CSFV囊膜蛋白E2单克隆抗体识别表(拟)位基序的差异性分析

CSFV囊膜糖蛋白E2是诱导中和抗体及激发保护性免疫应答的主要抗原蛋白.本研究应用抗CSFV(Alfort毒株)E2蛋白的单克隆抗体c2410、WH303及M1669,筛选噬菌体展示的12肽随机肽库,进行表位分析.结果发现:c2410、WH303针对同一线性表位,精确定位于E2蛋白的832～837位氨基酸SPTTLR,是CSFV特异性表位.同时发现WH303识别的2个主要拟位基序:(W)NKPxT、AxWPTA,M1669识别的3个主要拟位基序:DxMRLD、(SL)MPPF、MLLHxxPxL,但在E2蛋白中均未查找到与之相同(似)序列.应用ELISA、竞争性ELISA、免疫印迹分析不同表(拟)位对单克隆抗体的免疫反应性差异,结果发现:(1)c2410对WH303的3个噬菌体拟位(WNKPxT,AxWPxATA,SPSxLR)在ELISA、免疫印迹检测中均为阴性;(2)SPTxLR噬菌体拟位能与c2410、WH303发生特异性结合,且此结合能被病毒抗原阻断;(3)M1669的3个噬菌体拟位(DxMRLD,(SL)MPPF、MLLHxxPxL)在ELISA、免疫印迹中能与M1669发生特异性结合,但此结合不能被病毒抗原阻断.     

猪链球菌PCR检测技术研究进展

猪链球菌是猪的一种重要病原菌,并且也会引起人的链球菌病。有35个荚膜血清型(1/21、~34),通常自发病或死亡猪体分离获得1,2,7,9型和14型菌株,其中2型是毒力最强的血清型。根据已知猪链球菌16 SrRNA及溶血素(sly)、谷氨酸脱氢酶(gdh)、荚膜多糖(cps)、胞壁蛋白或溶菌酶释放相关蛋白(mrp)、胞外因子(epf)编码基因序列设计特异性引物,建立猪链球菌群和1(14),2(1/2),7型和9型特异性PCR或多重PCR,建立2型致病性菌株和1型高致病性菌株毒力鉴定PCR或多重PCR,用于检测和鉴别临床病料和细菌分离物中的猪链球菌,具有高敏感性和高特异性,与其他致病菌及其他血清的猪链球菌型无交叉反应,为疫病诊断及流行病学的研究提供了快速、简便和有用的工具。     

猪瘟病毒E2糖蛋白A1亚区抗原性分析

采用Bac—to—Bac杆状病毒表达系统，对猪瘟病毒A抗原区内的2744-2947nt基因片段(EC)进行了克隆、表达，并分析了表达产物的抗原性。研究发现，EC表达产物能与抗猪瘟病毒Alfort毒株E2蛋白的中和性单克隆抗体c2410、a18发生特异性结合，且用其免疫动物后能诱导机体产生中和抗体。结果表明，A1抗原亚区位于E2蛋白791～858位氨基酸区域。     

中华鳖混养新模式及其技术探讨

鱼鳖混养能保持野生鳖的风味，符合消费者的需求，目前许多地方地增混养的售价远远高于温室养殖鳖的售价，陕西省大荔县东临黄河，南依渭水，从1993年就开始养殖中华鳖，不断改进养殖模式，经过几年的摸索，已形成了成熟的鱼鳖混养新模式，这种养殖循环模式在不影响鱼产量的情况下，产值比以前提高了120％，比没采用混养模式的池塘纯收益超出4000余元／亩，而且充份利用了池塘资源，在原有池塘基础上稍加改进即可进行生产，节省了大量的建地投资。现将混养新模式介绍如下：一、良性循环模式链一品出售卅留种J二、混养（－）池塘改造①池塘…     

湘潭市郊菜园土及部分蔬菜重金属和氟污染状况的研究

湘潭市菜园土全部受到Cd的污染,蔬莲65％超过食品卫生标准,所有菜园土均有Pb污染,其中轻度污染4个区,中度污染2个区,以0.3ppm为标准,则蔬菜含Pb超标率达100％,如以0.6ppm为摄入限量浓度,蔬菜68％超限、Cu,Zn在土壤中均有积累,但末达到引起蔬菜污染的程度,土壤采用湘江流域背景值加2倍标准差作为污染起始值进行评终,3类菜园士对几种重金属元素的积累总趋势为:煤灰菜园土>红菜园土>潮菜园土,污染物质对土壤重金属积累的影响是:煤灰垃圾>污水灌溉>气污,但F的污染则与上相反、白菜和包菜对Cu,Zn,Cd,Pb的蓄积能力顺序相同,均为Cd>Zn>Cu>Pb,对每种元素而言则白菜的蓄积能力均大于包菜。     

不同秸秆还土方式对旱地土壤培肥和玉米产量的影响

采用田间小区试验研究了秸秆还土方式对旱地土壤培肥和玉米产量的影响。结果表明,秸秆翻压与覆盖均有明显培肥土壤,提高玉米产量的作用,但两种还土方式之间的差异不明显。     

超细品系羊非发情季节同期发情实用技术研究--周岁母羊和成年母羊同期发情效果对比分析

对中国美利奴羊（新疆军垦型）超细品系周岁母羊和成年母羊同期发情效果作了对比分析，证明经产母羊的效果明显好于初产母羊，但是返情经产母羊比初产母羊多。     

鼠痘病毒的分离鉴定及检测方法的研究

本实验采用自然感染鼠痘材料,以细胞培养、动物接种分离出一株病毒91-KMPV。通过人工发病、临床病理观察、病毒的电镜观察、多种细胞培养、细胞传代和多次复归本动物、毒力毒价、稳定性试验以及血清学和病毒理化特性试验等证明所分离病毒是痘病毒科正痘病毒属小鼠传染性脱脚病病毒。应用分离到病毒制备抗原及标准血清,建立了HA和HI等检测方法。为该病的监测净化提供一项简便准确的检测方法。     

云南省种公猪精液中乙型脑炎病毒的监测

应用RT-PCR技术开展云南省种公猪精液中乙型脑炎病毒(JEV)感染监测,进而对阳性样品病毒基因扩增产物进行克隆、测序、比对及系统发育分析。从云南省16个地州797份猪精液中检出JEV阳性样品7份,阳性率0.88%。阳性精液样品中的JEV与基因Ⅰ型毒株PrM基因核苷酸序列同源性为97.5%～98.8%,与其他基因型毒株的同源性介于76.9%～89.8%之间,与疫苗毒株(基因Ⅲ型毒株,S19980008)的同源性为89.1%～89.8%。云南省种公猪精液中JEV属于基因Ⅰ型毒株,与人、猪、蚊虫基因Ⅰ型分离毒株遗传关系密切。     

云南省新城疫病毒分离株F基因和HN基因克隆与序列分析

为了确定云南NDV毒株F基因和HN基因的结构特征及其与已知毒株的遗传相关性,应用RT-PCR技术对云南省部分地州养殖场采集的鸡或鸭喉气管组织样品4 700份进行新城疫病毒(NDV)检测,共检出阳性样品25份。对其中8份阳性样品进行NDV F基因与HN基因扩增后,克隆至pMD18-T载体测序,并与国内外代表性毒株和当前流行疫苗毒株进行比对及系统发育分析。结果表明,云南省NDV毒株F基因与国内代表性毒株核苷酸序列同源性介于93.0%～99.2%之间,氨基酸同源性介于90.7%～99.1%之间;与疫苗毒株的核苷酸同源性在83.3%～86.9%之间,氨基酸同源性在86.0%～88.7%之间。HN基因与国内代表性毒株核苷酸同源性介于96.4%～99.1%之间,氨基酸同源性介于95.6%～99.3%之间;而与当前疫苗毒株相比,同源性较低,核苷酸同源性介于81.3%～82.0%之间,氨基酸同源性介于87.6%～88.8%之间。系统进化分析表明,云南NDV F基因有2株属于基因Ⅱ型,其余6株均属于基因Ⅶe型。云南NDV HN基因则均属于基因Ⅶ型。