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通过对影响AFLP反应体系主要因素的优化,建立了蜡梅的AFLP反应体系,并筛选出了适宜该体系分析的引物.结果表明,20μL蜡梅AFLP最佳酶切体系为模板600 ng DNA,3 U Pst I和3 U Mse I,在37℃下双酶切2 h;在20μL最佳连接体系中酶切产物为15μL,3 U T4连接酶,0.25μmol.L-1 Pst I接头,2.5μmol.L-1 Mse I接头,1μL 10×T4 Buffer,在22℃下连接10 h;在20μL最佳预扩反应体系中稀释10倍的连接产5μL,2.0mmol.L-1 Mg2+,2 U Taq酶,300μmol.L-1dNTP,0.5μmol.L-1 Pst I和Mse I引物(P+AGA/M+ATC);在20μL最佳选择性扩增反应体系中5μL稀释20倍的预扩增产物,2.0 mmol.L-1的Mg2+,2 U Taq酶,300μmol.L-1 dNTP,0.5μmol.L-1 Pst I和Mse I引物(P+AGA/M+ATC).最后,利用上面的体系筛选出了96对适宜于蜡梅AFLP分析的引物. 相似文献
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鸡马立克氏病(MD)是由疱疹病毒引起的一种高度接触传染性淋巴组织增生性肿瘤疾病,是危害养鸡业重要传染病之一。我市自从推广应用火鸡疱疹病毒(HVT)疫苗预防MD以来,曾收到很好的效果。然而,近年来随着我市蛋鸡业的发展,鸡群数量不断增加,用HVT冻干苗预防MD,常有免疫失败发生,给蛋鸡养殖户造成较大的经济损失。如何防制蛋鸡MD,成为养鸡户与孵化场急需解决的问题。笔者根据近年我市MD流行情况,在生产中大力推广应用进口液氮CVI988MD疫苗,取得显著效果,现报告如下。1MD流行情况及危害11不管是用… 相似文献
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1996年春天,我市某肉鸡场,发生以眼睑肿胀蓄脓为主的疾病,经诊断为鸡大肠杆菌性眼球炎。l发病情况鸡场从外地引进爱拔益加雏鸡2000只,为了避免应激反应,未清扫鸡舍,舍内粪便堆积很厚,湿度很大,氨气刺鼻,空气极度污染。鸡群从30日龄开始发病,日渐增多,至45日龄来我站求诊时,发病300多只,死亡70余只,曾用青霉素、链霉素、敌菌灵治疗,未见效果。2临床症状病初眼羞明流泪,结膜潮红,随之眼睑肿胀凸起,粘合在一起,如金鱼眼状。打开眼睑,见有结膜炎,眼前房有粘液性脓性或干酪样分泌物。轻者角膜混浊,有灰白色云经,重者角膜… 相似文献
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