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根据已发表的金花茶查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因(CnCHS)序列设计全长扩增引物,以金花茶花瓣总cDNA为模板进行PCR扩增,成功获得了该基因cDNA全长。将扩增所得全长产物连接PMD18-T载体后转化大肠杆菌E.coli DH5α,提取质粒后经酶切、测序鉴定后,将其与双元表达载体pCAMBIA1300连接,成功构建了CnCHS基因的正义表达载体pCAM-CnCHS。将该重组表达载体转化农杆菌EHA105后,利用农杆菌介导法将CnCHS基因转入烟草,获得转基因烟草18株。利用PCR法及Southern blotting对所获得的转基因植株进行鉴定,结果显示CnCHS基因成功整合到烟草基因组中,阳性率达67%,并获得了单拷贝转基因植株。这些结果表明本研究成功构建了金花茶CnCHS基因对烟草的遗传转化体系,为深入研究CnCHS基因的功能及其对花色的调控效应奠定了基础。 相似文献
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为了探讨红背山麻杆对喀斯特地区干旱环境的生理适应机制，以一年生红背山麻杆扦插苗为试验材料，采用自然干旱法，对轻度(干旱14 d)、中度(干旱28 d)和重度(干旱42 d)干旱胁迫及复水处理的红背山麻杆扦插苗生长、光合色素含量及荧光参数进行测定和分析。结果表明，(1)随干旱胁迫时间的延长，红背山麻杆扦插苗叶片相对含水量显著降低，株高和基径增长缓慢，复水后的叶片相对含水量显著增加，而株高和基径无明显变化；(2)随干旱胁迫时间的延长，扦插苗叶片叶绿素a(Chla)、叶绿素b(Chlb)、叶绿素[Chl(a+b)]含量及Chla/b先增加后降低，并在不同程度干旱胁迫及复水后均显著高于对照(CK),轻度和中度干旱胁迫复水后高于对照，重度干旱胁迫复水后也能恢复至对照水平。(3)随干旱胁迫加剧，扦插苗叶片荧光参数Fo显著增加，Fm、Fv/Fo、Fv/Fm逐渐减小，代表单位反应中心活性的参数Abs/Rc、Tro 相似文献
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