中草药对奶牛隐性乳房炎的体外抑菌试验

为了寻求对奶牛隐性乳房炎有良好疗效的中草药,选取具有抗菌消炎作用的13种中草药,运用水煎法提取其有效成分;从兰州周边6个奶牛场采集奶样,从中分离得到4种引起乳房炎的主要致病菌;利用提取的中草药有效成分对这4种致病菌做体外抑菌试验,运用试管稀释法测定中药单味药和复方的最小抑菌浓度.结果表明:黄连、大黄、蒲公英、鱼腥草4味中药对引起奶牛隐性乳房炎的4种病原菌的抑菌效果良好;板兰根、金银花、连翘、黄柏、大青叶、紫花地丁具一定抑菌效果,而王不留行、黄芪、天花粉抑菌效果较差.同时还发现,复方中同时含有黄连、大黄、蒲公英、鱼腥草4种药物的复方抑菌效果较好.     

青海省2017—2019年州县级兽医系统实验室检测能力比对

为全面了解和提升兽医系统实验室检测能力,2017—2019年青海省动物疫病预防控制中心连续3年组织州县级兽医实验室开展检测能力比对工作。根据每年疫病的流行态势,设置PCR、ELISA以及传统类检测等比对项目。结果显示:2017—2019年实验室总体准确率分别为50.00%、56.82%、74.47%,样品总正确率分别为90.75%、93.56%、93.48%,整体呈上升趋势;各实验室PCR、ELISA、传统类检测项目的正确率差异不显著(P>0.05);州级实验室的检测正确率明显好于县级(P<0.05)。结果表明,州县级实验室检测能力逐年提升,绝大多数实验室具备PCR、ELASA、传统类检测等检测能力,但部分县级实验室的个别项目检测能力有待提高。建议进一步加大经费投入,加强基层实验室管理、业务培训等,整体提升县级实验室的检测能力。     

大通等十个地区牛皮蝇蛆病防治效果考核调查

正牛皮蝇病是由狂蝇科(Oestridae)皮蝇属(Hypoderma)的牛皮蝇蛆(H.bovis maggot)寄生于牛背部皮下组织内引起的一种慢性寄生虫病;偶尔也寄生于人、马属动物、绵羊、其它野生动物背部皮下组织内。其特征是引起患畜消瘦、发育受阻、畜产品下降、皮革质量降低,甚至引起幼年牛死亡,也是重要的人畜共患寄生虫。为准确掌握全省2015年牛皮蝇蛆病防治效果及2015年牛皮蝇蛆感染情况,本中心在大通等10个县(市)组织开展了牛皮蝇蛆     

一起兔球虫病和大肠杆菌病混合感染的诊断及大肠杆菌药敏试验分析

对乐都区某长毛兔专业合作养殖社疑似兔球虫和大肠杆菌病混合感染死亡兔,进行粪便虫卵检查和病原菌分离培养、小动物试验、16SrRNA测序等,并对分离细菌进行药敏试验分析。结果表明:造成该养殖社兔死亡的病因是由兔球虫和大肠杆菌混合感染引起;分离株细菌的16SrRNA基因序列在线Blast分析显示,其16SrRNA基因序列与GenBank上已登录(AccessionNo:NR114042、NR112558、NR024570)的大肠杆菌的相应序列具有高度同源性M99.0%;分离株细菌对细菌对丁胺卡那霉素、咲喃腔酮、庆大霉素、头抱他睫、多粘菌素B高度敏感;对氧氟沙星、新霉素、头抱哌酮、红霉素中度敏感;对青霉素、诺氟沙星、复方新诺明、卡那霉素、氨节西林、克林霉素、头抱瞠咻、竣节西林、头抱氨节、麦迪霉素、氯霉素、多西环素、四环素、苯哩西林、环丙沙星、头袍拉定、哌拉西林具有耐药性。     

牛源性无乳链球菌分离鉴定及 cfb 基因的克隆和真核表达载体的构建

为研制奶牛乳房炎无乳链球菌的基因工程疫苗,采集隐性奶牛乳房炎奶样,利用THB （ Todd-Hewitt Broth ）固体选择培养基和色素试验,并结合无乳链球菌种属特异性基因cfb,采用PCR技术从隐性乳房炎奶样中分离和鉴定无乳链球菌。根据GenBank已报道的链球菌cfb基因序列,经ORF分析和B细胞表位预测,利用Primer 5．0软件设计cfb因子富含B细胞表位区域引物,添加酶切位点和真核表达元件,以分离株无乳链球菌的基因组为模板,PCR扩增cfb基因并连接T载体克隆测序,经测序确定无误后,连接pcDNATM 3．1 V5-His A（ pcDNA-cfb）真核载体,转化DH5α感受态细胞,提取重组质粒进行酶切和测序鉴定。结果显示,从89份隐性奶牛乳房炎奶样中分离得到8株无乳链球菌,成功构建了真核表达载体（ pcDNA-cfb）。 THB和色素试验初步筛选,可以作为快速分离无乳链球菌的一种方法,利用Bcepred和Lasergene-Protean软件对分离得到的无乳链球菌cfb基因序列分析,在所克隆的cfb基因序列内有多个优势抗原表位,因此,有望作为无乳链球菌基因工程疫苗研制的抗原靶标基因序列,为进一步研究其基因工程疫苗提供基础条件。     

青海省一起羊布鲁氏菌病疫情紧急流行病学调查

2020年3月13日,青海省一养羊户发生一起人畜布鲁氏菌病疫情。为掌握疫病发生原因,调查疫病可能来源,评估可能传播风险,青海省动物疫病预防控制中心会同相关人员组成工作组,赶赴养殖现场,通过座谈、实地查看、实验室检测等方式开展了紧急流行病学调查。调查认为,养羊户引进感染羊,且引进后未隔离观察就直接混群放牧可能是导致本次疫情暴发的原因。由此,建议加大排查监测力度,及时发现并处理阳性畜;加强宣传,积极开展布鲁氏菌病防控知识培训,提升牧民规范饲养和主动防范布鲁氏菌病的意识。     

不同培养条件对绵羊卵母细胞体外成熟的影响

通过使用不同的卵母细胞采集方法、不同的培养液、培养时间和细胞因子对绵羊卵母细胞的体外成熟培养的影响进行了研究.结果表明:切卵法和抽吸法对卵母细胞成熟的影响前者优于后者,差异极显著(P<0.01);培养液中添加FSH、LH及FBS对绵羊卵母细胞的影响显著高于添加发情羊血清的且差异极显著(P<0.01);绵羊的卵母细胞培养20h的成熟率极显著低于培养22h和24h的成熟率(P<0.01),培养22h和24h的成熟率差异不显著(P>0.05),培养24h和培养26h的成熟率差异极显著(P<0.01),培养26h卵母细胞老化对随后的体外受精不利;成熟液(培养液+FBS、LH、FSH、E2)中分别加入骨形态发生蛋白15(bone morphogenetie protein,BMP15)和成纤维细胞生长因子8b(fibroblast growth factor 8b,FGF8b)2种细胞因子,成熟液中添加BMP15组与添加FGF8b组卵母细胞的成熟率差异极显著(P<0.01),成熟液中添加BMP15和对照组卵母细胞成熟率的差异极显著(P<0.01),加入FGF8b组与对照组卵母细胞成熟率差异不显著(P>0.05).利用切卵法在培养液中加入FSH、LHE2和细胞因子BMP15,培养22~24h可以大大提高绵羊卵母细胞体外培养的成熟率.     

重离子辐照对绵羊精子的蛋白质组学影响研究北大核心CSCD

本研究为了分析由重离子辐照引起的绵羊精子蛋白质组学变化,用二维凝胶电泳分离精子蛋白,凝胶用考马斯亮蓝染色。PDQuest8.0软件检测分析差异表达蛋白斑点并经高效液相色谱串联离子阱质谱鉴定。结果显示:辐照后的精子凝胶图谱上有4个蛋白质斑点表达上调,1个蛋白质斑点缺失,这5个蛋白质斑点经鉴定后,在国际生物信息学中心数据库搜索到相对应的2种蛋白质:烯醇酶和烯醇酶1,在辐照后的精子中这2种蛋白质表达上调。研究表明:重离子辐照会引起绵羊精子蛋白质组学变化,通过对差异蛋白质的研究探索重离子辐照对绵羊精子生理功能的影响,为重离子辐照绵羊育种提供理论依据。