水产品中人鱼共患细菌性病原分子生物学检测方法研究进展

水产行业是国民经济重要产业之一, 水产养殖过程中病原微生物造成鱼类病害频发, 人鱼共患病原菌会对人类健康构成威胁, 水产品安全问题日益突出。人鱼共患病原菌检测方法对于病害的发现、预防及水产行业的健康可持续发展具有重要意义。人鱼共患病原菌包括人鱼共患细菌性病原和人鱼共患寄生虫病原等。本文对水产品中常见的人鱼共患细菌性病原的种类及其危害性、细菌性病原分子生物学检测方法的原理和应用及成簇的规律间隔的短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats, CRISPR)基因编辑技术在病原菌检测方面的最新研究进展进行了综述, 为研发易携带且简便快速的新型核酸检测方法及产品及水产品中人鱼共患病原菌的检测和防治提供参考和借鉴。     

嗜镉茵对重金属Cd2+的吸附研究

为了解决环境中镉污染问题,研究了实验室培养的嗜镉茵吸附镉的条件和机理,讨论了时间、镉离子的质量浓度和菌液的质量浓度对吸附效果的影响.试验结果表明:在一定试验条件下.吸附时间1.5 h,吸附趋于平衡,镉离子吸附率可达80%;嗜镉茵对镉的最低吸附量为10 mg/g,最高吸附量可达50 mg/g.红外表征表明:嗜镉茵表面多糖...     

TaqMan探针法荧光定量PCR检测鲜切甜瓜中单核细胞增多性李斯特菌的研究

根据多条单核细胞增多性李斯特菌的hly基因序列,设计了1对简并引物和1条TaqMan探针,建立荧光定量PCR快速检测单核细胞增多性李斯特菌的方法,对该方法的特异性、灵敏度进行了验证,并采用该法对染菌的鲜切甜瓜进行了检测。结果表明,该方法具有较好的特异性,对质粒标准品的灵敏度为1.12×102copies/μL,对染菌的鲜切甜瓜中单核细胞增多性李斯特菌的最低检出限为6.28×102cfu/mL。该方法可为快速检测鲜切果蔬病原微生物污染度及其控制奠定技术基础。     

基于荧光及可视化逆转录环介导等温扩增检测食源性甲型肝炎病毒的方法开发

目的 基于荧光及可视化RT-LAMP开发食源性甲型肝炎病毒(hepatitis a virus, HAV)的检测方法。方法 从NCBI中选取世界范围内具有代表性的HAV基因信息, 设计LAMP引物, 开发了一种荧光曲线RT-LAMP和可视化RT-LAMP检测方法。以HAV质粒为模板, 评估了方法的扩增效率、灵敏度和稳健性, 并与实时荧光RT-PCR进行检出限及实际样品验证比较。结果 荧光及可视化LAMP方法检测灵敏度为10.76 copies/μL, 与实时荧光RT-PCR一致; 在95%置信水平下经概率回归分析检出限(limit of detection, LOD), 荧光曲线RT-LAMP的LOD95%为17.46 copies/μL (7.00~511.29 copies/μL, 95%), 实时荧光RT-PCR的LOD95%为79.30 copies/μL (24.68~3208.71 copies/μL, 95%); 稳健性分析表明方法稳定; 与实时荧光RT-PCR比较, 检测30份实际样品验证比对符合率为100%。结论 该检测方法经济便捷, 可通过肉眼直接观察结果, 适合于食品安全现场监测, 具有很好的应用前景。     

单核细胞增生性李斯特氏菌荧光定量PCR快速检测方法的建立及初步应用

以单核细胞增生性李斯特氏菌的hly基因为靶基因,用Primer 5.0设计了特异性兼并引物,建立荧光定量PCR检测方法。并用阳性质粒标准品、不同菌株对该方法的特异性、灵敏度进行了验证,且在人工污染鲜切甜瓜上对该方法进行了初步应用。结果表明,建立的检测方法特异性强、灵敏度高,对阳性质粒标准品的灵敏度为7.69×10copies/μL,对人工污染的鲜切甜瓜中单核细胞增生性李斯特氏菌的最低检出限为3.11×10cfu/mL。     

酿酒酵母拮抗作用的蛋白组分析

为研究混菌发酵过程中酿酒酵母胞外蛋白对克鲁维酵母的拮抗作用并初步分离毒蛋白,采用超滤法提取酿酒酵母纯培养及透析培养的胞外蛋白,分别加入克鲁维酵母纯培养液中,通过平板菌落计数法,动态观测酿酒酵母胞外蛋白对克鲁维酵母生长的影响;双向电泳结合PDQuest软件分离解析酿酒酵母两种培养条件下的胞外蛋白图谱。实验结果表明,纯培养下的酿酒酵母胞外蛋白对克鲁维酵母无拮抗作用,而透析培养得到的酿酒酵母胞外蛋白可以导致克鲁维酵母提前死亡;纯培养图谱共79个蛋白点;透析培养图谱共109个蛋白点,比纯培养的新增30个蛋白点。由此推断:酿酒酵母可以分泌导致克鲁维酵母提前死亡的分子量大于10ku的蛋白类毒素,并且这种毒素的分泌不是自发的,而是在克鲁维酵母分子量小于10ku分泌物的诱导作用下才会产生。这30个新增蛋白点包括对克鲁维酵母的拮抗蛋白。     

外源肌醇、柚皮苷及姜黄素对酿酒酵母抗衰老性能影响

外源肌醇、柚皮苷及姜黄素衍生物对酵母抗衰老性能影响。在分别添加0.5g/L 3种外源抗氧化物质的条件下培养酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae 2144,测定不同培养时期酵母形态,絮凝速率,胞内超氧阴离子(O2-.)含量及抗氧化酶活性。结果表明,肌醇、柚皮苷及姜黄素衍生物能不同程度地改善因酵母衰老而表现出的细胞变瘪和表面褶皱,并有效降低酵母絮凝速率,提高酵母胞内抗氧化酶活性,以减少胞内O2-.含量。肌醇、柚皮苷及姜黄素衍生物均能降低活性氧氧化损伤,增强酵母抗衰老能力。经单羰基氨基酸钠衍生化修饰的姜黄素增强酵母抗衰老能力较强,而肌醇相对较弱。     

大麦发芽过程中蛋白质组的变化研究

通过双向电泳技术监测大麦发芽过程中水溶蛋白质组的变化,明确大麦发芽过程中蛋白质组的变化规律,为麦芽制造提供一定理论依据.以澳麦“schooner”为研究对象,提取其水溶蛋白进行双向电泳分析,结合分析软件监测大麦发芽过程中蛋白质组的变化.结果显示,本实验检测出大麦种子中大约有804种蛋白质,发芽过程中有424种蛋白质未发生变化,379种蛋白质降解消失或浓度降低,另有77种新的蛋白质产生.结果表明,进一步证实浸麦阶段主要是蛋白质的降解过程;发芽前期蛋白质的降解和合成转化较为缓和,发芽中期(48～72h)蛋白质的降解最为旺盛;发芽后期蛋白质的变化基本趋于平衡.     

固相微萃取/气相色谱-质谱联用分析麦芽挥发性风味物质组成

利用固相微萃取与气相色谱-质谱联用分析了酿造大麦Sabastian中的挥发性风味物质组成,共分析鉴定出31种挥发性物质,其中对酿造麦芽风味贡献较大的化合物有:醛类化合物13种占总峰面积的74.65%,醇类化合物7种占总峰面积的4.63%,酮类2种占总峰面积的0.18%,酸类一种占总峰面积的0.62%,其它类化合物8种占总峰面积的11.84%;含量较高的成分为异戊醛、2-甲基丁醛和正己醛,其峰面积相对百分比分别达到26.31%、24.69%和12.87%,搞清了酿造大麦嗅感物质的组成。     

基于应用型人才培养的发酵工程教学改革的探索与思考

发酵工程是生物工程和生物制药等专业的主干课程。为适应社会发展的需求,培养高素质的应用型人才,从多样化发展教学方法和手段以及整合教学内容两方面对发酵工程教学改革进行探索与思考,以提高教学效果。