完全体外化牛细胞核移植的研究

本研究探讨了用体外成熟卵母细胞和体外受精胚胎进行核移植的可能性。本研究结果在我国首次获得牛核移植的成功。从屠宰场回收的卵巢中抽取卵球－卵母细胞复合体，采用以前报道的方法（石德顺等，广西农业大学学报’１９９４：１３：１－５）进行体外成熟（ＩＶＭ）和体外受精（ＩＶＦ），获得ＩＶＭ卵母细胞和ＩＶＦ胚胎，体外成熟２３－２４ｈ后，在含０．１％透明质酸酶的无钙镁ＰＢＳ（ＰＢＳ）内，用细管反复吹打去掉卵丘细胞。选择具有明显第一极体的卵母细胞通过显微操作移去第一极体及其附近约一半的细胞质进行去核，去核的卵细胞在成熟液内继续培养到ＩＶＭ３０ｈ．体外发育到８－３２细胞期的ＩＶＦ胚胎用作核供体．供体胚胎用含０．２５％Ｐｒｏｎａｓｅ（溶于ＰＢＳ￣－）溶解透明带，并用细管吹打将其分散成单个卵裂球，在ＩＶＭ３０ｈ将单个卵裂球显微注入去核卵母细胞的卵周隙内，并在ＩＶＭ３１ｈ用８０Ｖ／ｍｍ４０μｓ两次电脉冲（间隔１秒）来诱导卵裂球与去核卵母细胞的融合。融合卵在颗粒细胞单层培养滴内共培养，体外培养２４ｈ后观察卵裂结果，经体外培养５－８天后发育到桑椹和囊胚的核移植胚胎移植到同期发情的受体．２个月后直检妊娠情况．本实验中共操作１９４枚卵母细胞，     

牛细胞核移植试验初报

体外成熟培养（ＩＶＭ）２３－２４ｈ的牛卵母细胞，去核后用８０Ｖ／ｍｍ，４０μｓ电激活２次（Ｉ组）或不激活（Ⅱ组），然后注入８－３２细胞期体外受精（ＩＶＦ）牛胚胎的卵裂球，再用８０－１００Ｖ／ｍｍ，４０μｓ电激两次诱导卵母细胞与卵裂球融合，两组的融合率（６２．８％与６５．１％）和卵裂率（５５．４％与５１．９％）无显著差异（Ｐ〉０．０５）。全部４１２枚重组卵电激后的融合率是６３．８％（２６３／４１２）     

精品课程“动物繁殖学”的建设和实践

"动物繁殖学"2006年被评为广西大学校级精品课程,2007年被评为广西省自治区级精品课程,本文重点介绍该精品课程在学校的定位,教学条件、教学方法和教学手段和特色.     

家兔超数排卵的初步试验

本研究对家兔超排各种处理方法的超排效果进行了比较,并对处理过程中外周血浆 P 及17β～E_2的变化情况进行了放射免疫测定。当 FSH 用于兔的超排时,持续处理三天对于保证 FSH 的超排效果是必需的。FSH 的超排效果显著优于 PMSG(P<0.05),但在注射 PMSG 的同时注射10—12单位 FSH 则可使 PMSG 的超排效果有所提高。受试兔重复处理后,排卵数降低不明显(P>0.05),仅胚胎收集数明显下降(P<0.05),这说明重复处理对受试兔的超排反应的影响不明显,胚眙收集数下降可能是由于手术后的粘连所致。胚胎收集数与处理瞬前及输精瞬前的 P 浓度成负相关(r=-0.3616,-0.4334,P<0.05),与17β—E_2浓度成正相关(r=0.5036,0.5055,P<0.01);且受试兔经 PMSG 处理后的 P 升高幅度远较FSH 处理后为大(P<0.01)。由此说明:PMSG 超排效果较差的原因可能是其 LH的活性较高,引起卵泡的黄体化及带血卵泡的形成所致。     

冷冻保存2年的体外受精胚胎移植产犊报道

１４０枚利用完全体外化培养技术生产、经常规方法进行冷冻保存两年后的良种肉牛胚胎，通过非手术法移植到７０头本地母牛，每头受体牛移入２枚胚胎以繁殖纯种后代。结果受体母牛２个情期不返情率为５０％（３５／７０）；１２０ｄ后经直肠检查确诊怀孕率为２７．１％（１９／７０）；９头受体母牛足月产下犊牛１０头，产犊率为１２．９％（９／７０），双胎率为１１．１％（１／９）。受体母牛平均妊娠期为２８０．８天（２６６￣２     

利用体细胞核移植技术生产黄牛和水牛同种、异种转基因克隆囊胚

以含neo和GFP基因双标记的水牛、黄牛胎儿成纤维细胞进行牛转基因体细胞核移植,结果发现：阿菲迪霉素可有效将胎儿成纤维细胞同步于G0／G1期;以GFP阳性细胞进行核移植,其卵裂率、囊胚率与对照组间无显著差异（P〉0．05）,所构建的重组胚,2-细胞阶段观察不到GFP的表达,4-细胞以后GFP的表达逐渐增强,在囊胚的内细胞团和滋养层细胞均可检测到GFP的表达,将黄牛同种转基因克隆囊胚进行移植,获得1例妊娠;黄牛卵母细胞-水牛供核细胞构建异种重组胚囊胚率显著高于黄牛供核细胞-水牛卵母细胞构建的异种重组胚（P〈0．05）,并且异种核移植重组胚中可检测到GFP表达,GFP可作为异种核移植胚胎来源的一种新标记．     

牛体外受精技术研究的现状与展望

系统综述了牛体外受精技术研究的现状及存在的问题．并对今后的研究方向和前景提出了展望。牛卵母细胞可在不含血清的成熟培养液中获得受精及胚胎发育能力，促卵泡素、促黄体素及上皮细胞生长因子均对这一过程具促进作用。肝素是迄今最为有效的精子获能处理方法，但在受精过程中对精子获能起决定作用的是卵丘细胞和卵母细胞本身。提高受精质量可明显提高受精卵的胚胎发育能力。体外受精卵可通过改善培养条件或与体细胞进行复合培养发育到囊胚阶段．但后者更为稳定可靠。目前，牛卵母细胞的体外受精分裂率可达８０％，囊胚发育率达４０％左右．两枚鲜胚的移植妊娠率可达５０％～６０％．而两枚冻胚的移植妊娠率仅３０％～５０％。因此，尚需进一步提高体外受精胚胎的活力和改进胚胎的冷冻保存技术。     

肝素及血小板激活因子对牛卵母细胞体外受精的影响

在受精液中添加不同浓度的肝素（２，６，１８，５４，１６２，４８６ｍｇ／Ｌ）均能明显提高牛卵母细胞的受精分裂率（分别为８３．６，８４．９，８５．７，８９．２，８４．５和９０．２％，比对照组７３．６％，Ｐ〈０．０５）和卵裂指数（授精后４４－４５ｈ大于２－细胞的卵裂数占卵裂总数的百分率，分别为８５．７，８５．０，８９．９，９．８７，８７．４和８５．５％，对对照组５７．６％，Ｐ〈０．０１。然而，卵母细胞的     

基因工程药物的研究热点及发展方向

随着现代生物技术的突飞猛进,基因工程药物在现代生物制药产业中的地位越来越重要。基因工程药物已经成研究生命攸关的关键课题。本文对基因工程药物的研究热点和发展方向颇为关注,并展望了基因工程药物美好的发展前景.     

星虫动物门系统发生研究进展

根据已经发表的研究资料,总结星虫的一般生物学特点,回顾星虫动物门形成的过程及星虫动物门系统进化研究的历史和现状。星虫以其独有的特点被提升到门的位置,已经广泛为人们所接受,但是对于星虫的分类和系统进化上的亲缘关系一直没有形成一致的意见。在星虫的分类学上,大多数学者认同Cutler和Gibbs的分类系统,即将星虫分成2个纲、4个目、6个科和17个属,但是星虫在系统进化上的亲缘关系的研究结果不一致。原因可能在于分析方法上的不同,建议进行各种数据的联合分析,并以较为合理的方式解决分析中的和谐性问题,统一地确定出星虫的亲缘关系。