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猪肺炎支原体环介导等温扩增检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立检测猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mh)的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal am-plification,LAMP)方法。方法根据GenBank中登录的猪肺炎支原体的核苷酸序列,设计4条特异性引物,用外引物进行PCR反应,对内外引物浓度、dNTP+和MgSO4浓度及Bst DNA聚合酶用量等进行优化,建立猪肺炎支原体LAMP检测方法,并对该方法进行特异性和敏感性验证。结果内外引物浓度分别为0.5和0.20 pmol/μl,dNTP+浓度为0.5 mmol/L,MgSO4浓度为3.75 mmol/L,Bst DNA聚合酶用量为8.0和9.6 U时,LAMP反应效果较好;应用该方法检测多杀性巴氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、肺炎双球菌、支气管败血波氏杆菌、副猪嗜血杆菌和链球菌均呈阴性;当猪肺炎支原体的拷贝数低于3时,检测不到该病原体。结论已建立了猪肺炎支原体LAMP检测方法,该方法特异性较好,敏感性较高。 相似文献
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以2,6-二氯吡啶为原料,制得2,6-二溴吡啶(收率79%)或2,6-二碘吡啶(收率56%),再分别与三氟乙酸钾反应,均可得标题化合物,收率28%~53%。该合成路线的优点是原料易得,反应条件温和,收率较高。 相似文献
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新型中小型拦河坝主要分为活动式坝和固定式坝。活动式坝一般下游设有消能设施,上游设有铺盖等防渗诩施;固定式坝因其结构简单、施工方便、造价低廉而得到广泛运用。 相似文献
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通过橡胶坝基础防渗工程,介绍了高压喷射灌浆新技术的技术原理及应用范围,论述了高压喷射灌浆所具备的独特技术优势和优良的处理效果。 相似文献