黄曲霉毒素B_1脱毒菌株的分离鉴定及在花生粕中的应用

用以香豆素为唯一碳源的培养基进行初筛,结合固态发酵降解黄曲霉毒素(AFB1)实验和抑制黄曲霉生长实验进行复筛,获得一株能够高效降解AFB1的菌株。经形态观察与16S r DNA序列比对,确定该菌株为解淀粉芽孢杆菌。该菌不仅对低AFB1含量(12.32μg/kg)的花生粕样品有88.23%的AFB1降解率,而且对高AFB1含量(145.17μg/kg)的花生粕样品也有81.39%的AFB1降解率,降解后其AFB1含量低于30μg/kg,符合国家对饲料中AFB1含量(≤50μg/kg)的限量要求。     

用游离酵母和微囊化酵母分批发酵生产烈性啤酒的比较研究

在使用固定化技术连续生产高品质啤酒方面存在许多问题,因此,本文集中研究了固定化基质对发酵工艺的影响,目的为探讨在分批发酵过程中,固定化技术对烈性啤酒感官特性(如颜色、风味和挥发性化合物)的影响和潜在应用价值。烈性啤酒的分批发酵是一个标准的艾尔啤酒生产工艺。对于固定化酵母,先利用蒂勒数模式设计微胶囊,然后在海藻酸钠内对酵母细胞进行微胶囊化。检测整个发酵过程中葡萄糖浓度、细胞增殖、细胞活力、比重、pH、糖度和乙醇的变化。同时利用感官和仪器分别评估用固定化酵母和游离酵母发酵生产的啤酒特性。结果显示所有参数并没有明显的差异(p>0.05)。但是,挥发性化合物的特性不同,可能是因为酵母代谢的不同和次生代谢产物的产生所导致。然而,经感官试验法检测,固定化对啤酒的风味没有产生重大的影响。     

应用超高效液相色谱结合荧光检测法测定酿造原料和啤酒中的赭曲霉毒素A

在2008～2009年,使用超高效液相色谱（UPLC）结合荧光检测法（FLD）,对237种样品的啤酒大麦、麦芽、啤酒花、麦汁和啤酒进行了赭曲霉毒素A（OTA）污染的分析。相比于其他常用的方法,UPLC法是一种具有低检测限和定量限（LOD和LOQ）的快速检测技术。啤酒的LOD和LOQ值分别为0．0003nWmL和0．001ng／mL,大麦或麦芽为0．05μg／kg和0．2μg／kg,啤酒花为0．16μg／kg和0．5μg／kg。赭曲霉毒素A在其中一种大麦样品（0．3μg／kg）,一种麦芽样品（0．7μg／kg）和一种啤酒花样品（0．6μg／kg）中被检测到,对啤酒酿造过程中的OTA含量也做了检测。此外,对从当地商店购买的国内外啤酒样品也进行了分析,OTA在其中的39％啤酒样品中被检测到,水平介于0．001～0．0544ng／mL之间,只有一个啤酒样品中OTA含量达到了0．2438ng／mL。     

生物技术法处理对花生粕饲用品质影响的研究

花生粕存在黄曲霉毒素B_1(AFB_1)易超标、非淀粉多糖含量高和蛋白质品质不佳等缺陷,利用微生物(枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、乳酸片球菌)发酵结合复合酶制剂处理花生粕,可以综合改善其饲用品质。研究表明:处理后花生粕中AFB_1的去除率为94.6%,非淀粉多糖含量由30%降低至10.5%,蛋白质含量由47.8%提高至61.5%,大分子蛋白明显降解为小分子蛋白,小肽含量由5.36%提高至25.21%,必需氨基酸总量提高了19.67%,乳酸含量由0.7%提高至2.8%。经过生物技术法处理,花生粕的饲用品质得到了明显改善。     

改进BP神经网络的功放有记忆行为模型

提出了一种基于改进误差反向传播神经网络(IBPNN)的具有记忆效应功率放大器(PA)的行为模型。该模型在传统误差反向传播神经网络(BPNN)的基础上利用Levenberg-Marquardt(LM)学习算法和加入动量因子的训练算法更新BPNN的权值和阈值,与传统的BPNN相比只需要更少的训练次数就达到了更高的精度。20MHz带宽三载波WCDMA信号的时域和频域仿真都表明其具有良好的性能,并且由得到的功率放大器(PA)动态特性AM/AM和AM/PM可知,该模型可以很好地描述PA的记忆效应。最后,用16QAM调制的OFDM 20MHz带宽信号的实验证明了该模型具有普遍的适用性。     

高效降解棉酚菌种的筛选及棉粕发酵脱毒工艺研究

通过醋酸棉酚YPG培养基多级逐步驯化筛选,结合棉粕固态生物发酵的方法,筛选出1株高效降解棉酚的热带假丝酵母JD-9。通过单因素试验初步确定了棉粕发酵脱毒的工艺条件,进一步利用分式析因试验设计法,对影响棉粕脱毒率的因素进行了筛选,方差分析表明,影响棉粕发酵脱毒的主要因素为热带假丝酵母JD-9接种量和卡氏酵母JD-13接种量。通过响应面分析法和典型性分析得出棉粕发酵脱毒的最优条件为:热带假丝酵母JD-9接种量4.42%,卡氏酵母JD-13接种量0.56%,发酵时间48 h,发酵温度30℃,料水比1∶0.8,棉粕中的棉酚从987.5 mg/kg降解至85.9 mg/kg,脱毒率达到91.3%。     

球磨预处理和固态发酵对玉米秸秆饲用品质的影响

玉米秸秆经球磨预处理后物理空间结构和化学物质结构改变,更容易被相应的酶降解,进而被微生物利用,其饲用品质提高,从而可能替代饲料中的部分粮食。研究表明,球磨预处理后的玉米秸秆粒径大小均匀,约90%的颗粒集中在10~100μm,酸性洗涤纤维下降3.5%,可溶性总糖提高2.0倍,对其单糖组成分析发现:可溶性总糖的增加主要来自半纤维素和纤维素的分子断裂。用木聚糖酶和纤维素酶酶解球磨预处理后的玉米秸秆,可溶性总糖和还原糖含量比酶解前分别提高了3.3倍和9.7倍,球磨预处理后酶解效率大大提高。球磨预处理的玉米秸秆经固态酶解、发酵后,总酸质量分数达26.3 mg/g,纤维素和半纤维素质量分数分别下降9.1%和4.9%,乳酸菌含量达到1.5×109CFU/g,饲用品质显著提高。     

花生粕饲用品质改善的研究

用植物乳杆菌结合蛋白酶和植酸酶对花生粕进行固态发酵,通过比较发酵前后花生粕中黄曲霉毒素B1、植酸、无机磷、粗蛋白、多肽、总酸(以乳酸计)含量以及氨基酸组成、蛋白质体外消化率等指标的变化来综合考察生物技术处理对花生粕品质的改善.研究发现,发酵后黄曲霉毒素B1的去除率为44.61％,植酸含量由1.36％降低到0.23％,无机磷含量由0.11％提高到0.40％,粗蛋白含量由51.83％提高到53.39％.大分子蛋白明显降解为多肽,多肽含量由3.34％提高到11.36％,必需氨基酸总量提高了16.43％,蛋白质的体外消化率由57.45％提高到68.36％,总酸含量达到4.99％.经过生物技术处理,花生粕的品质得到了明显提高.     

嘌呤核苷磷酸化酶的表达及其在啤酒中的应用

为了开发一种能水解核苷的嘌呤核苷磷酸化酶(Purine Nucleoside Phosphorylase,PNPase),将其添加到糖化醪液中,增加麦汁中的游离嘌呤碱基质量浓度,在后续发酵阶段游离嘌呤碱基被酵母利用,提高了嘌呤物质的利用率,最终啤酒中的嘌呤质量浓度减少。将PNPase的编码基因deo D导入表达载体pET-28a(+)中,采用化学转化法将载体转入到大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,研究重组PNPase的活性,并将其应用到糖化工艺中。获得的重组PNPase活性为184.46 U/mL,添加到糖化醪液中后,麦汁中游离嘌呤碱基质量浓度升高,酵母可吸收的游离嘌呤质量浓度增多,啤酒发酵液嘌呤质量浓度显著降低,为后续研究使啤酒嘌呤含量的降低奠定了一定的基础。     

胃乙醇脱氢酶δδ-ADH的原核表达及酶学性质

为获得人胃乙醇脱氢酶δδ-ADH,根据GeneBank中δδ-ADH的基因序列合成目的基因ADH7,构建重组表达载体pET-32a(+)-ADH7,并转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。获得的阳性转化子经异丙基硫化-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显示,目的蛋白质以包涵体的形式得到大量表达。用1 mol/L尿素溶解包涵体获得有活性的粗酶液,经HisTrapTM excel亲和层析柱纯化获得目的蛋白质,检测δδ-ADH酶活并对其基本酶学性质进行研究。结果显示,δδ-ADH的活性为2.085 U/mg,Km为28.43 mmol/L,Vmax为316.46μmol/(L·min)。δδ-ADH的最适反应温度为40℃,在30～50℃范围内温浴60 min,相对酶活在47%以上;最适pH为9.0,将δδ-ADH在不同pH(pH 3.0～11.0)的广泛缓冲液中于25℃保温30 min,在pH 6.0～11.0范围内酶活较稳定。pH 5.0时,相对酶活剩余60%;在0、500、1 000、1 500 mmol/L乙醇中37℃温浴30 min,相对酶活分别为65.6%、51.1%、45.4%和44.4%。