传染性法氏囊病病毒主要结构蛋白VP2、VP1和VP2-VP1串联基因的原核表达及其初步应用

为获得传染性法氏囊病病毒(IBDV)特异性抗体检测用抗原VP2、VP1及VP2-VP1蛋白,分别设计引物扩增IBDV野毒株NN1172的VP2和VP1基因,并扩增VP2和VP1基因中抗原性和亲水性较好的重要区域,通过PCR扩增基因串联方法对截短的VP2和截短的VP1基因进行串联,首次获得VP2-VP1串联基因,并对VP2、VP1和VP2-VP1串联基因进行了原核表达和鉴定。结果成功构建了原核表达载体pET-VP2、pET-VP1和pET-VP2-VP1;诱导表达条件显示,3个重组质粒分别转入BL21菌株后经0.05 mmol/L IPTG诱导表达,分别得到分子量为69、114和63 kDa的VP2、VP1和VP2-VP1重组蛋白,且均以包涵体形式表达,3个重组蛋白分别于诱导后5、3和6 h时表达量最多。Western blot结果显示,表达的VP2、VP1和VP2-VP1蛋白与鸡抗IBDV阳性血清均具有良好的反应原性。以纯化的VP2、VP1和VP2-VP1蛋白作为包被抗原对传染性支气管炎病毒(IBV)、呼肠孤病毒(ReoV)、禽白血病病毒(ALV)和新城疫病毒(NDV)4种阳性血清检测均为阴性,表明所获得的纯化蛋白具有高度的特异性;对免疫了IBD灭活疫苗,IBD基因工程疫苗和IBD弱毒疫苗的商业鸡群进行抗体检测,结果均能显示疫苗免疫后机体抗体水平的变化趋势。本研究表明利用该原核表达系统所表达的3个蛋白均具有良好的免疫反应活性,为IBDV特异性抗体的检测和新型亚单位疫苗的研发奠定基础。     

鸡多种肿瘤病快速鉴别诊断的研究初报

本文报告了鸡三种常见肿瘤病即马立克氏病 ( MD) ,淋巴白血病 ( LL)和网状内皮增生症( RE)快速鉴别诊断的研究。目前 ,本研究已初步确定了快速鉴定诊断办法的基本程序及 PCR反应条件 ,并且检测了从南宁、桂林等地 1 2个鸡场收集的肿瘤 /可疑肿瘤组织 59份 ,其中 MD阳性率为 91 .53%( 54/59) ,RE为 1 8.64% ( 1 1 /59) ,LL为 1 .69% ( 1 /59)。本研究首次证实 RE和 LL在广西的存在 ;结果还表明 ,该 PCR系统是敏感、特异和快速的。     

鸡传染性支气管炎病毒肾致病株的致弱及免疫研究

用已鉴定的广西鸡传染性支气管炎病毒(IBV)分离株G,C,Z和Q分别通过鸡胚传代进行致弱,在一定代次时分别接种敏感鸡作毒力测定试验.然后用已致弱的毒株在实验室进行攻击保护试验,最后取已致弱而且抗原性良好的毒株在广西各地鸡场进行田间应用试验。结果表明,C株在传至40代时,G,Z和Q株分别传至20代时对鸡的毒性均已大大降低;免疫鸡用标准强毒株(M_(41))攻击,然后用病毒回收的技术来衡量其免疫力,结果各株经免疫两次后均有很好的保护率(60％～100％),均显著优于对照组(P<0.01);致弱株分别在南宁、柳州、容县、岑溪和博自5县市的11个鸡场进行田间试验,试验的鸡有30群共103761羽,试验时分别对疫苗免疫对鸡生产性能的影响、安全性和育成率进行观察和测算,结果表明,作者培育的IBV弱毒苗对鸡是安全的,使用C_(60)或C_(80)和G_(20)株先后两次免疫鸡,对IB有较好预防效果,这些弱毒株有希望成为供生产使用的疫苗。     

传染性法氏囊病病毒广西分离株血清亚型的确定

应用兔制备的抗传染性法氏囊病病毒(IBDV)高免血清,在鸡胚成纤维细胞(CEF)上对从广西发病鸡群分离的4个IBDV代表性流行毒株和2个常用疫苗株进行交叉中和试验。结果表明6个毒株被分为2个血清亚型;根据试验所得的R值,应用聚类分析法分析了各亚型毒株之间的亲缘关系,结果显示目前在广西流行的IBDV野毒株之间以及其与疫苗株间的抗原性存在一定的差异。研究结果对及时掌握广西IBDV流行毒株的抗原变异并为研制更有效的适合本地使用的IBD疫苗提供了科学依据。     

鸡传染性支气管炎病毒快速诊断方法的建立

鸡传染性支气管炎(IB)是由冠状病毒科冠状病毒属的传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触性的呼吸道疾病,不同日龄、性别、品种鸡均可易感.IB为世界动物卫生组织及我国规定的家禽B类传染病,也是至今严重危害我国养禽业的疫病之一.IBV可破坏呼吸道黏膜的完整性,促进其他条件性疾病如支原体混合感染以及大肠杆菌等继发感染而提高鸡群的死亡率.     

鸡抗热应激制剂的研制与应用(一)抗热灵Ⅰ号的应用试验

热应激是养鸡业夏秋间影响鸡生产性能的重要因素，特别是我国南方各省受害更大。热应激的危害性主要表现有：鸡的热休克造成鸡的死亡，气温在３９℃４小时以上，鸡即可能中暑死亡；４１℃３小时死亡，４３℃２小时死亡［１］；产蛋量下降，气温在２５～３０℃之间，每升高１℃，产蛋量下降１５％，蛋重减轻０３克／枚［２］。此外，鸡的薄壳蛋及破壳蛋增多等。据生产经验，同一鸡种及相似的饲养管理条件，在我国南方饲养的种鸡或蛋鸡，每羽母鸡比北方的少产蛋２０～４０枚。Ｋｒｅａｇｅｒ（１９９３）报道，在鸡舍温度２６６℃以上时…     

马立克氏病病毒体内复制动力学研究进展

马立克氏病病毒(MDV)在体内的复制情况与其毒力有密切关系.一般情况下,MDV毒株的毒力越强,其在宿主体内的病毒载量就越高.MDV在宿主体内的复制动力学涉及多方面的因素,其中主要包括有:MDV的组织嗜性及毒力、宿主的免疫情况及马立克氏病(MD)遗传抗性、MDV的基因组特点等多方面因素,这些因素都会影响到MDV在宿主体内的复制情况.本文就MDV在鸡体内各个组织器官复制动力学及其相关影响因素的最新研究进展进行综述.     

广西麻(花)鸡禽白血病净化研究初报

鉴于禽白血病(Avian leukosis, AL)流行病学调查发现广西麻(花)鸡禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)感染率较高,我们对DGGX5公司的麻鸡一个三系配套的品系开展了ALV净化的研究.初步结果显示,母系一世代公鸡和母鸡J-ALV的阳性率比零世代的下降了33.33个百分点和21....     

一起肉鸡发生葡萄球菌病的诊断

家禽中金黄色葡萄球菌的感染很常见,最常受到侵害的部位是骨骼、腱鞘、以及腿部关节[1]。在肉鸡中,也常见由该菌引起的败血症,引起较大的经济损失。2006年1月,南宁市某公司饲养的29日龄的肉鸡发生一种以拉稀、咳嗽、脚软为主要临床症状的疾病,最终死亡率为0.4%。经实验室诊断,确诊为金黄色葡萄球菌感染。现报告如下:1剖检病变送检的6羽鸡的主要剖检病变为:肝脏肿大(6/6),肝周炎(6/6);心包炎(3/6);十二指肠出血(5/6);脾脏稍肿(4/6);肾脏肿大(4/6);跗关节肿大(6/6)。2实验室诊断2.1细菌的分离培养按无菌操作要求,用接种环分别从肝脏和肿大的关节腔中采样,划线接种到血平板,置37℃培养24小时。2.2细菌形态的观察分别挑取从肝脏和关节分离到的单个菌落,涂片,革兰氏染色,油镜下观察。2.3生化鉴定分别挑选从肝脏和关节分离的细菌各一株(编号为A株和B株)纯培养后,挑取单个菌落用生理盐水稀释,用接种环接种到精氨酸水解酶、磷酸酶、果糖、半乳糖等生化管(均由杭州天和微生物试剂有限公司生产)内,37℃培养,12小时后观察结果,随后持续观察一个星期。凝固酶试验:取未稀释的兔血浆及生理盐水各一滴,分别放于...