蝴蝶兰(Phalaenopsis amabilis)miRNA荧光定量体系的优化

实时荧光定量PCR是目前验证基因表达量的首选方法之一,现也广泛应用于miRNA的表达量研究中,但在蝴蝶兰中尚未见报道。在实时荧光定量PCR检测miRNA体系中,cDNA模板浓度以及miRNA扩增引物长短和二级结构造成的退火温度的差异会直接影响PCR扩增效率,从而降低实验结果的可信度。针对该问题,本研究首次以蝴蝶兰miR858在花萼色斑与非色斑的差异表达为实例,通过对cDNA模板浓度以及退火温度的筛选,成功地优化了蝴蝶兰miRNA荧光定量体系。结果表明:蝴蝶兰miRNA858在退火温度65℃,与2μg RNA对应的模板cDNA进行10倍稀释后扩增结果最优。本研究为蝴蝶兰miRNA荧光定量PCR标准体系的构建提供了实验依据。     

蓝鸟睡莲切花瓶插过程中的生理及观赏性状变化

[目的]观测蓝鸟睡莲(Nymphaea Blue Bird)切花瓶插过程中生理及观赏性状的变化情况,为提高其瓶插寿命提供参考依据.[方法]在蓝鸟睡莲切花瓶插后5d内,每天定时测定其花枝失水量、吸水量、水分平衡值及总糖、丙二醛(MDA)、脯氨酸(Pro)含量和瓶插液菌落数量等7项生理指标,同时观察其瓶插期间观赏性的变化规律.[结果]在蓝鸟睡莲切花瓶插过程中,其花枝的失水量和吸水量呈先下降后上升的变化趋势,均在瓶插后第3d出现最小值(分别为10.87和10.93 g);水分平衡值和总糖含量的变化总体上呈下降趋势,其中瓶插后第5 d的水分平衡值(-1.33 g)最低,且显著低于瓶插后前4 d(P<0.05);MDA含量的最大值(3.91 mmol/gFW)出现在瓶插后第2 d;Pro含量的最小值(0.68 mg/mL)出现在瓶插后第3 d;随瓶插时间的延长,蓝鸟睡莲切花的观赏品质逐渐下降,其切花瓶插液的菌落数量不断增多,且从瓶插第3d后开始暴发性增长.相关性分析结果表明,蓝鸟睡莲切花瓶插液的菌落数量与花枝的水分平衡值呈极显著负相关(P<0.01).[结论]蓝鸟睡莲切花吸水能力下降、总糖大量消耗、细胞膜透性及瓶插液中微生物数量增加会导致其瓶插寿命变短,在切花离体后立即采取减少水分蒸发、增大对水分吸收、提供外源营养物质、改善细胞透性及降低瓶插液中微生物含量等综合措施,可延长其寿命和提高观赏价值.