雪花莲凝集素基因转化菊花及转基因植株的抗蚜性研究

针对菊花存在的蚜虫虫害问题,采用农杆菌介导法将gna基因导入菊花叶片,共获得93个转化克隆。研究了影响转化频率的主要因素,得出在使用pH5．6的YEB培养基,菌液浓度OD600=0．4,45日苗龄中部叶片预培养1d,共培养4d,共培养的培养基中加入0．5mg／L GA3的条件下可使转化频率提高到11．21％。PCR、实时荧光PCR检测结果表明,外源基因已整合到植物细胞基因组中。转化植株幼苗饲虫实验表明,不同转化克隆的抗蚜性差异较大,蚜口密度抑制率从10％—84％不等,平均蚜口密度抑制率为39．4％。转化植株叶片蛋白提取液对小鼠红细胞具有凝集作用。     

樱桃砧木Colt离体叶片再生

以樱桃砧木Colt试管苗的叶片为外植体 ,通过先诱导愈伤组织分化不定芽以及叶片直接分化不定芽两种途径诱导再生。结果表明 :在MS附加NAA 1 0mg/L、KT3 0mg/L、ZT0 2 5mg/L培养基中 ,愈伤诱导率可达 1 0 0 % ;诱导的愈伤在MS附加NAA 0 2mg/L、IAA0 5mg/L、6 BA 0 5mg/L、KT 1 0mg/L、GA 0 5mg/L培养基中 ,不定芽分化率为 2 1 3% ;在MS附加 6 BA 6 0mg/L、NAA 1 0mg/L、GA 0 5mg/L中 ,叶片 -叶柄不定芽诱导率可达 48 3%。     

樱桃砧木Colt离体叶片再生

以樱桃砧木Colt试管苗的叶片为外植体,通过先诱导愈伤组织分不定芽以及叶片直接分化不定芽两种途径诱导再生,结果表明,在MS附NAA1．0mg/L、KT3．0mg/L、ZT0．25mg/L培养基中,愈伤诱导率可达100％;诱导的愈伤MS附加NAA0．2mg/L、IAA0．5mg/L、6－BA0．5mg/L、KT1．0mg/L,GA0．5mg/L培养基中,不定芽分化率为21．3％,在MS附加6-BA6．0mg/L、NAA1．0mg/L、GA0．5mg/L中,叶片一叶柄不定芽诱导率可达48．3％。