花生种子发芽的细胞生理与渗透调节的研究

系统研究了花生种子发芽过程中细胞形态结构变化规律，细胞中贮藏大分子蛋白质、脂肪和淀粉的生化和细胞化学变化，ＡＴＰａｓｅ、Ｌｉｐａｓｅ和淀粉酶活性的生理或细胞化学变化，以及与种子萌发生长的形态建成的对应关系，不同活力、饱满度种子和春秋花生种子这些细胞形态和生理特征及其与种子萌发生长的关系。首次采用预播种渗透调节技术处理花生种子，提高了花生种子的活力，并研究其促进种子活力的生理生化机制。     

不同贮藏条件对药剂处理贮藏技术效果的影响

研究了不同贮藏条件对药剂处理保持种子活力效果的影响。药剂处理种子在室温、高温或高湿条件贮藏，皆可有效保持其活力，且随着贮藏时间的延长，药剂处理与对照的差异愈明显。高温、高湿条件贮藏，各种药剂处理种子和对照处理的种子的活力均下降快，其中温度对不同处理种子的活力影响较大，不同药剂以9013保持种子活力效果最好。     

花生果种皮特异表达基因候选片段的分离

应用改良的琼脂糖凝胶电泳展示DDRT-PCR产物的方法分离花生果种皮特异表达基因,共分离出24条差异表达片段.经测序后排除重复,最终得到8条差异片段.其中1条为花生上已知基因片段,余下7条均为花生上尚未报道过的基因.此7个片段序列已登录Genbank,其登录号分别为DQ450065、DQ450066、DQ450067、DQ450068、DQ450069、DQ450070、DQ450071.同时本研究还对应用琼脂糖电泳分离DD-PCR产物的方法进行了探讨.     

钙、钙调蛋白与植物的有性生殖

钙、钙调蛋白作为信号转导因子，在植物生长发育过程中起着十分重要的作用，在植物有性生殖过程中，钙，钙调蛋白的分布也发生一系列的变化，综述了植物有性生殖过程中的动态，并介绍了一些广泛运用于钙，钙调蛋白研究的方法。     

花生品种“闽花6号”的品种特征与推广利用

"闽花6号"花生新品种由福建农林大学育成,2006年初通过福建省农作物品种审定委员会审定;2009年通过农业部花生品种鉴定。根据2003～2010年闽花6号区试、试种及示范推广中的表现,该品种综合性状较突出,高产稳产,适应性较广,较抗黄曲霉菌,蛋白质含量高,果仁等外观品质好,口感好,适合加工利用。本文介绍了闽花6号的品种特征和推广利用价值。     

花生AhBW3基因上游启动子克隆及其功能鉴定

含有核苷酸结合位点(nucleotide-binding site,NBS)和富亮氨酸重复(leucine-rich repeat,LRR)结构域的NBS-LRR类抗性基因在植物抗病防御反应中起着重要作用,启动子是调控基因表达的重要顺式元件。为研究花生(Arachis hypogaea)青枯病候选基因3(bacterial wilt candidate resistance gene 3 of Arachis hypogaea,AhBW3)表达调控机制,本研究前期克隆获得了1个青枯病抗性相关的NBS-LRR类基因,发现含有TIR结构域的全长序列(AhBW3,GenBank No.HQ637177.1)和不带TIR结构域序列(AhqBW3)的转基因烟草(Nicotiana tabacum),对青枯病的抗性响应存在差异。为研究AhBW3表达调控花生对青枯菌的响应机制,本研究利用电子克隆技术,从抗青枯病花生品种粤油92基因组DNA中克隆AhBW3基因上游1 978 bp序列,命名为pAhBW3。通过生物信息学分析发现,AhBW3含有多个TATA-box和CAAT-box等真核生物启动子核心元件,还包括根特异表达元件、光调控元件、抗逆境响应等元件。通过构建GUS融合表达载体并遗传转化拟南芥(Arabidopsis thaliana),转基因拟南芥的GUS组织化学活性表达结果显示,GUS在拟南芥根部表达量最高,莲座叶的表达量亦高,在茎和花中表达量较弱,说明pAhBW3是根和叶丰富表达的启动子。通过qRT-PCR分析,显示pAhBW3调控的GUS基因能响应外源激素、干旱、高盐的胁迫,表现不同程度的上调应答。本研究为pAhBW3启动子的利用和AhBW3基因在花生的抗逆反应机制的进一步研究提供了科学依据。     

花生抗黄曲霉的植物双价表达载体的构建

通过常规育种培育的抗黄曲霉品种皆表现抗性不稳定,鉴此开展通过基因工程手段以培育高抗以及无筛选标记的转基因花生品种。几丁质酶基因CHI和葡聚糖酶基因GLU皆为广谱性的抗病基因且具有协同增效作用。分别以pSC1300-8-CHI和pSC1300-13-GLU载体为基础,通过PCR技术在CHI基因的特异启动子8#前端和T-nos末端分别加入NcoⅠ酶切位点和AflⅡ酶切位点,在GLU基因的特异启动子13#前端和T-nos末端分别加入ApaⅠ酶切位点和SpeⅠ酶切位点,通过酶切、连接将上述2个基因连接在抗生素自我删除载体pLoxp上,获得了具有抗生素自我删除选择标记的双价果种皮特异表达载体pLoxp-8-CHI-13-GLU。经过限制性内切酶鉴定,该植物表达载体构建成功。     

抑制水稻隐花色素基因OsCRY1a表达对水稻农艺性状的影响

 利用已公布的OsCRY1a基因的序列设计引物,扩增部分基因片段,构建RNAi植物表达载体并转化水稻,导致该基因表达水平下降和功能缺失。根据转基因植株重要农艺性状的表现,分析该基因的功能。结果表明,抑制OsCRY1a基因的表达,水稻开花期推迟16 d,株高和粒长明显增加,而其他重要农艺性状如剑叶长、宽和穗长等无明显变化。     

花生未成熟子叶丛生芽培养

用果针入土后４５天左右的花生未成熟子叶为外植体，在含高浓度６－苄基腺嘌呤（ＢＡ）的培养基中，置于约１８００ｌｕｘ光照和２６±１℃条件下，培养２１～２８天，能有效地诱导产生幼芽。其中５号培养基（ＭＳ基本培养基＋ＢＡ２０ｍｇ／１＋ＡＤ１００ｍｇ／ｌ＋蔗糖３％＋琼脂０．８５％），芽诱导率达９２．５％。截取诱导苗带叶腋茎段转接在８号（ＭＳ＋ＢＡ４０ｍｇ／ｌ＋ＹＥ０．０１％）、９号（ＭＳ＋ＢＡ３０ｍｇ／ｌ＋ＹＥ０．０１％＋ＡＤ５０ｍｇ／ｌ）两种培养基中，置于约１８００ｌｕｘ光照和２３～２８℃条件下，培养２１天开始出现丛生芽，４２天后（８）号和（９）号两种培养基均有９５％以上的外植体分化出丛生芽，继而长成无根小苗。平均每个外植体分化出１５个以上小芽，多的达５０个以上。