嗜神经型新城疫病毒的分离与鉴定

从一群自然发病疑似新城疫的病鸡脑中分离出一株野毒株，经过鸡胚传代、ＨＡ测定、电镜观察以及回归试验等确认是新城疫病毒。该分离毒株毒力极强，以１００倍稀释后，接种ＳＰＦ鸡胚，２４－６０小时内鸡胚全部死亡，接种易感雏鸡后，潜伏期短、发病早，呈现典型的神经症状。     

单抗捕捉ELISA检测AEV抗体方法的研究

本研究初步建立了检测ＡＥＶ抗体的单抗捕捉ＥＬＩＳＡ　方法。ＡＥＶ腹水单抗（腹水效价为１　∶１×１０６）最佳稀释度为１∶２００，ＡＥＶ抗原工作浓度为１６．０８　μｇ／ｍＬ，血清稀释度为１∶１　００，　兔抗鸡酶标抗体工作浓度为１∶５００。经阻断试验、交叉试验、重复试验，以及与进口试剂　盒　进行平行检测４０份血清，总符合率为９２．５％，表明该方法特异性强、重复性好、敏感性高，　是一种有应用前景的方法。     

山东省禽脑脊髓炎血清学调查

用自制禽脑脊髓炎（ＡＥ）琼扩抗原检测鸡血清中ＡＥ病毒抗体，对山东省九个地区十四个鸡群进行调查，结果表明：山东省存在禽脑脊髓炎病毒的感染，不同地区有差异，阳性率０－８５％，平均感染率２２％。调查中还发现，产蛋种鸡感染ＡＥＶ后，除在两周内表现产蛋下降外，其他无任何症状，仅发现一例父母代种鸡孵出的雏鸡连续发生禽脑脊髓炎     

不同病毒在SPF鸡胚与普通鸡胚繁殖性能的比较

利用HI和AGP方法检测普通种蛋中ND和IBD的卵黄抗体水平，利用HA和EID50检测方法比较多种病毒(如NDV、IBV、IBDV及AEV)在SPF鸡胚与普通鸡胚上繁殖性能的差异。研究结果表明：普通种蛋中ND及IBD的卵黄抗体水平普遍较高，在SPF鸡胚上新城疫La Sota病毒繁殖量是普通鸡胚的5～20倍，尿囊液血凝效价平均高2.0～2.5滴度。MA5毒株在SPF胚病毒液EID50为普通鸡胚的10倍以上，且每次检测的结果比较接近。IBDV、AEV等病毒在普通鸡胚上几乎不能增殖。     

SPF鸡管理中的核心消霉灭菌技术(上)

SPF(无特定病原)鸡和鸡胚是进行生命科学的标准实验动物;是进行病毒学研究和多种人、禽生物制品生产和鉴定的标准原材料;是禽病研究的"精密天平",其质量控制的好坏直接关系到上述多方面的研究成果、生产成品质量的可靠性、安全性以及人民群众生活的健康.     

SPF鸡饲料高压蒸汽灭菌条件研究

本试验在121℃条件下,采用不同灭菌时间对不同包装规格的SPF鸡饲料进行高压蒸汽灭菌处理,通过细菌培养和灭菌指示剂对不同处理后饲料的灭菌效果进行检查,以确定饲料最短有效灭菌时间。结果表明,饲料包装尺寸影响高压蒸汽灭菌效果,在包装尺寸合理的前提下,经121℃、20min高压蒸汽处理过的饲料,在30d的保存期内未检测到细菌,可以满足SPF鸡饲料的灭菌要求,生物灭菌指示剂试验得出同样结果。     

禽流感病毒H9亚型血凝素特异性单克隆抗体的制备和鉴定

以常规方法纯化H9亚型禽流感病毒，制备了两株分泌抗禽流感病毒H9亚型血凝素特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞11A5和1182，其上清ELISA效价均为1：10^4，腹水效价为1：10^7和1：10^6，HI效价上清分别为8、7log2，腹水效价均为15log2。采用HI方法证明其对禽流感病毒H9亚型的特异性，通过Western blot方法证明两株单抗都针对H9亚型禽流感病毒HA1蛋白。     

间接免疫荧光检测禽脑脊髓炎病毒抗体

ＡＥＶＶａｎＲｏｅｋｅｌ鸡胚适应株在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚神经胶质细胞（ＣＥＢ）传代,用盲传至第６代的ＣＥＦ、ＣＥＢ制成荧光标本。建立了ＡＥＶ荧光抗体检测方法,确定了待检血清稀释度１∶１０和荧光抗体ＦＩＴＣ羊抗鸡ＩｇＧ的稀释度１∶１０的工作浓度。通过对ＮＤＶ、ＭＤＶ、ＩＢＤＶ、ＡＩＶ、Ｒｅｏ等标准阳性血清的交叉试验,证实该法特异性强,且简单、方便、经济,适合于鸡群ＡＥＶ抗体的检测。     

传染性支气管炎病毒的分离提纯及蛋白电泳分析

通过ＳＰＦ鸡胚接种分别对传染性支气管炎病毒的２ 个标准毒株Ｍ４１、ＩＢＶ－ Ｔ 株，４ 株山东分离株及１ 株北京分离株进行扩增繁殖；利用差速离心法、蔗糖不连续密度梯度离心法进行提纯；用ＳＤＳ－ 聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行蛋白分析。结果表明：各毒株都含有四种结构蛋白，且各毒株结构蛋白分子量基本相似，其中仅Ｍ 和Ｓ蛋白略有区别     

鸡传染性支气管炎病毒呼吸型和肾型毒株的血清交叉中和试验

利用SPF鸡制备了肾型传染性支气管炎山东分离株(KIBV-SD)和呼吸型传染性支气管炎M41株的单因子血清,进行了肾型传支(KIBV-SD)与呼吸型传支(M41)血清交叉中和试验,计算肾型和呼吸型传支病毒抗原性的相关系数(R)。结果表明:KIB-SD单因子血清与其自身病毒进行中和试验,测得血清中和抗体几何平均效价值为23.56;KIB-SD单因子血清与M41V进行中和试验,测得血清中和抗体几何平均效价值为3.56;M41单因子血清与其自身病毒进行中和试验,测得血清中和抗体几何平均效价值为24.51;M41单因子血清与KIBV-SD进行中和试验,测得血清中和抗体几何平均效价值为6.07。经免疫学方法计算,2个毒株间抗原性相关系数R=19.34%(<25%),说明KIBV-SD和M41分别属于不同的血清型,二者之间的抗原性交叉较低。