苯丁酸钠通过下调CLDN4基因DNA甲基化对喉鳞状细胞癌增殖与凋亡的作用研究

目的 观察苯丁酸钠对喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)细胞株 Hep-2增殖及凋亡的作用,探讨其作用机制与紧密连接蛋白4(claudin4,CLDN4)基因甲基化的相关性。方法 使用0.5、1.0、2.0、4.0、8.0mmol/L的苯丁酸钠分别处理Hep-2细胞24h,利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、流式细胞术检测Hep-2细胞增殖、细胞周期与细胞凋亡,细胞免疫荧光法检测Hep-2细胞中caspase-3表达,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Hep-2细胞中DNA甲基转移酶(DNMT1、DNMT3a)mRNA表达水平,免疫印迹试验(Western blot)法检测Hep-2细胞CLDN4蛋白表达水平,利用甲基化特异性 PCR 法(MSP)分析苯丁酸钠对Hep-2细胞CLDN4基因甲基化的影响。结果 苯丁酸钠呈剂量依赖地抑制Hep-2 细胞增殖,使细胞周期阻滞在 G₀/G₁期,并诱导细胞凋亡;4.0mmol/L苯丁酸钠处理Hep-2 细胞后,caspase-3 蛋白表达明显增加;苯丁酸钠处理Hep-2 细胞后,CLDN4蛋白表达水平随苯丁酸钠浓度增加而升高,而DNMT1、DNMT3a mRNA表达水平随苯丁酸钠浓度增加而下降;苯丁酸钠作用后CLDN4基因的高甲基化被逆转,并呈剂量依赖性。结论 苯丁酸钠可通过抑制甲基转移酶DNMT1、DNMT3a的表达使CLDN4基因去甲基化,从而抑制Hep-2细胞的增殖并诱导其凋亡。     

鼻声反射对鼻通气功能检查的应用评价

鼻声反射(acoustic rhinometry,AR)是近年来应用于临床的一种反映鼻腔通气状况的客观检查方法,通过探测声波的反射信号,测量鼻腔的最小截面积、鼻腔容积等参数,反映鼻腔的几何形态.我科应用鼻声鼻阻力仪对36例鼻塞患者和20例无鼻病健康志愿者进行了鼻腔测量,探讨AR对鼻塞患者鼻通气功能检查的临床应用价值,为临床治疗提供参考.     

miR-21-5p通过靶向FGF18促进人鼻咽癌CNE1细胞增殖的机制研究

目的:探讨miR-21-5p通过靶向FGF18促进人鼻咽癌CNE1细胞增殖的具体机制。方法:Real-time quantitative PCR检测miR-21-5p、FGF18在人鼻咽癌组织及各鼻咽癌细胞系中的表达情况。对照组转染mimics/inhibitor NC,实验组转染miR-21-5p mimics/inhibitor/siFGF18。利用MTT、细胞克隆形成实验观察miR-21-5p及FGF18对CNE1细胞增殖活力的影响;Luciferase实验验证miR-21-5p和FGF18 3'-UTR的结合;Western blot检测FGF18、PI3K及Akt等的表达情况。结果:RT-PCR检测:人鼻咽癌组织及其细胞系中miR-21-5p及FGF18表达均显著增加（P＜0.05)。MTT及细胞克隆形成实验:CNE1细胞瞬转miR-21-5p inhibitor后活细胞数量明显减少,增殖能力显著下降（P＜0.05);而在miR-21-5p inhibitor+siFGF18组中,这种增殖抑制作用显著增强（P＜0.05）。Luciferase实验:miR-21-5p与FGF18 3'-UTR直接结合。Western blot检测:miR-21-5p inhibitor组FGF18、PI3K及Akt表达显著减少（P＜0.05）。结论:miR-21-5p靶向结合FGF18基因,激活PI3K/Akt信号通路,从而促进人鼻咽癌组织及CNE1细胞的增殖。     

沉默HIG2促进NK细胞对喉癌细胞杀伤敏感性的机制探讨

目的:探讨缺氧诱导基因2（HIG2）在喉癌细胞逃逸NK细胞免疫杀伤中的作用机制。方法:免疫组织化学法检测喉癌组织和癌旁组织中HIG2的表达;Western blot检测HIG2、NKG2D配体（MICA、MICB、ULBP1、ULBP2和ULBP3）的蛋白表达;Transwell实验检测Hep-2细胞的侵袭;流式细胞术检测Hep-2细胞的凋亡、CD3-CD56+的NK细胞纯度、NKG2D受体表达及Hep-2细胞NKG2D配体的表达;乳酸脱氢酶释放法检测不同效靶比时,NK细胞对Hep-2细胞的杀伤活性。结果:HIG2在喉癌组织中高表达。CD3-CD56+的NK细胞纯度大于90%。沉默HIG2抑制Hep-2细胞侵袭,促进细胞凋亡,提高NKG2D配体的表达,增强NK细胞对Hep-2细胞的杀伤敏感性。NKG2D抗体抑制NK细胞NKG2D受体表达,减弱NK细胞对沉默HIG2 的Hep-2细胞的杀伤活性。结论:沉默HIG2可抑制喉癌细胞侵袭,促进细胞凋亡,上调NKG2D配体表达,增强NK细胞对喉癌细胞的杀伤敏感性。     

慢性中耳炎细菌生物膜形成与细菌培养结果的相关性分析

目的：探讨慢性中耳炎细菌生物膜形成与细菌培养之间的相关性。方法：对32例慢性化脓性中耳炎及中耳胆脂瘤患者术中取得的样本进行扫描电镜检查，并对中耳分泌物行细菌培养；分析慢性中耳炎细菌生物膜形成与细菌培养结果之间的关系。结果：慢性化脓性中耳炎（活动期）与中耳胆脂瘤细菌生物膜形成率分别为87．5％、81．3％（P〉0．05）。慢性中耳炎扫描电镜细菌生物膜结果与细菌培养结果之间比较，灵敏度为70．37％，特异度为60.00％，误诊率为40．00％，漏诊率为29．63％，阳性预测值为90．46％，阴性预测值为27．27％，正确率为68．75％，约登指数为30．37％，Pearson相关系数为0．232（P〉0．05）。结论：慢性化脓性中耳炎（活动期）与中耳胆脂瘤均有较高的生物膜形成率，但中耳分泌物常规细菌培养结果不能反应慢性中耳炎患者细菌生物膜的形成情况，需要探索更为可靠的细菌学实验方法来准确反映慢性中耳炎的感染情况。     

420例维吾尔族变应性鼻炎患儿变应原测试和分析

目的:分析维吾尔族儿童变应性鼻炎变应原的常见种类及分布特点。方法:对420例前来我院就诊的维吾尔族变应性鼻炎患儿进行变应原皮肤点刺试验(SPT)。将患儿按年龄分为婴幼儿组、学龄前组和学龄组,比较各组SPT及各变应原阳性率结果:患儿主要变应原为粉尘螨和屋尘螨,阳性率分别为67.8%和65.4%。各年龄组变应性鼻炎患儿SPT阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:维吾尔族变应性鼻炎患儿的主要过敏原为屋尘螨和粉尘螨;变应性鼻炎患儿SPT阳性率与年龄有一定相关性。     

鼻腔鼻窦少见良性肿瘤8例报告

目的：提高鼻腔鼻窦少见良性肿瘤的诊治水平。方法：回顾性分析8例鼻腔鼻窦少见良性肿瘤患者的临床资料。根据病变范围．4例行鼻侧切开术,4例行上颌窦根治术。结果：8例术后随访2～10年均无复发。结论：鼻腔鼻窦良性肿瘤呈膨胀性生长,发展缓慢,以青少年发病为主,临床表现无特异性,诊断以术前CT加术后病理检查为主,手术彻底切除肿瘤是治疗并防止其复发的惟一方法。