USE OF RAPD FOR DETECTING AND IDENTIFYING PORPHYRA (BANGIALES, RHODOPHYTA)

imDUCnONManymolectilarbiologybasedDNAtecboqUesPbodepowrfulmeansforstUdvingofgeneticvariationandphylDgenehcrelationships.AmoleculartecboqUebasedonthePOl}-menachainreaction(PCR)isaneffeChvetoolforraPididentificationofgeneticTnarersknownasRandomAInPlifiedPolymorphicDNA(m)(Wlliamsetal.,l99o;Welsh&McClelland,l99o).Sucheders,derivedfromPrindngsitesrandoInldistributedthIDughoutthegenome,areinheritedinaMendelianPatem.ThesePOlyTnorphismsallowtheanalsisofcomplexgenomeswithoutPriorknoWl…     

T-RFLP技术及其在微生物群落结构研究中的应用

微生物是生态系统的重要组成部分，在各种元素的生物地化循环中起关键作用。因此研究微生物的群落结构，借此了解微生物和环境的关系就尤为重要。长久以来微生物群落结构的调查方法一直是建立在分离和培养的方法上。这种方法不但费时费力，而且不够准确。这反映在如下几个方面：(1)微生物群落组     

皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino)和杂色鲍(Haliotis diversicolor Reeve)遗传多样性的RAPD研究

于 2 0 0 1年 8月— 2 0 0 2年 7月 ,选用 2 0条能产生清晰可重复扩增产物的随机引物 ,对皱纹盘鲍 (HaliotisdiscushannaiIno)、杂色鲍 (HaliotisdiversicolorReeve)进行了RAPD分析 ,共检测到 2 1 3个位点 ,在群体之间和个体之间都存在差异。利用PopGen32软件计算各群体扩增位点的多态性比例、群体遗传杂和度和群体间的遗传距离 ,多态比例分别为 43.66%、5 3 0 5 % ,2个群体的平均杂合度为 0 .1 5 5 7、0 .1 686。结果表明皱纹盘鲍与杂色鲍的亲缘关系较远。     

黑鲷(Acanthopagrus schlegeli)肿瘤坏死因子α cDNA的克隆及特征分析

采用同源克隆的方法，从黑鲷中获得肿瘤坏死因子(TNFα)全长cDNA序列。该序列含1288个核苷酸，可编码253个氨基酸的TNF前体蛋白。它是一种跨膜蛋白，无糖基化位点和信号肽结构。黑鲷TNFα与其它鱼类的TNFα的相似性很高，占据进化上独立的分支；与哺乳类TNFα和TNFG源于共同的祖先。基因结构分析显示，该基因含有TNF家族pmfile和TNF家族的标签序列；在参与TNFα基因二硫键形成的两个半胱氨酸和TNFα三聚体形成的位点高度保守；空间结构模拟显示，它与哺乳类TNFα的空间结构相似，都是由两个β折叠片组成，每个折叠片包含5个反向平行的β链。表达研究结果表明，黑鲷TNFα在检测的各个组织中均为组成型表达，表现为在刺激与非刺激鱼体中，都可以检测到黑鲷TNFα的表达，但是其表达水平在不同组织中有很大差异。黑鲷TNFα在头肾、脾脏和鳃的表达量较高，而在心脏、肝脏、血液、肾脏和大脑中表达量较低。     

一株从栉孔扇贝病贝体内分离到的分类地位待定的特殊微生物

从典型患病栉孔扇贝(Chlamys farreri)体内分离到一株特殊微生物，光镜下可见的粒子为革兰氏染色阴性；电镜观察为圆形、近似圆形，已经发现的粒子大部分直径在300nm以下，最小为50nm左右，最大可达4000nm以上。该细菌在人工培养基上形不成肉眼可见的菌落，倒置显微镜下其菌落为无色透明、圆形、小点状菌落。生化特性测试表明该细菌能利用吐温-40与吐温-80。其分类地位尚待进一步分析和证实。     

日本对虾野生种群和养殖种群遗传结构的RAPD标记研究

于１９９７年４月在福建和山东青岛分别采集地虾野生种群和养殖群体的样品,采用ＲＡＰＤ标记技术对其遗传结构进行初步研究。用２０个随机引物在野生种群和养殖群体中分别扩增出１５７和１５３条ＤＮＡ片段,其中多态性段数分别为８５和５８条,多态性片段的比例分别为５４．１４％和３７．９１％,平均杂合度分别为０．２５１７和０．１３４３。     

栉孔扇贝核糖体RNA转录间区域的序列测定

栉孔扇贝 (Ｃｈｌａｍｙｓｆａｒｒｅｒｉ)在我国主要分布于北方沿海海域 ,是我国北方沿海主要的养殖贝类之一。近些年来 ,广泛的半人工采苗 ,人工育苗及苗种转移等养殖活动增加了各种群间的交流 ,从而给各种群种质资源的管理、利用和保护带来一定困难 ;同时 ,近几年来扇贝的养殖业出现了病害流行、养殖环境恶化等严重问题 ,使人们迫切要求进行优质良种的培育 ,而这两方面的工作都要求对各种群的遗传特征有充分的认识和研究。近些年来 ,运用等位基因酶电泳方法开展了栉孔扇贝的遗传变异研究［４］,提供了一些非常有用的信息 ,但由于等位基因…     

中华绒螯蟹颤抖病组织病理学研究

采用常规石蜡切片技术、以正常样品作对照,对患颤抖病的中华绒整蟹不同组织进行病理学观察,旨在为颤抖病病原的确定及诊断等提供参考,同时期望加深对河蟹发病机制及死亡过程的认识。结果表明,患病河蟹的鳃、心脏、肝胰腺、腹节神经等组织器官发生了不同程度的病变,其病理特征主要表现为：细胞浊肿、变性、坏死,某些细胞的细胞核固缩、碎裂或崩解;结合前人的研究,推测鳃、心脏、肝胰腺、腹节神经是病原体感染河蟹的主要靶组织器官;河蟹具有重要生理功能的鳃、心脏、肝胰腺组织发生了严重病变,使其功能遭到破坏,这可能是导致河蟹发病死亡的病理学基础。     

宁波长街缢蛏遗传结构的RAPD分析

利用RAPE)技术对宁波长街自然群体和养殖群体缢蛏【Sinonovacula constricta(Lamarck)】的遗传背景进行了比较研究。21个引物共扩增出121条清晰可辨的RAPE)标记，大小在250--2500bp之间，分别统计上述位点，得到两群体各遗传参数。结果表明，养殖环境对其影响较小，两者问遗传距离仅为0．0497，近交系数(Fst)为0．0735，有效繁殖个体数(Ncm)为3．1514；两者平均遗传杂合度比较却发现养殖群体略大于野生群体。与其他的水产动物研究结果不同。作者推测上述结果与养殖缢蛏苗种来自天然采苗、无累代养殖和养殖区饵料较自然海区丰富等因素有关。     

中华绒螯蟹多倍体诱导技术改进

采用抑制第二极体排放的方式对15℃孵育的中华绒螯蟹自然受精卵人工诱导三倍体,通过抑制第一次卵裂对18℃孵育的自然受精卵人工诱导四倍体,应用流式细胞仪进行倍性鉴定.分别使用CB,6-DMAP和KCl三种试剂对受精卵处理,发育至囊胚期检测,获得的最高三倍体诱导率依次是49.1%,51.7%和77.5%,获得的最高四倍体诱导率依次是50.3%,54.9%和79.8%.使用KCl试剂对抱卵蟹诱导处理,孵出潘状幼体检测,最高三倍体诱导率为85.3%,最高四倍体诱导率为27.3%.克服了以往三倍体诱导中离体培养的困难,首次获得了中华绒螯蟹三倍体潘状幼体,并极大提高了潘状幼体阶段四倍体诱导率.