酶联免疫吸附法快速检测黄曲霉毒素

结合间接竞争反应机制,运用酶联免疫吸附技术(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),从抗原(antigen,Ag)包被时间、体系反应温度、酶标二抗作用时间、显色时间等主要因素开展快速检测黄曲霉毒素改进方法的研究。研究结果表明适宜的优化条件为:采用Ag包被20 h、反应温度24℃左右、酶标二抗作用时间30 min、底物显色时间15min。通过对饲料等11种样本的检测得出:半抑制浓度IC50<0.1μg/L,添加回收率在67%~116%,灵敏度达到0.03μg/L,线性系数>0.99,板内变异小于5%。检测试验结果良好,表明该改进方法具有可行性。     

无害李斯特菌生长特性及乳酸片球菌发酵上清液抑菌效果研究

无害李斯特菌是李斯特菌属中的一种,可在多种食品中发现。分离自发酵蔬菜中的乳酸片球菌对李斯特菌表现出抑菌活性,在生物防腐领域具有应用前景。通过比浊法测定无害李斯特菌在不同培养基、接种量、培养温度、初始pH值等条件下的生长情况,同时分析了乳酸片球菌发酵上清液对无害李斯特菌的抑菌效果。结果表明,无害李斯特菌可在MRS和TSB培养基中生长,且随接种量的增加生长速度加快;添加发酵上清液浓度越高,对无害李斯特菌的抑制效果越好;在(28~40)℃的范围内,温度越高,无害李斯特菌生长速度越快,而发酵上清液的抑菌效果则越不明显;无害李斯特菌的最适生长pH值为7,在pH6时发酵上清液抑菌效果最佳。     

鹰嘴豆蛋白的制备及其抗氧化活性

对鹰嘴豆蛋白进行了分类研究,并探讨了总分离蛋白、球蛋白的抗氧化活性.结果表明,鹰嘴豆蛋白质含量为21.07%,其中球蛋白和清蛋白为主要组分,分别占42.16%和39.76%.总分离蛋白和球蛋白随质量浓度增加还原能力均有所增加.二者对羟基自由基(·OH)均有不同程度的抑制作用.鹰嘴豆蛋白具有明显的抗氧化活性,而球蛋白活性更强,值得进一步开发利用.     

鄂尔多斯地区酸粥细菌多样性分析及乳酸菌的分离鉴定

以采集自内蒙古鄂尔多斯地区的8个酸粥样品为研究对象,利用Illumina MiSeq高通量测序技术,对样品进行细菌菌群结构及多样性研究,分离鉴定其优势菌株。结果表明:8个样品中的细菌主要来自厚壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria),乳酸杆菌属(Lactobacillus)和醋酸杆菌属(Acetobacter)为优势菌属。乳酸杆菌属在各样品中占比最高,为42.63%～97.49%。SZ1、SZ2样品与其他样品的菌群结构差异较大,可能与不同采集时间有关。对上述样品中的乳酸菌进行分离纯化,通过生理生化试验结合分子生物学方法,鉴定获得1株干酪乳杆菌(Lactobacillus casei),1株发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum),2株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)和4株副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。上述研究结果为酸粥工业化生产提供菌种资源和理论依据。     

片球菌素的研究进展

片球菌素是片球菌分泌到胞外的一种小分子多肽,可以抑制单核细胞增多症李氏杆菌等多种病原菌和食品腐败菌,具有食品防腐保鲜的巨大潜力.本文对片球菌素的研究历史、基本理化性质、发酵条件、提取纯化方法、抑菌机理以及应用研究几方面进行了综述.     

酸菜汁来源的几株乳杆菌功能特性研究

以自然发酵酸菜汁中分离获得的几株乳杆菌为研究对象,首先通过模拟乳杆菌在不同酸度、不同氯化钠浓度以及胆盐浓度、人工胃液和人工肠液等环境中的生长状态,评价其耐受性。结果表明,菌株可耐受pH4.0和pH5.0的环境,2%~6%的氯化钠浓度以及0.1%和0.2%的胆盐条件。通过稀释涂布法发现LS-9菌株在人工肠液中的存活率最高,8 h达到98.34%。采用液相色谱法测定菌株对MRS培养基中的胆固醇降解率在16.65%~29.33%之间。自聚集和共聚集实验中,LS-5菌株20 h的聚集能力显著高于其余菌株(p0.01)。LS-6菌株表现出最明显的疏水性,疏水率为45.16%。采用纸片扩散法对菌株进行药敏性分析,均对青霉素、红霉素、氨苄西林、氯霉素和四环素这5种抗生素具有极敏的性质。以上实验结果为进一步认识并应用这些乳杆菌提供参考。     

酸菜汁中乳酸菌的筛选和产酸性能的优化

本文从甘肃地区自制酸菜汁中分离出39株革兰氏阳性菌,过氧化氢酶实验均为阴性。通过滴定法筛选获得6株产酸率高于1%的菌株,经形态学鉴定均为杆菌,其中LS-9菌株的产酸率最高。通过单因素实验确定了LS-9菌株培养基的最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为胰蛋白胨。利用正交实验优化培养条件为葡萄糖添加量20 g/L,胰蛋白胨添加量12 g/L,发酵温度为36 ℃。其中温度对菌株发酵产酸影响最大,其次是胰蛋白胨添加量,葡萄糖添加量对发酵产酸影响最小。验证实验表明,菌株在最佳条件下的产酸率为1.74%±0.05%。经16S rRNA测序和系统进化树分析,LS-9菌株与干酪乳杆菌的同源性较高。全脂奶发酵实验表明LS-9凝乳时间约为6 h,酸度102.4 °T,活菌数可达1.25×108 CFU/mL。     

荧光定量PCR技术在食品快速检测中的应用

荧光定量聚合酶链式反应（real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR）是一种将聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）扩增与实时检测相结合的技术,也是近年来食品快速检测技术的研究热点之一。与传统PCR技术相比,它具有耗时短、操作简单、灵敏度高、特异性强等优势。本文简要概述了荧光定量PCR技术的基本原理、发展历程、分类及特点,综述了荧光定量PCR技术在食源性致病菌、掺杂掺假、转基因食品、过敏原、食源性寄生虫、可食用昆虫等食品检测中的应用,并对荧光定量PCR技术及其在食品快速检测中应用的前景进行了展望。     

李斯特菌噬菌体裂解酶基因在大肠杆菌中的表达

单核细胞增生李斯特菌是一种重要的食源性致病菌,存在于多种环境中,造成牛奶、肉类、水产品等的食品安全问题。李斯特菌噬菌体编码的裂解酶能够特异性地裂解宿主细胞,释放胞内的子代噬菌体。本研究旨在构建李斯特菌噬菌体A500裂解酶的细胞壁结合结构域CBD500的异源表达系统,获得重组蛋白。首先通过体外扩增得到CBD500基因,克隆到表达载体p ET32a(+)中,转化表达菌株大肠杆菌BL21(DE3)。阳性重组菌在30℃,0.1 mmol/L IPTG中诱导4 h后,以可溶形式表达分子质量约35 ku的重组蛋白。利用镍离子亲和层析纯化目的蛋白,纯化产物质量浓度为0.62 mg/mL。间接ELISA试验证实,纯化的重组蛋白具有生物学活性,可用于进一步研究裂解酶的理化性质和作用机制。     

乳杆菌素抗性菌的产生及特点分析

通过对无害李斯特菌在产细菌素的植物乳杆菌发酵中和上清液中进行诱导,获得抗性菌株并与原始菌株对比分析其特点。结果表明:抗性菌株除了对植物乳杆菌发酵中和上清液产生抗性以外,同时对另外2种产细菌素的乳酸菌发酵上清液的敏感性下降,但对氨苄青霉素的敏感性无显著变化,对卡那霉素的敏感性高于原始菌株。抗性菌的细胞表面疏水性显著高于原始菌株(p 0.01)。原始菌株在甘露糖存在条件下OD600值积累量最高,而抗性菌在纤维二糖中增长最明显。在Nisin存在条件下,原始菌株被完全抑制,而抗性菌株在12 h培养后表现出一定生长趋势。菌株抗性的获得可能是多种机制相互作用的结果,对抗性机制的深入研究将有利于细菌素作为生物防腐剂在工业领域的应用。