老年大鼠神经组织星形胶质细胞的分选培养与炎性特征分析*

目的: 建立优化的年轻与老年大鼠神经组织星形胶质细胞的分离纯化方法,比较年轻大鼠与老年大鼠星形胶质细胞的形态、功能差异,探讨老化后星形胶质细胞的功能改变及其在衰老过程中发挥的可能机制。方法: 采用50%-35%的percoll密度梯度离心法分选年轻(2月龄)和老年(20月龄)SD大鼠的大脑与脊髓星形胶质细胞;每组细胞设置3个复孔,培养72 h后,采用免疫荧光检测星形胶质细胞特异性标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP),观察不同年龄阶段星形胶质细胞的形态特征;qPCR检测衰老标志(p16、p21)的表达,β-半乳糖苷酶染色检测星形胶质细胞的衰老情况;qPCR检测促炎因子(IL-1β、TNF-α)与抗炎因子(IL-10)的表达水平。结果: 采用50%-35%的percoll梯度分选得到的星形胶质细胞的数量多、活性好、纯度高达95%以上,可用于后续实验。与年轻大鼠神经组织的星形胶质细胞相比,分选自老年大鼠神经组织的星形胶质细胞在细胞形态上偏向激活态,突起较少;星形胶质细胞β-半乳糖苷酶染色阳性率升高,p16、p21表达也明显增多(P<0.01);老年大鼠神经组织的星形胶质细胞的促炎因子(IL-1β、TNF-α)表达升高(P<0.05),抗炎因子(IL-10)表达有所降低(P<0.05)。结论: 50%-35%的percoll梯度可以作为大鼠神经组织星形胶质细胞的分选纯化、原代培养的方法;随着年龄的增加,星形胶质细胞发生细胞老化,表现出促炎症表型,促进神经系统的炎性衰老,可能是神经系统老化及神经退行性疾病的机制之一。     

二种血瘀证动物模型内皮功能及血液流变学的比较

目的通过对二种血瘀证大鼠模型的内皮素（ET）、一氧化氮（NO）和血液流变学指标进行比较,探讨其在血瘀证量化诊断中的意义。方法SD大鼠50只,分别建立气虚血瘀证和气滞寒凝血瘀证动物模型,测定二种模型血浆ET和NO水平,用LBY-N6B全自动自清洗血流变仪对二种模型进行血液流变学的分析。结果（1）与模型对照组比较,气虚血瘀模型组全血黏度低切变率、毛细管血浆黏度均明显增加（分别为P〈0.05）,血浆ET水平显著升高（P〈0.01）,NO水平显著降低（P〈0.01）;（2）与空白对照组比较,气滞寒凝血瘀模型组全血黏度低切、中切、高切以及毛细管血浆黏度均明显增加（分别为P〈0.01）,红细胞聚集指数增加（P〈0.05）,血浆ET水平显著升高（P〈0.01）,NO水平显著降低（P〈0.01）。结论内皮细胞损伤,ET和NO比例失衡可能是血瘀证量化诊断的重要指标。     

眼科手术等候期患者家属对健康教育需求的调查

目的:了解眼科手术等候期患者家属对健康教育的需求。方法:采用自行设计的调查问卷对100名在患者手术过程中等候的家属进行调查。调查内容包括手术等候中希望获得的相关信息及其需求程度,需要的健康教育方式及每种健康教育的需求程度。结果:1).眼科手术等候中,家属强烈需要的信息有手术效果(76%)、术后饮食指导(60.4%)、手术费用(57.3%)、患者目前病情(54.2%)、术后头位指导(51%)。2).最需要的健康教育方式是与医生护士交谈(66%)。结论:对手术等候期的患者家属应根据需求实施科学有效的健康教育,用恰当的方式及时提供家属想要了解的信息,使他们具有良好的应对能力和心理承受能力,在照顾患者的过程中为患者提供有效的支持系统。     

大鼠前扣带皮层多巴胺D1受体参与痛相关情绪调节的行为-电生理学观察

本研究旨在探索前扣带皮层(anterior cingulate cortex, ACC)的多巴胺D1受体参与痛情绪反应的调节作用。第一天大鼠适应环境并记录检测指标的基础值;第二天预先在ACC给予多巴胺D1受体拮抗剂SCH-23390或激动剂SKF-38393,然后大鼠左后足底注射完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant, CFA, 0.08 mL),与特定环境匹配后建立条件位置逃避(conditioned placeavoidance,CPA)反应;第三天同步观察大鼠在痛环境中的CPA反应与ACC脑区神经元的放电频率,随后进行旷场行为、机械痛行为和热缩足反射潜伏期(paw withdrawal latency, PWL)测试;在另外一组实验中,给予大鼠足底注射生理盐水(NS),ACC脑区预先给予多巴胺D1受体拮抗剂或激动剂,并进行上述同样的实验观察。结果显示：(1)相比于对照组,足底注射CFA的大鼠PWL与机械痛阈值明显降低(P <0.05);(2)注射CFA组的大鼠在“痛环境”和旷场中心的停留时间明显缩短(P <0.05);(3)预先在ACC注射...     

降纤酶皮试阳性1例报告

1　临床资料　　患者 ,男 ,48岁 ,因头痛、头晕 1周就诊 ,查血压 2 4 .0 / 1 7.3 k Pa。缺血性脑中风预测 :临界一级。全血比粘度 4.71 (正常值 3.8～ 4.6) ;血浆比粘度 1 .83(正常值 1 .45～ 1 .80 ) ;血小板粘附率 46(正常值 1 8.8～ 38.8)。诊断 :高血压病。因患者血粘度三项指标高于正常水平 ,决定给予静滴降纤酶。首先以 0 .1 ml内含 0 .0 0 0 2 5u皮内注射试敏。1 5min观察结果 ;皮丘 0 .7cm× 0 .7cm,周围红晕3.5cm× 4.0 cm,可见明显伪足 ,自诉局部瘙痒。判断 :降纤酶皮试阳性 ,追问有漆过敏史。2　讨论　　降纤酶是在原蝮蛇抗栓酶…     

血培养阳性报警时间联合降钙素原、中性粒细胞/淋巴细胞比值对大肠埃希菌血流感染患者死亡风险的预测价值

摘要 目的：探讨血培养阳性报警时间（TTP）联合降钙素原（PCT）、中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）对大肠埃希菌血流感染（BSI）患者死亡风险的预测价值。方法：选取2020年1月～2022年6月我院收治的223例大肠埃希菌BSI患者,根据入院后28 d内是否死亡分为死亡组和存活组。收集患者临床资料和血培养TTP,检测PCT、NLR。采用多因素Logistic回归分析大肠埃希菌BSI患者死亡的影响因素。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析TTP、PCT、NLR对大肠埃希菌BSI患者死亡风险的预测价值。结果：223例大肠埃希菌BSI患者入院后28 d内死亡率为30.04％（67/223）。死亡组TTP短于存活组,PCT、NLR高于存活组（P均＜0.001）。多因素Logistic回归分析显示,年龄增加、入住重症监护病房（ICU）、气管插管/切开、PCT升高、NLR升高为大肠埃希菌BSI患者死亡的独立危险因素,TTP延长为独立保护因素（P＜0.05）。ROC曲线分析显示,TTP、PCT、NLR联合预测大肠埃希菌BSI患者死亡的曲线下面积大于各指标单独预测。结论：TTP缩短和PCT、NLR升高与大肠埃希菌BSI患者死亡风险增加相关,TTP、PCT、NLR联合预测大肠埃希菌BSI患者死亡风险的价值较高。     

电磁辐射损伤机制与防护

电磁辐射可导致动物心血管、神经、生殖、免疫等多系统不同程度损伤,严重威胁人类健康,电磁损伤的诊断和防治已成为亟待解决的问题。本文针对电磁辐射对靶器官的损伤作一综述,为电磁辐射的预防、诊断、防治和护理提供依据。     

利用全细胞膜片钳技术记录大鼠脑片NMDA电流的研究*

目的: 采用全细胞膜片钳技术记录大鼠脑片实验中NMDA电流,并介绍诱发NMDA电流的自制刺激电极制作方法。方法: 在大鼠目标脑区快速取材并获取活性良好的脑片,分别通过含受体激动剂NMDA的孵育液灌流和电刺激诱发NMDA电流两种方式进行膜片钳记录;利用针灸针自制刺激电极。结果: 通过记录到大鼠脑片神经元的EPSC和AP可判断神经元的状态,比较两种方法诱导的NMDA电流幅度,即直接灌流受体激动剂NMDA(282.0±24.3) pA和自制刺激电极诱发(261.4±40.1)pA,二者电流幅度无明显差异(P＞0.05,n=4);自制刺激电极与进口刺激电极诱发的NMDA电流幅度分别为(267.2±36.5)pA vs (239.2±41.0)pA,二者电流幅度无明显差异(P＞0.05,n=4),证明自制刺激电极成功。结论: 大鼠脑片实验中,通过直接灌流激动剂与电刺激两种方式均可诱导NMDA电流,自制刺激电极为在脑片上记录诱发电流提供了一种经济、可靠的实验手段,便于各实验室应用。     

利用膜片钳技术标记脑片神经元的方法

目的: 介绍一种利用膜片钳技术标记脑片神经元形态的方法。方法: 利用振动切片机切好实验目标部位的脑片,用含有Neurobiotin^TM Tracer的电极内液灌注玻璃微电极,并进行全细胞膜片钳记录;实验结束后将脑片先用4％多聚甲醛固定、漂洗,再用含有Streptavidin-Texas Red和Triton X-100的PB染色,2 h后即可用荧光显微镜观察着色的神经元。结果: 将细胞膜电压钳制在-70 mV,阶跃刺激后神经元表现为逐渐增大的膜电流。电流钳模式记录时,阶跃刺激使神经元去极化,达到阈电位后爆发动作电位。荧光显微镜下可看到胞体和主要突起清晰完整的神经元形态。结论: 本方法适用于在膜片钳实验后观察所记录的神经元的形态特征,操作方便,图像直观清晰。     

微丝电极阵列的参考电极内置与外置的对比研究*

目的: 通过对比内置和外置参考电极的微丝电极阵列在记录大鼠脑神经元放电过程中的优缺点,优化微丝电极阵列的制作与埋置,为多通道电生理实时记录系统提供更加实惠、优异的媒介工具。方法: 采用镍铬合金丝、电路板、电极引脚和地线(银线)制作16通道的微丝电极阵列,通过内置(参考电极与电极阵列并列排布)或外置(参考电极与地线分别焊接在电极一侧的两端)微丝电极阵列的参考电极,观察对比两种电极在记录大鼠ACC脑区神经元放电中的区别。实验大鼠分为内置组(8只)和外置组(9只),检测指标有信噪比(n=8)、放电幅度(n=380)和放电频率(n=54)。结果: 内置与外置参考电极的微丝电极阵列均可顺利记录出大鼠ACC脑区神经元的电信号;与外置组相比,内置组的神经元电信号具有信噪比高(P＜0.05)、背景信号幅度小、受噪音干扰小,和放电幅度大(P＜0.05)的优点;锋电位放电频率没有显著差异(P＞0.05)。结论: 在记录大鼠ACC脑区神经元电活动时,内置参考电极的微丝电极阵列记录到更高信噪比、更大放电幅度的电信号,为多通道电生理技术提供更加可靠的工具。