蛇毒类凝血酶基因真核表达载体的构建

目的 构建大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶(Gloshedobin,GSB)基因真核表达载体,试图借助IL-2的分泌通路,使GSB分泌至胞外而达到溶栓和防栓的目的。方法 应用PCR重组技术,将GSB的5’端和3’端分别与IL-2基因的信号肽和poly A尾相连接,将此重组基因克隆入逆转录病毒载体 pLNCX,以脂质体介导转染人外用血淋巴细胞,并以绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因检测转染效率、确定DNA和脂质体的比例。转染24h后从mR-NA、DNA和蛋白质水平检测GSB的表达情况。结果 mRNA和DNA水平均有外源基因GSB的表达;SDS-PAGE显示在相对分子质量 30 000左右出现一条带,且转染上清具有精氨酸酯酶活性。结论 构建的真核表达载体可表达具有活性的GSB,为GSB基因治疗血栓的体内研究打下基础。     

锌层面质量对钢丝绳疲劳性能的影响

通过对疲劳数据异常的钢丝绳进行化学成分、表面质量、镀层面质量、钢丝绳破断拉力、抗拉强度、打结拉力、扭转、含油率等项目进行分析试验,确定锌层面质量对钢丝绳的疲劳性能存在影响.对半成品钢丝的锌层面质量进行有效控制,同时加强前道原料钢丝的生产过程控制,可以有效解决1.5倍锌层导致疲劳数据出现异常的问题.