广东普通野生稻中抗病类似物基因的克隆及序列分析

植物抗病基因(R基因)决定对某种病原物的抗性,其产物与病原物的无毒基因产物识别起始信号传导将信号传递到细胞体内,引起防卫基因的表达而导致植物产生抗性反应,这就是基因对基因学说[1]。在过去的10多年中,基因对基因学说得到了大量实验的证实,这得益于许多植物抗病基因和病原物无毒基因的克隆。至今已有40种植物抗病基因(R基因)从拟南芥、番茄、烟草、亚麻、水稻、甜菜、玉米、大麦中出来[2]。根据植物抗病基因产物的结构可将植物抗病基因分为明显的8个类群,最大的一个类群为NBS-LRR类(nucleotide-binding site,NBS;Leucine-richrepe…     

利用RAPD和ISSR引物对三系杂交水稻及其父母本的鉴定

为了鉴定杂交种子与父母本的亲缘关系，用20条随机引物和21条ISSR引物在供试的一组三系杂交水稻F1、父母本及对照进行扩增。20条RAPD引物共扩增出78个条带，其中28条为多态性条带；21条ISSR引物共扩增出72个条带，其中多态性条带为20条。将这些多态性条带进行聚类分析，F1与父、母亲缘关系较近归为一类．随后它们才与对照归为一类。结果表明RAPD和ISSR引物的PCR扩增均能有效地鉴定三系杂交水稻的杂种F1与组合中父、母本的遗传关系。与RAPD相比ISSR引物在三系杂交水稻及其父母本的鉴定中具有稳定性更好的优点。     

利用RAPD和ISSR引物对三系杂交水稻及其父母本的鉴定

为了鉴定杂交种子与父母本的亲缘关系,用20条随机引物和21条ISSR引物在供试的一组三系杂交水稻F1、父母本及对照进行扩增。20条RAPD引物共扩增出78个条带,其中28条为多态性条带;21条ISSR引物共扩增出72个条带,其中多态性条带为20条。将这些多态性条带进行聚类分析,F1与父、母亲缘关系较近归为一类,随后它们才与对照归为一类。结果表明RAPD和ISSR引物的PCR扩增均能有效地鉴定三系杂交水稻的杂种F1与组合中父、母本的遗传关系。与RAPD相比ISSR引物在三系杂交水稻及其父母本的鉴定中具有稳定性更好的优点。     

广东普通野生稻中抗病类似物基因的克隆及序列分析

植物抗病基因（R基因）决定对某种病原物的抗性，其产物与病原物的无毒基因产物识别起始信号传导将信号传递到细胞体内,引起防卫基因的表达而导致植物产生抗性反应，这就是基因对基因学说。在过去的10多年中，基因对基因学说得到了大量实验的证实，这得益于许多植物抗病基因和病原物无毒基因的克隆。至今已有40种植物抗病基因（R基因）从拟南芥、番茄、烟草、亚麻、水稻、甜菜、玉米、大麦中出来。根据植物抗病基因产物的结构可将植物抗病基因分为明显的8个类群，最大的一个类群为NBS-LRR类（nucleotide-binding site，NBS；Leucine-rich repeat,LRR），在植物中NBS-LRR基因可根据蛋白中是否具有TIR（Toll and mammalian interleukin-1 receptors）结构域分为TIR-NBS-LRR和non-TIR-NBS-LRR两大类。     

普通野生稻中NBS-LRR类基因的克隆及Southern杂交

利用已克隆植物的R基因NBS序列中保守基序设计简并引物进行PCR扩增是克隆NBS有效的方法。从广东普通野生稻HLW028中克隆出3条序列,经同源性分析均为NBS,序列号为DQ272573-DQ272575。从NCBI中下载普通野生水稻和功能已知的水稻NBS-LRR类基因,与本实验所提交的NBS进行聚类分析。这些NBS可分为5大类,其中DQ272574是一个新的NBS基因类型。从野生水稻中克隆NBS基因存在P-loop、RNBS-A、kin-2、RNBS-B、RNBS-C和PLAL的基序。Southern杂交结果表明,野生水稻HLW028和GZW035中具有与DQ272574同源的3个拷贝。