基于乙酰胆碱酯酶和氧化应激研究海胆酮对阿尔茨海默症的作用机制

海胆酮是一种酮式类胡萝卜素，主要从海胆及藻类等海洋生物中提取。本文研究海胆酮对乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase，AChE）的抑制作用，应用酶动力学、荧光光谱、圆二色光谱和分子对接技术研究海胆酮对AChE的抑制机理，并用淀粉样β蛋白片段25～35（amyloid beta-peptide 25-35，Aβ25-35）诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12细胞）建立阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease，AD）模型，研究海胆酮对AD细胞模型氧化应激损伤的作用。结果表明，海胆酮有很强的AChE抑制活性，其半抑制质量浓度为（16.29±0.97）μg/mL，抑制常数Ki为3.82 μg/mL，表现为竞争性抑制；海胆酮可诱导AChE二级结构改变，更容易与AChE活性中心氨基酸Ser200、His440、Trp84和Tyr121结合，阻碍底物碘代硫代乙酰胆碱（acetylthiocholine iodide，ATCI）与酶结合，从而引起酶活力降低。海胆酮能有效抑制Aβ25-35诱导PC12细胞的AChE活力，降低丙二醛含量，增加超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力，减轻Aβ25-35诱导的PC12细胞氧化应激损伤。本研究基于AChE和氧化应激阐明了海胆酮对AD的潜在作用机制，为海胆酮在功能食品、生物医药等领域的应用提供了数据支持和理论根据。     

真空冷冻干燥对速溶乌龙茶粉香味特征的影响

为研究真空冷冻干燥对速溶茶粉香味特征及挥发性成分的影响,采用顶空固相微萃取技术(HS-SPME)结合气相色谱-质谱联用仪(GC-MS),分析乌龙茶浓缩液及其真空冷冻干燥粉的挥发性成分。GC-MS分析结果显示,共鉴定出74种成分,其中浓缩液的主要成分为吲哚、2-乙基呋喃、p-伞花烃,而冻干粉的主要成分为吲哚、正己醛、芳樟醇。聚类分析发现,浓缩液经真空冷冻干燥后2-乙基呋喃等9种成分消失,而新增正己醛等23种挥发性成分。此外,2-庚酮和E-β-罗勒烯经真空冷冻干燥后含量降低,而E-橙花叔醇等7种成分的含量则升高。香气值(OAV)分析表明,浓缩液主要的香气成分是E-2-壬烯醛和(E,E)-2,4-癸二烯醛,冻干粉主要香气成分是1-辛烯-3-醇、芳樟醇和正己醛。该研究结果说明真空冷冻干燥对速溶乌龙茶粉浓缩液的挥发性成分和香味特征有一定影响,为速溶乌龙茶粉的生产提供理论参考。     

乳酸菌发酵对茶花粉营养成分及生物活性的影响

为研究茶花粉乳酸菌发酵前后基本营养成分以及生物活性的影响。以茶花粉为原料在嗜热链球菌和植物乳杆菌的共同作用下进行发酵处理后分析测定发酵前后基本营养成分,α-葡萄糖苷酶抑制活性以及清除羟自由基能力的变化。结果表明,乳酸菌发酵茶花粉发酵终点为72 h,发酵茶花粉与未发酵茶花粉相比,还原糖、脂肪含量有所降低,灰分、蛋白质、多酚、黄酮含量分别有不同程度的提高,对α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度(IC₅₀)由49.09 mg/mL降低到38.79 mg/mL,并且清除羟自由基能力的半抑制浓度(EC₅₀)由4.49 mg/mL提高到5.78 mg/mL。该研究为茶花粉乳酸菌发酵产物的开发利用提供了实验参考。     

米曲霉多蛋白酶代谢动力学初步研究

目的:利用米曲霉能分泌多种蛋白酶的特性.研究该菌培养液水解鱼粉的动力学.方法:采用Folin法测定不同时间培养液的蛋白酶活力.甲醛滴定法测定不同时间培养液的氨基态氮,SDS-PAGE凝胶电泳测定水解产物的大小及培养液中产物的相对分子质量.结果:米曲霉在以鱼蛋白为唯一氮源的培养基中能够产生多种蛋白酶,且随时问和底物的不同.蛋白酶的活力与种类都不同.结论:米曲霉是一种产多种蛋白酶的菌种.     

碱性蛋白酶水解蓝圆鲹条件的优化

以水解度为优化的指标,利用单因素试验考察酶解温度、pH值、反应时间等因素对鱼蛋白水解的影响,利用中心组合试验方法优化酶的添加量和蛋白质浓度.结果表明:碱性蛋白酶水解蓝圆鲹的最佳条件为每克蛋白加酶量4 320U、蛋白质浓度1.57%、水解温度55℃、反应体系pH值7.5、酶解时间6 h,在此条件下,水解体系的氨基酸态氮含量达1.30 g/L,水解度为51.88%,总氮回收率为97.07%,挥发性盐基氮含量为0.030 g/L,氨基酸态氮、水解度和总氮回收率的RSD值均小于2%.     

利用糖类成分评价我国油菜原蜜的品质

目的以油菜原蜜为研究对象,通过测定其中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的含量评价我国大宗原蜜的品质。方法采用高效液相色谱示差折光法测定我国10个省份共36种油菜原蜜样品中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的含量。结果用液相色谱方法测定蜂蜜中的果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖,最低检测限分别为0.079 g/100 g、0.018 g/100 g、0.037 g/100 g及0.094 g/100 g,定量检测限分别为0.263 g/100 g、0.061 g/100 g、0.124 g/100 g及0.314 g/100 g。36种油菜原蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的含量范围分别为26.00~38.16g/100 g、23.65~39.68 g/100 g、0.14~0.62 g/100 g及1.09~3.10 g/100 g。结论油菜原蜜样品中的蔗糖含量都符合我国蜂蜜国家标准,但其中31.8%的样品中葡萄糖和果糖总量低于国家标准。目前,我国大宗蜂蜜不存在人为掺入蔗糖的问题。     

胡萝卜中水溶性类胡萝卜素提取条件的优化研究

以胡萝卜为原料,研究其水溶性类胡萝卜素提取的关键技术和工艺控制参数。通过响应面分析实验优化得到提取的最佳组合条件为:浸提液pH6.76,浸提液体积58mL,浸提时间30min,浸提温度35℃,优化后水溶性类胡萝卜素得率为1.826μg/mL。     

乳酸菌发酵茶花粉对α-葡萄糖苷酶抑制率的影响

目的：提高茶花粉α-葡萄糖苷酶抑制率。方法：以α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,采用响应面试验优化乳酸菌接种量、发酵温度及发酵时间对茶花粉发酵效果的影响。结果：复合乳酸菌菌粉接种量对α-葡萄糖苷酶抑制率影响最大,其次是发酵温度。发酵茶花粉的最优工艺条件为乳酸菌接种量0.9%、发酵温度37℃,发酵时间3d,该条件下茶花粉发酵液对α-葡萄糖苷酶的抑制率为38.97%,是未发酵的3.11倍。结论：试验优化的乳酸菌发酵茶花粉工艺操作简单,能显著提高α-葡萄糖苷酶抑制率。     

三种柚子精油的香味特征及挥发性成分

为阐明我国主要柚类水果精油的品质特征,运用感官评价和气质联用(GC-MS)研究琯溪蜜柚、沙田柚和梁平柚果皮精油的香味特征和挥发性成分。感官评价结果显示,三种柚子精油香型相似,其中琯溪蜜柚精油风味浓郁且伴有强烈的花香味,沙田柚精油有一定的薄荷味,梁平柚精油则有强烈柚香味和甜味。GC-MS结果显示,虽然三种柚子精油的主要成分均为d-柠檬烯(476,150-741,595μg/mL)、β-月桂烯(13,859-207,255μg/mL),但琯溪蜜柚精油含有更高浓度的β-月桂烯,沉香醇以及醛类成分。香气值(OAVs)分析表明琯溪蜜柚精油(5,015,965)远高于沙田柚香气值(1,307,088)和梁平柚精油香气值(1,159,532),同时琯溪蜜柚精油中强烈的花香味主要来源于β-月桂烯(2,093,489)和沉香醇(387,578)。研究结果说明三种柚子精油主要香气轮廓及成分相似,但不同种类精油间存在特征性差异。该研究结果为我国柚子精油的综合开发利用提供参考。     

速溶乌龙茶粉挥发性成分的分析

速溶茶粉是重要的茶叶深加工产品。国内外对速溶茶粉加工工艺进行了深入研究,但对其香味品质的研究较少。本文以速溶乌龙茶粉为研究对象,采用固相微萃取(SPME)结合气-质联用技术(GC-MS)研究其挥发性成分。结果表明:SPME的优化条件为用50/30μm DVB/CAR/PDMS萃取头在70℃萃取40 min;经GC-MS分析,从速溶乌龙茶粉中鉴定出39种挥发性成分,其中芳樟醇、反式-β-罗勒烯、反式芳樟醇氧化物和顺式芳樟醇氧化物浓度最高,其浓度分别是16422.8、3407.8、2549.7和2163.1μg/kg;香气强度值最高的成分是芳樟醇、顺式芳樟醇氧化物、反式芳樟醇氧化物、反式-β-罗勒烯和苯乙醛,它们的香气强度值分别是2,737,138、360,522、424,950、56,796和31,708。以上结果表明速溶乌龙茶粉主要挥发性成分和香气贡献成分是芳樟醇、反式-β-罗勒烯、反式芳樟醇氧化物和顺式芳樟醇氧化物。该研究为评价速溶茶粉香味品质特征提供了挥发性成分的数据参考。