重金属铅酶联免疫检测方法的研究

制备铅离子多克隆抗体,并建立间接竞争ELISA检测方法。利用双功能螯合剂ITCBE将Pb2+与载体蛋白KLH和BSA偶联在一起,制备免疫抗原与检测抗原;通过免疫新西兰大耳白免成功制备铅多克隆抗体,建立间接竞争ELISA检测方法,并与ICP-MS检测结果进行比较。标准曲线IC50为3.48ng/mL,IC15为0.32ng/mL,与ICP-MS法检测结果的总符合率超过97%。     

间接竞争酶联免疫法检测水样中的重金属镉

利用重金属镉多克隆抗体,建立一种低仪器成本的检测水样中重金属镉的间接竞争酶联免疫法,其检测限(IC15)为0.76μg/L,灵敏度(IC50)为11.33μg/L。交叉反应结果表明,该抗体除与汞螯合物的交叉反应率为10.9%,与其他金属(锰,铬,镁,铁,铅,镍,银和铜)螯合物的交叉反应率均低于1.32%。自来水和河水样品中镉的添加回收率为93.95%～107.40%,变异系数为3.97%～14.69%。     

重金属汞酶联免疫检测方法的建立

建立了重金属汞离子的间接竞争酶联免疫(IC-ELISA)分析方法。由于汞离子不具有免疫原性,因此以异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)为双功能螯合剂连接汞离子和钥孔血蓝蛋白(KLH)作为免疫原,免疫新西兰大白兔获得特异性抗体。用获得的抗体建立汞的ELISA分析方法。检测限为0.45μg/L,灵敏度为4.10μg/L。特异性实验表明,抗体对镍和铜的交叉反应率分别为10.8%和13.5%,与其他金属均无明显交叉反应。本实验以白芷、胡萝卜和皮皮虾为基质,添加回收实验表明,白芷、胡萝卜、皮皮虾回收率均在70%～120%。使用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)验证方法的准确性,仪器检测结果和建立的ELISA分析方法具有很好的相关性(相关系数为0.988),表明建立的方法具有很好的准确性。