用加速热稳定试验筛选甲型肝炎减毒活疫苗热稳定保护剂

为筛选具有良好热稳定保护效果的甲肝减毒活疫苗（H2株）保护剂,利用正交设计和加速热稳定试验,将不同配比的保护剂和液体疫苗混合后,封入安瓿,分别置37度和45度,不同时间取样,检测其感染性滴度,结果表明无保护剂的对照疫苗在45度条件下感染性滴度仅能维持2D不变,第3天开始下降,至4天已下降1．27logCCID50.mL^-1,而有保护剂的5批疫苗在45度条件下感染性滴度能维持5天无显著变化,在37度条件下无保护剂的对照疫苗感染性滴度仅能维持7天无显著变化,10天显著变化,下降1．0－1．1logCCID50.mL^-1,而有保护剂的5批疫苗在37度条件下感染性滴度能维持10天无显著变化,研究表明0．1mol.L^-1MgSO4,ω=5％,乳糖,0．01mol.L^-1精氨酸,0．01mol.L^-1甘氨酸组成的保护剂具有最佳保护效果,其热稳定保护效果明显优于现在使用的对照疫苗。     

2株甲型肝炎病毒(L8 株、H2株)蛋白酶2A在大肠杆菌中的表达

首次把生长特性有显著差异的 2株甲型肝病毒 (L8株、H2 株 )的蛋白酶 2A基因分别用基因工程技术克隆到大肠杆菌表达载体 pGEX -KG上 ,重组质粒转化至大肠杆菌 (E .coliBL - 2 1和DH5α)中 ,表达的结果显示 :2株甲型肝病毒的蛋白酶 2A均得以表达 ;表达量占菌体总蛋白 2 0 %以上 .为进一步纯化该蛋白酶、研究其生物学功能和与真核细胞代谢的关系奠定了基础 .     

人胚肺二倍体细胞株KMB17在培养过程中的自然凋亡

用延长培养周期方法诱导人二倍体胚肺细胞株ＫＭＢ１７自然凋亡,经光学显微镜、荧光显微镜、细胞流式仪、电子显微镜,证明ＫＭＢ１７细胞出现典型的凋亡特征：细胞圆缩、细胞核浓缩破裂、核染色质凝缩后分布于核膜边缘呈新月状和典型的凋亡峰．研究表明人胚肺二倍体细胞（ＫＭＢ１７）在培养过程中易出现自然凋亡．提示可望通过提高细胞对环境压力的耐受能力,预防或延缓细胞培养过程中的自然凋亡,提高操作单元细胞产品的生产效率．     

对基因治疗的哲学思考

对基因治疗的哲学思考ＰｈｉｌｏｓｏｐｈｉｃＴｈｏｕｇｈｔｓｏｎｔｈｅＧｅｎｅＴｈｅｒａｐｙ￥／／胡云章（中国医学科学院医学生物学研究所，助理研究员昆明６５１１０７）在生命进化的漫长历程中，生物体通过基因突变产生新表型以适应环境，基因突变是生物进化的基...     

经络的本质—蛋白质压电传感效应假说

经络的本质──蛋白质压电传感效应假说ＨｙｐｏｔｈｅｓｉｓｏｎＪｉｎｇ—ＬｕｏＥｓｓｅｎｃｅ胡云章（中国医学科学院医学生物学研究所北京１００７３０）经络本质及其物质基础至今仍是生物医学研究的难题。中国医学记载的经络现象及经络功能是客观存在的。国内外对经...     

冻干甲型肝炎灭活疫苗免疫原性与安全性研究

研究冻干甲型肝炎灭活疫苗免疫原性、安全性及热稳性 .分别将冻干及液体甲型肝炎灭活疫苗注射小白鼠和恒河猴 ,确定小白鼠 7d存活情况及恒河猴的谷丙转胺酶 (ALT)水平、肝脏病理、抗 -HAVIgG水平 .用同等剂量 (12 80EL·UmL-1)的冻干灭活疫苗与液体灭活疫苗初次及加强免疫后 1周 ,2组猴在食欲、活动性、大便频率及持续时间方面均无异常 ;5 2周观察期内未出现肝脏病理改变及ALT水平异常升高 .冻干灭活疫苗与液体灭活疫苗诱发的抗 -HAV水平无显著差异 ,2组IgG水平均在免疫后第 12周达到初次免疫后的最高水平 ,冻干疫苗组为 12 0 47mIUmL-1,液体疫苗组为 11875mIUmL-1.两组无显著差异 (P >0 .0 5 ) .第 2 4周分别加强免疫同等剂量疫苗后 ,第 2 8周抗 -HAVIgG水平显著提高 ,达到最高水平 ,冻干疫苗组为 412 15mIUmL-1,液体疫苗组为 40 874mIUmL-1.冻干剂型的甲型肝炎灭活疫苗具有液体剂型同样良好的安全性和免疫原性 .     

2株甲型肝炎病毒蛋白酶2A核苷酸序列的测定与比较

从甲型肝炎病毒２个不同株感染的ＫＭＢ１７细胞中提取总ＲＮＡ,经ＲＴ－ＰＣＲ特异性扩增出此２毒株病毒蛋白２Ａ基因,将２个２Ａ基因克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体上,经ＤＮＡ序列测定,得到２个２Ａ基因的核心苷酸序列,序列比较发现它们及与ＨＡＶ野毒株相对应序列有突变存在,Ｈ２株与ＨＭ１７５相比有一个点突变,同源性为９９．７２％;与ＨＭ１７５比较,Ｈ２株和Ｌ８株第３１９７位核苷酸均由Ａ突变为Ｇ,相应的氨基酸由丝氨酸     

升高细胞外钙离子能抑制和促进细胞凋亡的发生

钙离子是细胞分裂,生长,死亡过程中重要的信号传导分子。为研究胞外钙离子与细胞凋亡的关系,将Ｃａ＾２＋（５￣７ｍｍｏｌ）加入无血清培养液观察钙离子对无血清诱导人胚肺二倍体细胞株ＫＭＢ１７凋亡的影响并将Ｃａ＾２＋（５￣７ｍｍｏｌ）加入含体积分数为２％血清的脊髓灰质炎病毒（ｐｏｌｉｏｖｉｒｉｕｓ）生长培养液中,研究胞外钙离子对ｐｏｌｉｏｖｉｒｕｓ诱导凋亡的影响,经光学显微镜,荧光显微镜,细胞流式仪,电子     

2株甲型肝炎病毒（L8株,H2株）蛋白酶2A在大肠杆菌中？…

首次把生长特性有显著差异的２株甲型炎病毒的蛋白酶２Ａ基因分别用基因工程技术克隆到大肠杆菌表达载体ｐＧＥＸ－ＫＧ上，重组质粒转化到至大肠杆菌中，表达的结果显示：２株甲型肝炎病毒的蛋白酶２Ａ均得以表达；表达量占菌体总蛋白２０％以上。为进一步纯化该蛋白酶、研究其生物学功能和与真核细胞代谢的关系奠定了基础。     

甘油-3-磷酸对甲肝疫苗诱导的体液免疫影响*

目的 研究甘油-3-磷酸对甲肝疫苗诱导的小鼠体液免疫应答的影响。方法 选取49只雌性ICR小鼠,分7组,每组7只,这7组小鼠分别为阴性对照、单纯抗原组、铝佐剂组和4组甘油-3-磷酸组,分别在免疫之后的第4、8、12、16、20周用酶联免疫法(ELISA)测定小鼠血清中的特异性的anti-HAV IgG水平。结果 在小鼠免疫之后的第4、8、12、16、20周单纯抗原组、铝佐剂组和4组不同剂量甘油-3-磷酸组均能检测到特异性抗HAV抗体,并且趋势为先升高后降低,且在免疫后的第8周最高;第4周和第8周的甘油-3-磷酸实验组的结果均高于单纯抗原组,且差异均具有统计学意义(P<0.05),并且第4周甘油-3-磷酸组抗体水平均超过铝佐剂组,并具有统计学意义(P<0.05),其中甘油-3-磷酸2 mg为最佳剂量组,其抗体水平在免疫后的第4、8、12、16、20周均高于单纯抗原组,且在第8周抗体水平达到峰值,抗HAV IgG水平为lg(3.064±0.07851),铝佐剂的也是在第8周抗体水平达到峰值,抗HAV IgG水平为lg(3.150 ±0.1382)。结论 甘油-3-磷酸有免疫佐剂的作用,能够有效、迅速地增强HAV诱导的体液免疫应答,是一种潜在、安全有效的新型疫苗佐剂。