甘加型藏羊发情周期下丘脑-垂体-卵巢轴中ERβ mRNA及其蛋白的表达

为阐明甘加型藏羊(Ovis arise)发情周期下丘脑-垂体-卵巢(hypothalamic-pituitary-ovarian axis, HPO)轴中雌激素受体β(estrogen receptor β,ERβ)mRNA和蛋白的表达及分布,本试验选取健康且在发情周期内的甘加型藏羊32只,运用qRT-PCR、Western blot 技术和免疫组织化学染色法检测甘加型藏羊发情周期ERβ mRNA及蛋白在HPO轴中的表达和分布差异。结果显示,甘加型藏羊整个发情周期(发情前期、发情期、发情后期及间情期)ERβ mRNA及其蛋白在HPO轴中均有表达和分布。下丘脑中ERβ mRNA及其蛋白在下丘脑中发情前期表达最多,显著高于其他3个时期(P<0.05);垂体中ERβ mRNA及蛋白均在发情前期表达最高,与其他3个时期差异显著(P<0.05);在卵巢中间情期表达最高,显著高于其他3个时期(P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,ERβ阳性表达主要分布在下丘脑大神经元胞体和轴突中;在垂体中多分布在远侧部及中间部嗜酸性细胞胞浆中,胞核中分布较少;在卵巢中,生长卵泡颗粒细胞胞浆和胞核、卵泡内膜细胞及黄体细胞胞浆中均有分布。ERβ mRNA及其蛋白在甘加型藏羊发情周期HPO轴的差异性表达表明雌激素受体β参与调节甘加型藏羊的生殖生理活动。     

用辣根过氧化物酶标记法对鸡盲肠传入神经元分布的研究

用辣根过氧化物酶逆行法研究鸡盲肠感觉神经元的定位。结果表明，被标记的支配盲肠的初级传入神经元位于Ｔ２－ＬＳ１和ＬＳ８－ＬＳ１２脊神经节，峰值位于Ｔ５，Ｔ６，ＬＳ９和ＬＳ１０脊神经节；在颈静脉神经节，结状神经节和脊髓内未见到标记细胞。     

鸡胚发育过程中垂体促乳素的表达及其细胞的发育

利用免疫荧光标记方法研究了鸡胚发育过程中垂体促乳素(PRL)细胞的发生。结果表明，在鸡胚发育的第14.5天可观察到有少量PRL免疫荧光阳性细胞散在分布于腺垂体前叶。随着胚龄的增加，垂体PRL细胞的体积逐渐增大。细胞直径从第14.5天的6.83μm增加到第20.5天的11.24μm，胞核直径从4.27μm增加到5.99μm。PRL细胞占腺垂体细胞总数的百分比在胚胎发育的第14.5天为0.86％，第20.5天增加到18.85％，并且分布于整个腺垂体前叶。细胞多呈索状排列或团状分布。研究结果表明。鸡胚垂体催乳素细胞的增殖、分化和对PRL的分泌功能主要发生和建立于胚胎发育后期。     

鸡胚胎腺垂体促甲状腺激素细胞的发生及其变化

应用免疫组织化学方法,对第3.5～20.5 d鸡胚腺垂体促甲状腺激素亚单位(TSH撸┫赴姆⑸⑹亢托翁植急浠媛山辛搜芯俊=峁允荆杭ε叻⒂牡?0.5 d,有少量TSH呦赴植加谙俅固迩耙叮赴派常伲舜螅患ε叻⒂牡?4.5 d以后,TSH呦赴灾黾樱≒ < 0.05),细胞体积增大,胞浆增多,细胞着色浓,分布于腺垂体前叶边缘区,少量分布于后叶背侧。研究结果证明,鸡胚腺垂体TSH呦赴⑸谂咛シ⒂闹衅冢幌赴脑鲋撤只谭⑸诩ε叻⒂闹泻笃冢籘SH的合成和分泌功能在胚胎发育的后期最旺盛。TSH呦赴植加谙俅固迩耙逗秃笠侗巢唷?     

特定饲养制度下山羊瘤胃内温度、pH、氨氮和蛋白质含量的昼夜动态变化

应用装有瘤胃瘘管的两头去势山羊,在特定饲养制度下实验观察了瘤胃内温度,pH、以及氯氮和蛋白质含量的昼夜动态变化。实验结果表明,瘤胃内温度在40℃左右波动,多数情况下在40℃以上,在20点到22点期间温度最高.瘤胃液pH值在7左右波动而略偏酸性,以14点和24点的酸度最高。瘤胃液中氨氮含量变动范围较大,介于20—50mg/100ml之间,以14点和24点的含量最高。瘤胃液中蛋白质含量很低,每毫升中不超过1毫克,以14点和24点的含量最低。在22点到24点期间,瘤胃内温度最高,pH值最低,在24点,瘤胃液中氨氮含量最高,而蛋白质含量最低。在昼夜间,氨氮含量与蛋白质含量之间存在相反关系的变动。     

银杏叶提取物对肉仔鸡脾脏淋巴细胞增殖及IL-2分泌影响的血清药理学研究

本试验旨在采用血清药理学方法研究银杏叶提取物(EGB)对肉仔鸡脾脏淋巴细胞增殖及分泌白介素-2(IL-2)的影响。试验采用基础日粮(对照)和基础日粮中分别添加0.009%金霉素及0.15%、0.20%、0.25%EGB的4种日粮饲喂肉仔鸡。21、42日龄时,采血并制备对照组、金霉素组和EGB含药血清,然后分别加入到体外培养的由伴刀豆球蛋白A(ConA)诱导的肉仔鸡脾脏淋巴细胞中,再分别用MTT法、ELISA法测定淋巴细胞增殖的变化和IL-2的分泌量。结果表明:EGB含药血清能显著促进由ConA诱导的肉仔鸡脾脏淋巴细胞增殖和IL-2分泌(P<0.05),而且EGB含药血清的作用效果好于金霉素组含药血清,表明EGB含药血清可促进由ConA诱导的肉仔鸡脾脏淋巴细胞增殖和分泌IL-2。     

栀子、龙胆、茵陈水煎剂对獭兔胆汁分泌和胆囊平滑肌运动调节研究

为了研究栀子、龙胆、茵陈水煎剂对獭兔胆汁分泌和离体胆囊平滑肌肌条运动的影响，通过对獭兔实施胆管插管术，建立胆汁引流模型，应用 BL-420E 生物机能实验系统观察记录上述中药对胆汁分泌的影响；并取獭兔胆囊平滑肌，应用 HW-400S 恒温平滑肌槽和 BL-420E 生物机能实验系统，观察记录上述中药对胆囊平滑肌运动的影响。结果显示，栀子水煎剂可显著增加胆汁的分泌（P ＜0．05）和胆囊平滑肌收缩张力（P ＜0．05）；龙胆和茵陈水煎剂可显著增加胆汁的分泌（P ＜0．05），但对胆囊平滑肌收缩张力作用不显著（P ＞0．05）。说明栀子、龙胆、茵陈水煎剂均可促进獭兔胆汁分泌，且栀子可提高胆囊平滑肌收缩张力，但龙胆、茵陈水煎剂对胆囊平滑肌收缩张力影响不显著。     

甘加藏羊发情周期下丘脑-垂体-卵巢轴KISS-1/GPR54的表达与分布

为了研究高原甘加藏羊(Ovis aries)发情周期下丘脑-垂体-卵巢轴(hypothalamic-pituitary-ovary axis,HPOA)中肿瘤转移抑制基因(kisspeptins,KISS-1)/G蛋白偶联受体54(G protein-coupled receptors 54,GPR54)的表达及其对藏羊季节性发情周期的调控作用,本实验选取处于发情周期的甘加藏羊32只,应用qRT-PCR和免疫组织化学技术,检测其在发情周期HPOA组织中的表达和分布。qRT-PCR结果显示,甘加藏羊整个发情周期HPOA组织中均有KISS-1和GPR54 mRNA表达。下丘脑组织中发情前期KISS-1 mRNA相对表达量显著(P<0.05)高于其他3个发情时期;在垂体组织中发情前期和间情期的相对表达量较高,与发情后期差异显著(P<0.05);卵巢轴组织中间情期的相对表达量最高,显著(P<0.05)高于其他3个时期。下丘脑组织中发情期GPR54 mRNA相对表达量显著(P<0.05)高于其他3个时期;垂体组织中发情前期的相对表达量显著(P<0.05)高于其他时期;卵巢轴组织中发情后期的相对表达量显著(P<0.05)高于其他时期。免疫组织化学染色结果显示:Kisspeptin和GPR54阳性产物在下丘脑中主要分布于促垂体区的弓状核、脑室前腹侧区;腺垂体中主要在嗜碱性细胞和嫌色细胞中表达;卵巢轴中主要在卵泡颗粒层及卵泡内膜上表达。KISS-1和GPR54在藏羊发情周期HPOA中的差异表达,对藏羊季节性发情周期有一定的调控作用。     

单纯与联合灌注法构建猪支气管动脉立体标本

【目的】改进和优化ABS血管铸型技术。创建猪支气管动脉立体标本的铸型方法,并构建猪支气管动脉立体标本。为探明猪支气管动脉在肺内的分支与分布状态提供实验方法。【方法】用改进和优化ABS铸型技术,采用支气管动脉单纯铸型和支气管动脉与支气管树或肺动脉联合铸型的方法构建猪支气管动脉的立体标本。【结果】（1）创建了猪支气管动脉立体标本的铸型方法。①猪肺支气管动脉单纯标本制作的方法要点：先分别在胸主动脉近心端和远心端插管并结扎胸主动脉。同时,为了防止在灌入铸型剂时经食管和气管周围的血管网发生渗漏,分别在胸主动脉插管处相应的位置结扎食管前端和后端,并在气管开口处插入盲端套管并结扎。然后调整肺的位置,使其背上腹下地置于解剖盘中。经胸主动脉间接向支气管动脉中注入铸型剂。灌注时强压梯度灌入60 mL 10%和100-160 mL 15%的ABS铸型剂,当橡胶管中间部位膨大后停止灌注。在连续灌注结束后5 h内随时观察橡胶管膨大部位的大小,当压力减小时,立即灌入20%的ABS铸型剂,保证主动脉内的正压力。将灌注好的标本置于冷水中静态硬化3-4 d,再用盐酸密闭腐蚀10 d左右。然后用流水漂浮和加压冲洗,再通过摘除凝块、打枝疏密和断枝再植修整后就可以获得完整的铸型标本。②猪肺支气管动脉与支气管树联合铸型标本制作的方法要点：首先,同时插管并结扎胸主动脉、食管和气管。然后经胸主动脉间接灌注铸型剂。间隔1-2 h后再对气管树进行灌注。最后同步硬化、腐蚀、冲洗和修复支气管动脉与支气管树联合标本。③猪肺支气管动脉与肺动脉联合铸型标本制作的方法要点：支气管动脉与支气管树联合铸型的方法和支气管动脉与肺动脉联合铸型的方法相似,不同之处在于在将铸型剂注入支气管动脉的同时,前者是将铸型剂注入支气管树内,后者则是将铸型剂注入肺动脉内。在联合铸型时,根据肺的大小确定注入铸型剂的量,而经支气管动脉单纯铸型时,则根据压力大小确定灌注量。（2）构建了猪支气管动脉立体标本、猪支气管动脉与猪支气管树的联合立体标本和猪支气管动脉与肺动脉的联合标本。【结论】采用该方法获得的支气管动脉立体标本血管层次清楚、管道充盈光滑、对比度清晰,能够完整显示猪支气管动脉的起源、分支、走向、分布以及与支气管树和肺动脉的毗邻关系。该工作为猪及其它动物支气管动脉的研究奠定了基础。     

玉屏风散对鸡脾脏淋巴细胞体外增殖的影响

将不同浓度的玉屏风散加入到鸡脾脏淋巴细胞中,培养24、48、72 h,采用MTT法观察其对鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响.结果表明,不同浓度的玉屏风散均能协同ConA促进鸡脾脏淋巴细胞增殖的作用,并以500 mg/mL的玉屏风散培养48 h增殖作用最强.