重组牛α-干扰素的原核表达与纯化

为在大肠杆菌表达系统中高效表达牛α-干扰素(bovine interferon-α,Bo IFN-α),将经密码子优化后的牛α-干扰素成熟蛋白基因合成并克隆到表达载体p Cold II中,转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,获得可溶性的表达蛋白。对重组菌表达条件进行优化,结果显示在IPTG浓度为0.64 mmol/L,诱导温度为15℃,诱导时间为9 h的条件下,可溶性目的蛋白的表达量最高。重组蛋白经镍柱纯化后的纯度为99.2%,表达量为36 mg/L菌液。重组蛋白在MDBK细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为1×106U/mg。     

CDV强毒BJ16B2株H基因在昆虫杆状病毒中的表达与鉴定

试验旨在获得具有天然构象且抗原性良好的犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)强毒株的H蛋白。以分离的CDV强毒株BJ16B2为模板,RT-PCR特异扩增H基因,克隆至表达载体pFastBacTMHTA上,酶切及测序鉴定正确后比对分析H基因同源性,并将重组质粒pFastBacTMHTA-H转化大肠杆菌DH10BacTM感受态细胞,同源重组构建穿梭质粒rBacmid-H,将重组穿梭质粒转染Sf9昆虫细胞,拯救重组杆状病毒。利用IFA和Western blotting对获得的重组蛋白进行鉴定及抗原性分析。结果显示,重组质粒pFastBacTMHTA-H酶切测序鉴定正确,该H基因属于Asia-1强毒株,与参考毒株的核苷酸和氨基酸同源性分别为89.8%~99.3%和89.6%~99.5%。在杆状病毒中所表达的H蛋白能与CDV阳性血清及His-tag抗体发生特异性反应,IFA鉴定能够产生特异性绿色荧光,且在68ku左右出现蛋白条带,表明H蛋白成功表达且具有良好的反应原性。本研究获得了具有天然构象及良好抗原性的CDV重组H蛋白,为后续蛋白结构和抗原特性差异分析、单抗制备、CDV亚单位疫苗的开发奠定了基础。     

南京地区犬尿石症流行病学调查

通过南京地区多家大型宠物医院146例犬尿石症流行病学调查,采用化学方法对尿石主要成分进行分析,了解南京地区犬尿石症流行病学特点。结果表明,146例尿石标本中,鸟粪石(磷酸铵镁)成分占52.55%(76/146),尿酸及尿酸盐占17.81%(26/146),磷酸钙占2.74%(4/146),草酸钙占23.29%(34/146),复合型结石占4.11%(6/146)。患尿石症犬的性别倾向、发病部位、平均年龄和饮食习惯对结石的成分及发生部位都有一定的关系。     

高钙日粮对青年蛋鸡肾脏中XOD基因mRNA表达的影响

选择35日龄伊沙蛋鸡100羽,随机均分为对照组（含钙1.00％）和高钙组（含钙3．78％）。于试验30d每组选取体质量相近的试验蛋鸡5羽,取肾脏样品,应用半定量逆转录聚合酶链式反应技术测定XODmRNA在肾脏中的表达水平。结果显示：高钙组肾脏中XODmRNA对β-actinmRNA的相对丰度显著高于对照组。说明高钙日粮可促进鸡肾脏的XODmRNA的表达。     

猪源隐孢子虫卵囊的分离及基因型鉴定

应用RT-PCR方法对南京、上海和合肥猪源隐孢子虫卵囊SSU rRNA部分序列进行扩增,产物测序后提交GenBank,收录号为DQ855266、DQ855267;用BLAST和DNAStar软件与GenBank参考序列进行比较,分析其同源性,绘制系统发育进化树,结合卵囊形态学观察和对小鼠、大鼠、兔、山羊和鸡的传染性试验确定隐孢子虫种类或基因型。结果表明,3地区猪源隐孢子虫分离株与微小隐孢子虫(C.parvum)同源性达94%~100%,与C.parvummouse型有99.8%~100%的同源性,并处于进化树的同一分支。因此,3地区猪源隐孢子虫是C.parvummouse型,提示猪和鼠之间存在交叉传播的可能。     

高钙饲粮对青年蛋鸡血清一氧化氮浓度和抗氧化功能的影响

本试验旨在研究高钙饲粮对青年蛋鸡血清一氧化氮（ＮＯ）浓度和抗氧化功能的影响。将 ３５日龄 １００羽伊沙蛋鸡随机均分为对照组（含钙 １．００％）和高钙组（含钙 ３．７８％），每组 ５个重复，每个重复 １０羽。每天观察鸡的精神状态、食欲和粪便情况。在饲喂高钙饲粮第 ０、８、１６、２４和 ３２天时，分别测定 ２组鸡的血清中 ＮＯ浓度和丙二醛含量及抗氧化酶系统的变化。结果表明：１）高钙饲粮能引起青年蛋鸡长期腹泻，在饲喂高钙饲粮的第 ８天就发生高血钙症。２）与对照组相比，高钙组在饲喂高钙饲粮第 ８天和第 １６天血清 ＮＯ浓度无显著变化（Ｐ＞０．０５），第２４天和第 ３２天显著升高（Ｐ＜０．０５）；第 ８天和第 ２４天血清超氧化物歧化酶活性、总抗氧化能力无显著变化（Ｐ＞０．０５），第 １６天显著升高（Ｐ＜０．０５），第 ３２天显著降低（Ｐ＜０．０５）；第 ８、１６、２４天血清丙二醛含量无显著变化（Ｐ＞０．０５），第 ３２天显著升高（Ｐ＜０．０５）；第 ２４天和第 ３２天黄嘌呤氧化酶活性有升高趋势（Ｐ＞０．０５）。结果提示，饲喂高钙饲粮可导致青年蛋鸡发生长期腹泻，引起高血钙症，导致其机体内自由基的产生与清除的动态平衡遭到破坏，使自由基的产生远远超出清除能力。     

硒的生物学特性与奶牛营养需要的研究进展

对硒的生物学特性,硒对奶牛健康的影响以及奶牛对硒的需要量作了比较全面的综述,为奶牛饲养过程提供科学的参考依据。     

雏鸡感染马立克氏病强毒后抗氧化酶活性和丙二醛水平的变化

对１０日龄雏鸡人工感染马立克氏病毒后，马立克氏病发病率为７８．０％，死亡率为７６．０％，在攻毒后２，４和６周，感染鸡血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ），血液中过氧化氢酶（ＣＡＴ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性在总体上的均显著低健康对照组鸡（Ｐ〈０．０５），血清丙二醛水平极显著地高于健康对照组鸡（Ｐ〈０．０１）。结合对马立克氏病临床病例的研究结果认为，氧自由基介入了马立克氏病的发病过程。     

富硒益生菌对山羊瘤胃发酵和瘤胃液脂肪酸含量的影响

为研究日粮中添加富硒益生菌(SP)对山羊瘤胃发酵和瘤胃液脂肪酸含量变化的影响,以8头装有永久性瘘管的山羊为对象,采用4×4拉丁方设计,进行4期试验,每期15 d。日粮中分别添加0(对照)、8(LSP)、16(MSP)和32(HSP)mL.d-1的SP。结果表明:日粮添加SP能显著影响山羊瘤胃pH值(P<0.01)、总挥发性脂肪酸(P<0.05)、微生物蛋白(P<0.05)和trans11-C18∶1浓度(P<0.05);并有升高瘤胃乙酸比例(P=0.08)、α-C18∶3浓度(P=0.07)以及降低瘤胃丁酸比例(P=0.05)、氨氮浓度(P=0.08)的趋势。说明日粮添加SP对缓解瘤胃pH值的下降,促进瘤胃总挥发性脂肪酸的产生、微生物蛋白的合成和对氨氮的利用,以及提高瘤胃液α-C18∶3和共轭亚油酸前体trans11-C18∶1的含量有积极作用。     

日粮添加富硒益生菌对奶牛硒吸收转化、抗氧化能力与生产性能的影响

将36头经产荷斯坦奶牛随机分成4组,对照组喂基础日粮,富硒益生菌(Se-Pro)组每头牛添加108.2 g/d,益生菌(Pro)组每头牛添加20.8 g/d,亚硒酸钠(Na2seO3)组每头牛添加5 mg/d.试验期为产前30 d至产后3个月.于试验0、30、60、90、120 d,采血样测定全血se含量、GPx活性和血浆丙二醛(MDA)含量;于产后2(初乳)、30、60、90 d,采乳样测定se含量;产后每个月测定产奶量1次.结果显示,Se-Pro组和Na2SeO3组的全血、初乳、常乳Se含量和GPx活性均显著高于对照组和Pro组(P<0.05);Se-Pro组的全血、常乳Se含量和GPx活性(30 d除外)均显著高于Na2SeO3组(P<0.05);Se-Pro组和Na2SeO3组的血浆MDA含量均显著低于对照组和Pro组(P<0.05);Se-Pro组的血浆MDA含量均显著低于Na2SeO3组(P<0.05);与对照组相比,Se-Pro组、Pro组、Na2SeO3组的泌乳期前3个月的平均日产奶量(4%FCM)分别增加了2.96 kg/d(P=0.069)、1.64 kg/d(P>0.05)、0.69kg/d(P>0.05).结果表明,Se-Pro的作用效果优于Pro和Na2SeO3.