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根据已报道的甘薯潜隐病毒莲藕分离物sweet potato latent virus-lotus(SPLV-lotus)核苷酸序列设计引物,采用RT-PCR从感病莲藕样品中扩增获得SPLV-lotus辅助成分-蛋白酶基因(HC-Pro),大小为1 375 bp。通过序列测定和分析后,将其克隆到原核表达载体pGEX4T-1,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导并纯化获得大小为74 kD的融合蛋白pGEX4T-1-HC-ProSPLV-lotus。SDS-PAGE结果显示,融合蛋白获得过量表达。以纯化蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备抗血清,采用ELISA和Western blot对抗血清效价和特异性进行检测,当HC-Pro抗血清稀释比为1∶256 000时,ELISA显色后OD450读数仍高于0.6,表明所制备抗血清合格;Western blot结果显示,在感染SPLV-lotus植株样品中仍能检测到单一目的条带。这些结果表明,制备的抗血清效价合格且可用于SPLV-lotus的特异性检测。 相似文献
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秦朗 《农产品加工.学刊》2010,(11)
1玉脂蒜米1.1工艺流程选料→烫漂→腌渍→产品。1.2制作方法(1)选料。将收获1个月内的大蒜筛选分级,剥去蒜衣,分成蒜瓣。剥去蒜衣后的大蒜存放时间不可超过4h。 相似文献
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李属坏死环斑病毒(prunus necrotic ringspot virus, PNRSV)严重危害蔷薇科植物,在世界范围内普遍分布。为建立快速有效的PNRSV检测方法,依据PNRSV CP基因序列设计引物,并从桃叶片上扩增PNRSV-CP片段,将双酶切产物插入原核表达载体pET28a中,获得重组质粒pET28a-CPPNRSV,转化大肠埃希菌Rosetta菌株,IPTG诱导重组蛋白表达。SDS-PAGE电泳检测显示,在分子量约25 ku处有蛋白质条带,符合预期大小。镍柱亲和纯化PNRSV CP蛋白,以其纯化蛋白质免疫健康新西兰白兔,制备多克隆抗血清。Western blot、ELISA、Dot blot检测结果显示,制备的抗血清能检测到PNRSV CP基因在感病植物叶片中表达,而在健康植株中未检测到;制备的抗血清滴度稀释至1∶64 000时,仍能与纯化蛋白质发生特异性反应。综上,制备的PNRSV抗血清特异性强、效价高,可用于PNRSV的快速检测。 相似文献
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随着我国茶文化思维的发展和高校思政教育进步,高校对于学生学习生活中思维意义上的提升格外重视,尤其重视在茶文化与高校思政教育的基础上培养学生的社会主义核心价值观。现阶段我国高校的茶文化思维已经与思政教育结合起来,在思政教育中融入茶文化思维,是教育视角的重大突破,也是我国思政教育得到很大的进步的一个表现,二者的结合也是传递我国茶文化思维和社会主义核心价值观的有效途径之一。 相似文献
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一、玉脂蒜米
1.工艺流程。选料一烫漂一腌制。2.制作方法。①选料。将收获1个月内的大蒜筛选分级,剥去蒜衣,分成蒜瓣。剥去蒜衣后的大蒜存放时间不可超过4小时。②烫漂。先将4倍于蒜粒的水煮开,倒入蒜米搅动,至“透而不面”时出锅,放入冷水中使其变脆。 相似文献
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