应用球面对称设计优化两相体系生物转化合成5-氟尿苷

应用球面对称设计研究了水/有机溶剂两相体系对嘧啶核苷磷酸化酶基因工程菌生物转化合成5-氟尿苷的影响。结果表明,以30％(体积分数)DMSO为有机溶剂,当其体积比(以反应物总体积计)为30％、反应温度为55℃、反应时间为1 h、装液量为4 mL/50 mL时,5-氟尿嘧啶的转化率达75.7％,5-氟尿苷产量较单水相时提高...     

大肠杆菌工程菌高密度发酵的初步研究

在5L发酵罐上以恒pH-补料发酵模式为基础,通过改变培养温度、时间以及补料浓度达到提高大肠杆菌产量的目的。实验结果表明,当恒pH值为6.5,补料类型甘油速度为35mL/h。连续补料6h,发酵12h结束,可使湿菌体量达到51.1g/L,初步达到了高密度发酵的要求。     

海洋微生物来源的α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选及性质研究

建立了α-葡萄糖苷酶抑制剂的体外筛选模型。10株海洋微生物经摇床培养得到发酵液,经大孔树脂吸附、甲醇洗脱得到粗提物;以阿卡波糖为阳性对照,用比色法（PNPG法）对粗提物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性测定,并对产生活性代谢产物的菌株做进一步研究。结果发现：有6株菌株的代谢产物均具有不同程度的α-葡萄糖苷酶抑制作用,其中菌株N-1的代谢产物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用最强,每毫升N-1样品液中含有的活性代谢产物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用相当于5mg的阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用;该活性产物具有较强的酸碱耐受性及温度耐受性,在pH值1～14、50～100℃时稳定性较好;初步分析活性代谢产物的成分并非蛋白质、氨基酸、糖类及皂苷类物质。     

南极海泥来源抗肿瘤真菌的筛选与鉴定

从南极海泥样品中分离得到61株海洋真菌,先采用MTT法对其发酵液的乙酸乙酯萃取物进行体外抗肿瘤活性筛选,然后对活性较高的菌株进行分子鉴定,并进一步测定乙酸乙酯萃取物对HepG-2细胞的IC50值。结果表明:对HepG-2细胞抑制率大于60%的有27株菌,占总供试菌株的44.26%;对7901细胞具有抑制作用的有22株菌,占总供试菌株的36.07%;对116细胞抑制率大于50%的有22株菌,占总供试菌株的36.07%;菌株S45的抗肿瘤活性最强,对HepG-2细胞的IC50值为1.25μg·mL-1,经鉴定为青霉属真菌。     

铜绿假单胞菌产抗菌代谢产物发酵条件的优化

以分离的铜绿假单胞菌作为实验菌株,以对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑制效果及菌体干重为评价指标,采用单因素实验、正交实验优化铜绿假单胞菌产抗菌物质的培养基组分和发酵条件。结果表明:优化的培养基组分为黄豆粉2.5 g·L~(-1)、大豆蛋白胨10 g·L~(-1)、磷酸氢二钠10 g·L~(-1),优化的发酵条件为接种量2%、初始pH值7、发酵时间96 h。     

诺卡沙星及其结构类似物的研究进展

诺卡沙星及其结构类似物是一类结构特征明显的天然次级代谢产物,对革兰氏阳性菌具有很强的杀灭作用,其独具一格的抗菌机制受到研究者的广泛关注。诺卡沙星大多本身成药性不好,但是其非天然的结构类似物在成药性方面得到改善。诺卡沙星的生产方式已不局限于生物发酵,化学合成技术也有望用于改造和生产的中间环节。综述了诺卡沙星及其结构类似物的生物合成机制、生产策略、抗菌机制,指出了诺卡沙星及其结构类似物在应用方面存在的问题,为其在医药及养殖行业的广泛应用提供了有效策略。     

产D-氨基酰化酶菌株的筛选及活性菌株A55的初步研究

从氨基酸类化工厂附近土样中筛选产D-氨基酰化酶的菌株,并对活性较高的菌株进行了菌种鉴定及培养条件的初步优化。利用N-乙酰基甲硫氨酸作为分离培养基中的唯一碳氮源,从8份土样中筛选了约500株菌,其中菌株A55酶活力及稳定性均较高。通过形态学观察、生理生化特征测定及16SrDNA系统发育分析对菌株A55进行菌种鉴定,并采用单因素法考察了影响D-氨基酰化酶合成的因素。结果表明,菌株A55属于耐寒短杆菌,其最佳产酶发酵条件为:培养温度30℃,培养基初始pH值7,摇床转速200r·min-1,摇瓶装样量15%,培养时间48h。另外,碳氮源的添加虽然有利于菌体的生长,但是不利于D-氨基酰化酶的合成。     

无花果多糖体外抗氧化及抗肿瘤活性研究

从无花果中提取、分离和纯化得到了均一性无花果多糖FCPS-1、FCPS-2、FCPS-3,通过测定DPPH自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率、羟基自由基清除率、还原能力研究了其体外抗氧化活性,采用MTT法研究了其体外抗肿瘤活性。结果表明:以上无花果多糖均表现出与浓度正相关的体外抗氧化活性,其中FCPS-3具有相对更强的体外抗氧化活性。FCPS-3对HepG-2细胞和7901细胞具有更强的体外抗肿瘤活性,在浓度为2.0mg·mL-1时,FCPS-3对HepG-2细胞和7901细胞的抑制率分别为57.30%和54.49%。表明无花果多糖可作为潜在的天然抗肿瘤药物。     

北极海泥来源抗菌活性真菌的筛选及菌株H5的初步研究

从北极海泥中筛选抗茵活性海洋真菌,鉴定了活性菌株并对活性最高的菌株H5的代谢产物进行了初步研究。通过形态学观察、基因间隔区（ITS）序列分析对活性最高的茵株H5进行系统发育分析和菌种鉴定;通过纸片法对茵株H5的发酵液进行体外抗茵活性研究;将调至不同pH值的H5发酵液用不同极性的有机溶剂萃取,研究该活性物质的酸碱性和极性;将调至不同pH值的发酵液按不同时间温度梯度进行加热处理,研究该活性物质的稳定性;同时用大孔树脂对活性物质进行提取分离。结果表明,从北极海泥中共分离得到17株真菌,其中真菌H5、H6的代谢产物具有较好的抗茵活性;茵种鉴定表明菌株H5归属于烟曲霉属（Aspergillusfumigatus）,该菌株发酵液对苹兰氏阳性菌、革兰氏阴性茵、真茵及耐药茵均有不同程度的抑制活性,活性产物为极性较大、热稳定性较好、耐酸不耐碱的物质;薄层层析显示活性成分在254rlm紫外光下无吸收。