使用MUG培养基定量检测植物药中大肠杆菌时荧光猝灭现象的发生与克服方法

实验中观察到,用ＭＵＧ培养基对植物药中的大肠杆菌定量时多发生荧光猝灭现象,影响检测结果。本文对此现象产生的原因与克服方法进行了系统的考察,发现以一种简便的转接方法可排除植物药介质对菌检的干扰。该方法由两组检验系列构成,当怀疑正常稀释系列（第一系列）４０ｈ培养液的荧光结果可能因猝灭现象呈假阴性时,立即分别将该系列的１—３号管培养液以０．５ｍｌ的接种量转接入新鲜的ＭＵＧ培养基（第二系列）,重新培养２４ｈ,荧光猝灭现象即可克服。综合两系列的荧光、产气和吲哚三项生化特征得出检品中大肠杆菌含量。实际应用表明,此法能显著提高使用该培养基时菌检结果的可靠性。     

短刺小克银汉霉与卷枝毛霉对昂丹司琼的转化

采用微生物转化法考察11株放线菌及11株小型丝状真菌对昂丹司琼的转化能力,通过高效液相色谱-多级质谱(HPLC-MSn)检测转化产物。7株真菌可将昂丹司琼转化为7-羟基昂丹司琼和N-去甲基昂丹司琼,与文献中报道的人体内主要代谢产物相同,其中短刺小克银汉霉AS 3.153转化能力最强,在优化的转化系统中7-羟基昂丹司琼和N-去甲基昂丹司琼的产率分别达到57.80%和15.60%。此外,3株真菌和7株放线菌将昂丹司琼转化为1-羟基昂丹司琼,其中卷枝毛霉AS 3.3421转化能力最强,在优化的转化系统中,1-羟基异构体的总产率达43.10%。表明筛选出的2模型菌株对形成昂丹司琼的类哺乳动物代谢产物具有互补能力,在确定药物代谢产物种类及制备相应的对照品中具有应用价值,可作为药物代谢体外研究的有效辅助工具。     

阴道彩色多普勒对妇科盆腔肿瘤闭孔淋巴转移的诊断

目的:探究经阴道彩色多普勒超声对妇科盆腔肿瘤闭孔淋巴转移的诊断价值。方法:选择2013年1月至2014年12月到我院进行子宫切除联合盆腔淋巴清扫术的妇科盆腔肿瘤患者86例作为研究对象,按照手术的先后顺序将患者分为观察组和对照组,每组43例。观察组患者采用经阴道彩色多普勒超声对患者闭孔淋巴结是否转移进行检查,对照组采用B超对患者闭孔淋巴结是否转移进行检查,比较两组患者检查的准确性。结果:观察组患者检查结果中显示,转移的为14例,无转移的为29例,与病理检查结果比较无显著统计学差异(P0.05),对照组患者检查结果中显示,转移的为5例,无转移的为36例,与病理检查结果比较具有显著统计学差异(P0.05),观察组患者检查的正确率为95.3%,而对照组检查的正确率仅为81.4%,两组比较具有显著统计学差异(u=4.0737,P=0.0436),观察组患者检查后的满意率为90.7%,而对照组的满意率为79.1%,两组比较具有显著统计学差异(u=2.7051,P=0.0068)。结论:经阴道彩色多普勒超声对妇科盆腔肿瘤闭孔淋巴转移的诊断准确性高,具有较高的临床参考价值。     

α-1,6-甘露糖转移酶基因敲除的毕赤酵母菌株构建及其用于融合蛋白HSA/GM-CSF 表达的研究

酵母对蛋白的糖基化修饰过程不同于哺乳动物,其特点为产生高甘露糖型糖基且易发生过度糖基化。本研究通过两步基因重组敲除目标基因的方法成功敲除了毕赤酵母中的α-1,6-甘露糖转移酶(och1p)基因,获得了och1敲除的菌株。以此为基础,构建了高效表达人血清白蛋白与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子融合蛋白(HSA/GM-CSF)的工程酵母,与野生型毕赤酵母表达的过度糖基化HSA/GM-CSF不同,och1敲除菌表达的该融合蛋白糖基化程度明显降低,这为该融合蛋白的开发提供了重要基础。och1敲除菌株的构建不仅提供了一个对糖蛋白进行低糖基化修饰的毕赤酵母表达系统,而且为进一步的酵母糖基工程改造提供了基础。     

彩色多普勒超声对青少年椎动脉型颈椎病的诊断价值

目的:探讨彩色多普勒超声对青少年椎动脉型颈椎病的诊断价值。方法:选择我院2012年2月-2016年1月收治的80例青少年椎动脉型颈椎病患者作为研究组,选择同期100例门诊体检同龄健康者作为对照组,使用Acuson Sequoia 512以及HDI5000彩色多普勒超声仪进行检查,观察两组椎动脉和颈外动脉血流指标,记录椎间段血流参数:包括舒张末流速(EVD)、收缩期峰值流速(PSV)、血流量(Q)和阻力指数(RI)。结果:实验组椎动脉内径、EDV、PSV和血流量(Q)比对照组低(P0.05),实验组阻力指数(RI)比对照组高(P0.05)。结论:彩色多普勒超声对青少年椎动脉型颈椎病患者的血流相关指数检查对该病的诊断具有明显作用,适合在临床上推广应用。     

HER2胞外区基因的克隆及其在大肠杆菌中的可溶性表达

采用反转录PCR和PCR方法分别克隆P185^HER2/neu胞外区基因和噬菌体M13K07g3p—N1结构域基因,然后将二偶联入pET-22b( )载体中,在大肠杆菌中进行融合表达。可溶性目的蛋白表达量占细菌可溶性表达产物总量的30％72右．并通过镍亲和层析纯化出目的蛋白。以上结果为从噬菌体抗体库中筛选抗P185^HER2/neu的抗体奠定了基础。     

发酵法生产L—缬氨酸的研究

以棒状杆菌(Corynebacterium)T6—13野生菌为出发菌株,经紫外线和亚硝基胍多次诱变,获得一株新型的L—缬氨酸产生菌104(2—TA_r,AHV~r,β—HL~r)。经摇瓶发酵试验、显示出0.25％的玉米粉具有极显著的刺激增产作用,并可降低生物素用量。以食用砂糖为碳源代替葡萄糖发酵,主酸产量提高了30—40％,同时副生酸含量下降。在适宜条件下,L—缬氨酸累积可达10mg/ml以上。     

灰阶超声与多普勒超声对甲状腺乳头状癌的诊断价值对比

目的:探讨灰阶超声和多普勒超声对甲状腺乳头状癌的诊断价值。方法:选取2013年9月~2014年9月在我院入院接受治疗的90例甲状腺乳头状癌。患者入院后,分别采用灰阶超声诊断和多普勒超声诊断对患者检查诊断,并对两种超声诊断方法的诊断率和对淋巴转移的诊断准确率进行比较分析,并对两种诊断方法的检查图像表现进行比较。结果:灰阶超声诊断诊断出82例,确诊率为91.1%,而多普勒超声诊断出85例,确诊率为94.4%。多普勒超声确诊率高于灰阶超声的,但无显著性差异(P0.05)。而灰阶超声诊断出有38例患者存在淋巴转移现象,诊断率为61.3%,多普勒超声诊断出有58例患者存在淋巴转移现象,诊断率为93.5%,多普勒超声的诊断率明显高于灰阶超声的,差异显著,具有统计学意义(P0.05)。结论:灰阶超声和多普勒超声对甲状腺乳头状癌都有较高的准确率,但多普勒超声在诊断患者是否有淋巴转移方面诊断率更高,结节内的血流信号更准确,其确诊率高达94.4%(P0.05)。通过检测有淋巴转移的患者的淋巴结内部的血管会变粗或增多等信息可提高淋巴转移的确诊率,具有可观的临床疗效。     

PMR1-钙离子ATP酶研究进展

离子通道是镶嵌在生物膜上的大分子蛋白质复合体,是生物体赖以生存的物质结构基础。其中,PMR1基因编码一种定位于高尔基体膜上的新P型钙离子ATP酶,直接影响细胞生长和蛋白的分泌表达。从分子及病理学水平对PMR1基因及其编码蛋白做了简要介绍,以期能为PMR1的基础研究提供一定的理论依据。     

PTH、BUN及CRe联合检测对早期肾功能衰竭的诊断价值

目的:探讨甲状旁腺激素、尿素氮及肌酐联合检测在肾功能衰竭患者早期诊断中的临床意义。方法:选取2012年1月-2013年8月在我院接受治疗的80例肾功能衰竭患者作为研究对象,另选同期体检正常人40例为对照组,选用我院全自动化学分析仪器及电化学发光免疫分析测量仪器检测患者血清中甲状胖腺激素、尿素氮及肌酐水平。结果:与对照组患者比较,观察组患者血清样本中甲状旁腺激素水平、尿素氮水平与肌酐水平呈显著增高趋势,有统计学意义(P0.05)。肾功能衰竭患者在其代偿期血清内三项水平呈显著增高趋势,而在氮质血症期间,血清内三项要素水平升高现象更为显著,而在尿毒症期间,对比氮质血症期间同样有其上升的表现,突出表现为显著的增高态势。结论:在临床诊断中,可将血清样本中甲状旁腺激素水平作为判定其肾功能衰竭严重程度的关键指标。