草鱼β-防御素1的趋化活性及免疫佐剂效应研究

为了探究草鱼防御素的免疫调节作用, 研究通过Clustal Omega多序列比对和I-TASSER二级结构预测, 发现草鱼β-防御素1(Ctenopharyngodon idella β-defensin 1, CiBD1)是一类具有两亲性的富含半胱氨酸的小分子阳离子肽, 其结构在硬骨鱼类中高度保守; 通过构建pET-32a-CiBD1原核表达载体, IPTG诱导表达后经过Ni2+亲和层析法纯化和肠激酶酶切获得CiBD1重组蛋白, 通过CFU平板法验证了CiBD1的抑菌活性, 当蛋白浓度达到200 μg/mL时, 对革兰氏阴性菌(G+)及革兰氏阳性菌(G–)都具有显著的抑制活性; 趋化实验表明CiBD1在50 ng/mL时对草鱼原代白细胞趋化活性最佳; 通过个体实验探究了CiBD1重组蛋白对嗜水气单胞菌灭活疫苗的免疫佐剂效应, 发现添加 CiBD1佐剂组死亡率显著低于单独疫苗组, 且该组IgM和MHC Ⅱ转录水平及血清中补体3(C3)和溶菌酶含量都显著高于对照组。研究表明CiBD1重组蛋白在细菌抗感染免疫中发挥着重要作用, 在水产养殖中具有一定的应用前景。     

不同养殖密度下鱼粉水平对青鱼幼鱼生长及免疫的影响

为研究鱼粉水平和养殖密度对青鱼(Mylopharyngodon plceus)幼鱼生长及免疫的影响, 试验采用鱼粉水平(10%、20%)×养殖密度(50、100和200尾/箱)的双因素设计, 将青鱼幼鱼(2.50±0.02) g分为L₅₀、L₁₀₀、L₂₀₀、H₅₀、H₁₀₀和H₂₀₀ 6组, 每组3个重复, 养殖试验在水库网箱(1.5 m×1.5 m×1.5 m)中进行。结果显示: (1)生长性能: 实验中期(第8周), 青鱼的增重率随养殖密度的增加呈先上升后下降趋势, 且H₂₀₀组的青鱼增重率在养殖中期与L₂₀₀组相比有提高的趋势, 但差异不显著(P>0.05), 在实验后期(第16周)显著低于L₂₀₀组(P<0.05); L₂₀₀的存活率低于L₅₀组(P>0.05), 养殖密度和鱼粉水平对青鱼存活率与增重率有交互效应(P<0.05)。(2)免疫应激指标: 在实验中期, 低鱼粉组青鱼的溶菌酶(LSZ)、血糖(GLU)随密度的升高先下降后上升, 肠道分泌性免疫球蛋白A (S-IgA)有提高的趋势; H₂₀₀组的LSZ、补体4 (C4)、免疫球蛋白M (IgM)、S-IgA和皮质醇(COR)含量均高于L₂₀₀组, GLU低于L₂₀₀组(P>0.05)。在实验后期, 高低鱼粉组的C4随密度的增加均呈下降后上升的趋势(P>0.05)。H₂₀₀组的IgM和COR含量均高于L₂₀₀组, GLU低于L₂₀₀组(P>0.05)。综上所述, 在本实验条件下, 实验中期高密度养殖会使青鱼幼鱼生长性能有降低趋势, 对机体免疫、抗应激能力产生负面影响, 增加鱼粉水平有一定改善作用, 实验后期高密度养殖降低了低鱼粉饲料组青鱼的存活率, 提高鱼粉水平对高密度组青鱼生长性能和免疫功能无改善作用。     

黄颡鱼对四种动物性蛋白原料在不同制粒工艺下的表观消化率研究

实验以三氧化二铬(Cr₂O₃)为外源指示剂,采用“70%基础饲料+30%实验原料”的方法配制实验饲料,测定了初始体质量为(28.68±0.49) g的黄颡鱼(Peltobagrus fulvidraco)对国产鱼粉、进口鱼粉、进口鸡肉粉和脱脂黄粉虫粉在膨化制粒和非膨化制粒两种工艺下的干物质、粗蛋白、粗脂肪和氨基酸表观消化率。结果显示,在非膨化制粒工艺下,黄颡鱼对进口鸡肉粉的干物质表观消化率显著高于另外3种原料(P<0.05),黄颡鱼对黄粉虫粉蛋白消化率最低(P<0.05),黄颡鱼对进口鸡肉粉脂肪表观消化率显著高于国产鱼粉和进口鱼粉(P<0.05); 在膨化制粒工艺下,进口鸡肉粉的干物质表观消化率显著低于另外3种原料(P<0.05),国产鱼粉和进口鱼粉的粗蛋白质消化率达94%以上,显著高于另外两种原料(P<0.05),但进口鸡肉粉的脂肪表观消化率显著低于其他原料(P<0.05)。在非膨化制粒工艺和膨化制粒工艺下国产鱼粉、进口鱼粉和黄粉虫粉的干物质表观消化率无显著性差异,但在非膨化制粒工艺下进口鸡肉粉的干物质表观消化率显著高于膨化制粒工艺(P<0.05)。对于国产鱼粉、进口鱼粉和黄粉虫粉而言,非膨化制粒工艺的蛋白消化率显著低于膨化制粒工艺(P<0.05),而鸡肉粉则相反。膨化加工工艺进口鱼粉的脂肪表观消化率显著高于非膨化加工工艺(P<0.05),而膨化加工工艺的黄粉虫脂肪表观消化率显著低于非膨化加工工艺(P<0.05)。氨基酸的消化率结果与粗蛋白的表观消化率变化趋势基本一致。由此可知,对于黄颡鱼饲料,国产鱼粉和进口鱼粉是最佳的蛋白质来源,进口鸡肉粉和黄粉虫亦可以作为其优质的蛋白质来源。对于进口鱼粉、国产鱼粉和黄粉虫粉,膨化制粒工艺更有利于黄颡鱼对其干物质、蛋白、脂肪和氨基酸等营养元素的消化利用,而对于进口鸡肉粉,非膨化制粒工艺更有利于黄颡鱼对营养元素的消化利用。