PDT防龋组;4)0.05%(质量分数)洗必泰处理组为阳性对照;5)0.9%(质晕分数)生理盐水处理组为阴性对照.依照平板细菌计数法观察不同处理方法对人工龋菌斑生物膜变形链球菌活力的影响.结果表明,与阴性对照组相比,HMME组人工龋口腔生物膜中变形链球菌数量(CFU/mL)无显著性差异(P＞0.05),杀菌率仅为0.05%;激光照射和0.05%洗必泰均能使人工龋口腔生物膜中变形链球菌数量显著减少(P＜0.05),杀菌率分别为59.94%和58.52%;而PDT防龋处理可使人工龋口腔生物膜中变形链球菌数量更为显著减少(P＜0.05),杀菌率高达99.36%.HMME-PDT可有效杀灭人工龋口腔生物膜中的变形链球菌,为预防龋病提供了一种有效的新途径.     

细菌外排泵抑制剂对光动力疗法防龋效果的影响

目的:探讨细菌外排泵抑制剂(microbial efflux pump Inhibitor,EPI)———维拉帕米对以甲苯胺蓝O(toluidine blue O,TBO)为光敏剂的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)抑制牙菌斑生物膜内主要致龋菌作用的影响。方法:以变形链球菌、血链球菌、嗜酸性乳杆菌和粘性放线菌为实验菌株,建立牙菌斑生物膜模型。以维拉帕米作为细菌外排泵抑制剂,根据在PDT过程中加入维拉帕米和光敏剂的先后顺序,实验分为5组。A组:生理盐水处理组。B组:单纯PDT处理组。C组:同时加入光敏剂和维拉帕米PDT处理组。D组:先加入维拉帕米后加入光敏剂PDT处理组。E组:先加入光敏剂后加入维拉帕米PDT处理组。平板菌落计数观察牙菌斑生物膜活性,并运用激光共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscopy,CLSM)对处理后的牙菌斑生物膜进行断层扫描、分析。结果:与生理盐水处理组相比,单纯PDT处理组牙菌斑内致龋菌存活的数量(CFU/mL)明显减少(P<0.05),其抑菌率为81.02%;与单纯PDT处理组相比,加入维拉帕米的PDT处理组内牙菌斑内致龋菌存活数量有下降趋势。其中先加入维拉帕米后加入光敏剂PDT处理组牙菌斑内致龋菌存活数量显著性下降(P<0.05),抑菌率高达93.60%;激光共聚焦显微镜观察发现菌斑生物膜发生明显的变化。结论:实验表明光动力疗法有明显的防龋效果,且细菌外排泵抑制剂对PDT防龋效果有促进作用。     

光动力疗法抑制人免疫缺陷病毒复制的实验研究

通过对人免疫缺陷病毒复制过程的抑制作用研究,探索光动力疗法(PDT)在艾滋病防治中的潜在价值.使用不同稀释浓度的光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)和亚甲蓝(MB)分别与人免疫缺陷病毒HIV-1ⅢB或宿主细胞MT4,C8166或H9/HIV-1ⅢB孵育2 h.以波长630 nm能量密度0.3 J/cm2的半导体激光进行照射.继续孵育若干小时后,用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率或合胞体计数,同时收集培养上清液用ELISA法检测HIV-1 p24抗原.结果表明,光动力疗法能显著抑制人免疫缺陷病毒诱导的细胞一细胞融合(HMME-PDT抑制率64.68%,MB-PDT抑制率61.56%)和病毒一细胞融合(HMME-PDT抑制率85%,MB-PDT抑制率73.64%),并对游离病毒有很强的杀伤作用,最高可达到100%.光动力疗法不能抑制慢性感染期和急性感染2 h后病毒的复制过程.可见光动力疗法对游离病毒和病毒感染诱导的膜融合有显著抑制作用,有可能为艾滋病的防治提供一种新的方法.