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一步法实时定量RT-PCR检测小反刍兽疫病毒方法的建立 总被引:1,自引:3,他引:1
建立了检测小反刍兽疫病毒的快速、特异的基于Taqman的一步法实时定量RT-PCR方法。通过对GenBank已公布的小反刍兽疫病毒N基因序列进行序列比较分析,设计了一对特异性引物和一条Taqman探针。利用这对引物和探针对来自不同疫源地的小反刍兽疫病毒RNA样本进行检测,都获得了特异性扩增,但是,不与牛瘟病毒、海豚麻疹病毒等其他种的麻疹病毒属病毒发生交叉反应。本方法具有高度灵敏性,最低可检测到810拷贝的RNA模板。在模板浓度为8.1×102到8.1×108拷贝范围内,都呈现良好的线性关系,而且无论是组内和或组间重复的变异系数都很低。 相似文献
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为快速特异检测羊痘病毒属病毒(CaPVs),比较了牛结节性皮肤病病毒(LSDV)、山羊痘病毒(GTPV)和绵羊痘病毒(SSPV)的全基因组序列,选择保守区域设计特异性引物和探针,建立了一种CaPVs通用的Cycleave PCR检测方法。特异性结果显示,该方法在40 min内即可检出CaPVs,与口蹄疫病毒、羊口疮病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、蓝舌病病毒均无交叉反应;灵敏性结果显示,最低检出限为4.98 copies/μL;重复性结果显示,批内和批间重复变异系数均小于2%。对131份临床样本进行检测发现,该方法与世界动物卫生组织(WOAH)推荐的常规PCR方法相比,敏感性为100%,特异性为91.55%,总符合率为95.42%。以上结果表明,本研究建立的Cycleave PCR检测方法特异、敏感、重复性好,且操作简便,适用于CaPVs的高通量、快速检测。 相似文献
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入世后我国水产品出口如何突破绿色壁垒 总被引:1,自引:0,他引:1
加入世贸组织后,各种关税和非关税壁垒的逐步削减一度让我国的水产品生产、加工企业非常乐观。然而,绿色壁垒的出现和不断扩展,却可能导致我国水产品的出口受到更大的限制,去年欧盟全面禁止我国水产品进 相似文献
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焦河蓝蛤是养殖对虾的优质鲜活饵料,随着水产养殖业的发展,焦河蓝蛤已被大量采捕,资源下降。我们对渤海湾南岸焦河蓝蛤的生长、繁殖与环境的关系进行了较为系统的调查和观察研究,得到了较完整的资料,为保护和合理地利用焦河蓝蛤资源,提供了有用的数据。一、材料和方法焦河蓝蛤标本采自渤海湾南岸大口河与沾利河的滩面上,每月采集3次,繁殖盛期每月采集5次~6次,每次均在同一取样区采捕。采集标本带回岸上后随机取样50个,测量壳长、壳高、壳厚,称量体重,同时鉴别年龄,再逐个剥开将肉和贝壳放入烘干箱内,在70℃条件下恒温烘干24小… 相似文献
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随着人们物质生活的丰富和生活质量的提高,生活方式从温饱型向享受型发展,人们更要求精神生活充裕,于是当今世界各国,不论发达国家与发展中国家,都在兴起一种观赏鱼热。一方面观赏鱼休闲饲养迅速发展,观赏鱼作为一种水养宠物,使各国人民业余生活充满了美的享受。另一方面一些国家,特别是发展中国家,观赏鱼生产养殖规模越来越大,利用各自的优势发展观赏鱼养殖,互通有无,开展贸易,使观赏鱼产业成为渔业经济发展的一个新的增长点。我国目前出口观赏鱼超亿尾,占世界总量的1/10,观赏鱼发展势头,特别是出口外汇势头已形成渔业… 相似文献
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通过软件DNAStar分析,设计合成心水病病原体抗原性、保守性比较高的一段基因,长度为564bp,将它插入pUC57载体,再转入pET-32a质粒中进行原核表达并纯化表达产物。结果表明,合成的基因在大肠杆菌中得到高效表达并能简易地提纯,纯化的表达产物有望用于心水病免疫学检测;此合成外来基因还可以作为心水病病原PCR检测的阳性对照。这些工作为我国建立心水病防控技术储备奠定了一些基础,也为防控高度危险性外来传染病提供一种安全和可行的研究新思路。 相似文献