真菌检测技术及其在诊断真菌性角膜炎中的应用

真菌的检测技术从传统的形态学、免疫学发展到分子生物学水平,并逐渐应用于角膜真菌感染的研究.本文就全身及角膜真菌感染的检测技术研究进展作一综述,以期为寻求更为快速、特异、敏感的真菌性角膜炎的诊断手段提供帮助.     

CTGF反义寡核苷酸对体外培养人晶状体上皮细胞转分化的影响

目的:研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)反义寡核苷酸对体外培养人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLECs)合成CTGF与а-SMA表达的影响。方法:测算CTGF反义寡核苷酸对体外培养HLECs的转染率;应用CTGF反义寡核苷酸直接转染第三代HLECs进行细胞生长曲线的测定;采用RT-PCR检测细胞CTGF和α-平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)mRNA水平。结果:直接导入法反义寡核苷酸进入较慢,但导入72h后未出现细胞毒性。CTGF反义寡核苷酸直接导入HLECs培养细胞72h后可见对细胞增殖的抑制作用。直接导入法处理48h后,TGF-β1能显著增加CTGF以及α-SMA mRNA的表达,但却可被CTGF反义寡核苷酸所抑制。而错义寡核苷酸却没有这种作用。结论:CTGF反义寡核苷酸直接转染HLECs能抑制TGF-β1诱导的CTGF与α-SMA表达上调,提示CTGF反义寡核苷酸可能为防治后发性白内障提供新途径。     

眼科学教学中Powerpoint课件的应用探讨

近年来,随着电脑和网络技术的迅猛发展,多媒体课件在眼科学教学中的应用得到了极大的普及.该文对眼科学教学中Powerpoint课件的应用进行探讨.     

视网膜血管内皮细胞的培养与纯化

目的:探讨人视网膜血管内皮细胞的体外分离和选择性培养方法。方法:将人视网膜通过剪碎、匀浆、过筛、胶原酶消化处理后,结合密度梯度离心和物理刮除等分离方法获得较纯的视网膜血管内皮细胞,接种于纤维连接蛋白包被的培养瓶中,并采用含内皮细胞生长因子和肝素的培养基促进内皮细胞贴壁生长,观察细胞生长状况,并应用免疫组化方法进行鉴定。结果:培养的细胞成典型的铺路石样生长,Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色为阳性,细胞纯度达98%以上。结论:本实验方法简单易行,培养出的人视网膜血管内皮细胞纯度高、生长状态良好,并可稳定传代,为视网膜血管疾病的基础研究提供有效的模型建立方法。     

IFN-γ在小鼠真菌性角膜炎中的表达

目的:通过检测IFN-γ及其转录因子T-bet在小鼠真菌性角膜炎中的表达水平,探讨机体免疫在该病发展中的作用。方法:应用角膜表层镜法建立小鼠真菌性角膜炎模型,在感染后第1、3、5、7天,观察角膜炎特点与病理变化;半定量RT-PCR和ELISA检测角膜中IFN-γ的表达,半定量RT-PCR检测T-bet的表达。结果:角膜接种菌液后,角膜浸润混浊进行性加重;HE染色可见早期在角膜及前房中有大量的炎性细胞浸润;RT-PCR与ELISA检测结果表明,IFN-γ在角膜接种菌液后均出现表达,在第3天达最高值,而后逐渐降低;T-bet在第3天达最高值;T-bet mRNA的表达与IFN-γ呈正相关(P0.05)。结论:在真菌性角膜炎中,Th1型免疫应答在调节机体的抗真菌免疫中发挥重要作用。