应用16S rDNA克隆文库技术分析陈化烟叶细菌多样性

为较全面地分析陈化烟叶的细菌多样性,利用16S rDNA基因克隆文库技术分析了产自于福建的3个等级处于不同陈化阶段的12个烟叶样品中的细菌组成.采集C/S挑、B22、X21三个等级的陈化烤烟烟叶,陈化时间分别为3、6、12、24个月.实验结果表明,烤烟烟叶在陈化过程中共存在25种细菌,γ-变形菌纲(Gamma-proteobacteria)细菌种类最丰富,含有19种细菌,α-变形菌纲(Alpha-proteobacteria)含有3种细菌,芽孢杆菌纲(Bacilli)含有2种细菌,β-变形菌纲(Beta-proteobacteria)含有1种细菌.在12个烟叶样品中,肠杆菌属(Enterobacter)在8个样品中的比例最高,假单胞菌属(Pseudomonas)在2个样品中比例最高,泛菌属(Pantoea)和克洛诺菌属(Cronobacter spp.)分别在样品B6和C3中比例最高.在陈化过程中,烤烟叶面细菌组成没有明显的变化规律.     

陈化烟叶中纤维素降解菌群的分离及其特性研究

从陈化烟叶中分离到具有降解纤维素活性的菌群,分析了温度、pH和纤维素材料对菌群酶活性的影响,采用16SrDNA片段的PCR-DGGE（变形梯度凝胶电泳）技术分析菌群组成。结果显示,菌群主要由5种细菌组成。20℃时菌群纤维素酶活性很低,随着温度升高酶活性升高,在60℃时纤维素酶活性达到最高值,继续升温则酶活性下降。pH从3升高到8时,菌群纤维素酶活性不断增大,pH为8时酶活性达到最大,pH继续升高到9时则酶活性下降。菌群对烟叶、滤纸和烟梗中的纤维素都有降解作用,在以烟叶作为纤维素材料培养菌群时,纤维素酶活性明显高于滤纸和烟梗。陈化过程中微生物可能对烟叶纤维素有降解作用,从而影响烟叶的陈化效果;可以利用分离到的菌群在烟叶或烟梗发酵中降解纤维素,改善烟叶或烟梗的品质。     

福建产区不同香型烤烟质量特征分析

为明确福建产区不同香型烤烟的质量特征,从烟叶外观质量、物理特性、化学成分等3个方面对福建产区不同香型风格的烟叶进行了比较,同时对上述指标与香型进行了相关和回归分析。结果表明,在福建产区,随着烟叶香型从偏清到中间再到偏浓过渡,烟叶外观物理特性中烟叶厚度(身份)、长宽比及单位面积叶重有增加的趋势,烟叶宽度有变小的趋势;烟叶化学成分中,烟碱、总氮、总氯含量有增加的趋势,总糖、糖碱比、氮碱比、钾氯比、有机钾等指标有降低的趋势。     

不同肥料运筹模式下采收时间对烤烟经济性状及品质的影响

为探讨不同肥料运筹模式下适宜的烟叶采收时间,以NC55为材料,设置了3种肥料运筹模式,分别为：氮磷钾肥全部作基肥施用（T1）;磷肥全部基施,氮肥和钾肥基追比例为7：3（T2）;磷肥全部基施,氮肥和钾肥基追比例为5：5（T3）;3个采收时间,分别为打顶后30 d（S1）、打顶后35 d（S2）、打顶后40 d（S3）,分析了不同处理对叶片SPAD值及烤后烟经济性状、化学成分和质量的影响。结果表明,相同肥料运筹模式下,随采收时间推迟,叶片SPAD值减小;烤后上等烟比例、上中等烟比例、均价和单叶重先增加后降低,均以打顶后35 d采收最高;但T3模式下的上中等烟比例、均价和单叶重打顶后35 d与40 d采收差异较小。随采收时间推迟,烟叶烟碱含量显著降低,还原糖含量显著提高,糖碱比和两糖比显著增加;烟叶总糖含量先增加后降低,打顶后35 d采收最高。不同肥料运筹模式下,氮钾追肥比例越高,SPAD值随采收时间下降幅度越小;氮钾肥基追比例为10：0、7：3和5：5的处理,分别在打顶后30、35和40 d采收感官质量总得分最高。可见,磷肥全部基施条件下增加氮钾肥追施比例推迟了烤烟的成熟落黄和获得最佳感官质量的采收时间。     

应用低场核磁共振技术分析烟丝样品含水率的方法

本工作推导并建立了基于核磁共振硬脉冲自由感应衰减信号（FID）的含水率测定方法。以烟丝样品为模型,在预先建立的工作函数基础上,对多个样品水分进行快速测定。之后,核磁共振法与烘箱法分别测得的含水率结果进行了对比,比较结果显示核磁共振法不仅具有理想的重复性、精密度和稳定性,还能原位分析样品的含水量空间分布,这是烘箱法等其它水分测定方法目前难以做到的。本工作建立的含水率测定方法有望在烟草加工行业以及其它工业领域发挥作用。      

烟草RAPD反应体系优化及品种多态性标记研究

利用鲜烟叶材料对RAPD反应体系进行了优化,建立了一个适合烟草的比较稳定的RAPD反应体系,并对影响RAPD反应的主要因素进行了探讨.利用该稳定体系,对具有两对相对性状差异的两个烤烟品种进行了多态性标记研究,从500个引物中筛选到4个有多态性的引物,这4个引物扩出的多态性片段可作为鉴定两个品种的分子标记.初步分析认为,两个品种的多态性标记可能与香气性状和抗病性状连锁.     

烟叶醇化过程中烟碱降解菌的分离鉴定与特性分析

从醇化烟叶中分离到具有降解烟碱活性的菌群(Q6),16S rDNA片段的PCR-DGGE(变性梯度凝胶电泳)分析显示,菌群由8种细菌组成.从菌群Q6中分离出1株烟碱降解菌D1,经菌落形态、生理生化和16S rDNA序列分析鉴定为根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens).在低温(20℃)、偏酸或偏碱(pH=5或者pH≥9)及高烟碱浓度(＞1g/L)条件下,菌群Q6均表现出比单菌D1更强的降解活性.烟叶发酵和加入静息细胞试验表明,菌群和单菌均可降解醇化烟叶中的烟碱.在菌群和单菌的烟碱代谢产物中都检测到烟碱烯、2,3’-联吡啶和可替宁.结果显示:醇化过程中烟叶表面微生物可能对烟碱有降解作用,从而影响烟叶的醇化效果,可以利用分离到的菌群或单菌在烟叶醇化过程中降解烟碱,以改善烟叶品质;同时也可以利用烟碱降解菌处理烟草废弃物中的烟碱.     

牡丹江生态条件下不同基因型烤烟品种香气物质含量比较

以9个烤烟品种为材料,在黑龙江省牡丹江烟区研究了不同基因型烤烟品种烤后烟叶香气物质成分含量。结果表明,上部叶致香物质总量由高到低依次为CF202、NC89、911-21、7581、Y8303、温德尔、JY-02、9625、LJ237;中部叶依次为Y8303、温德尔、CF202、NC89、911-21、9625、JY-02、LJ237、7581。综合分析认为,CF202、NC89和Y8303三个品种总体烟叶质量表现较好,适宜在牡丹江烟区推广种植。