肝再生磷酸酶3对肾透明细胞癌细胞A-498的影响

[目的]研究肝再生磷酸酶3 (phosphatase of regenerating liver-3,PRL-3)对肾透明细胞癌(clear cell renal cell cancinoma.CCRCC)细胞A-498的影响.[方法]本实验以肾透明细胞癌细胞A-498为实验对象,采用siRNA干涉的方法下调A-498中PRL-3表达水平,以不做任何处理为空白对照组,脂质体加随机序列的siRNA为阴性对照组,脂质体加siRNA处理组为实验组,之后通过RT-PCR及Western blotting方法检测siRNA干涉效率,绘制细胞生长曲线、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡以观察下调PRL-3对A-498细胞的影响.[结果]同阴性对照组相比,本实验所设计的siRNA能够下调PRL-3在A498细胞中的表达,其中siRNA2干涉效率更高,细胞生长曲线显示自siRNA转染60h开始,下调PRL-3能够抑制细胞的生长(P＜0.01),流式细胞仪检测发现转染72h后,下调PRL-3的表达可以促进A-498细胞G1期阻滞,S期减少,凋亡增加(P＜0.05).[结论]下调PRL-3能够明显抑制A498细胞的增殖,PRL-3很可能成为肾透明细胞癌基因治疗的新靶点.     

硝普钠、多巴胺、白蛋白合用治疗难治性心力衰竭疗效观察

心力衰竭不是一个独立的疾病,而是心皿管疾病发展的终末阶段,而难治性心力功衰竭往往导致患者死亡,如何使患者尽快改善症状、挽救患者的生命是我们临床工作者面临的重大课题。1999年3月-2004年10月,我们对收治的难治性心力衰竭患者给予静脉滴注硝普钠、多巴胺及白蛋白治疗,疗效显著,报告如下:     

酪氨酸激酶受体C在膀胱癌SCaBER细胞裸鼠种植瘤中的作用

【目的】通过酪氨酸激酶受体C(tyrosine receptor kinase,TrkC)siRNA干涉质粒下调膀胱癌细胞SCaBER裸鼠种植瘤中TrkC的表达,分析TrkC在膀胱癌中的作用。【方法】采用构建SCaBER细胞裸鼠种植瘤模型,以脂质体Lipofect Amine 2000为介质,采用瘤内注射的方法,用TrkCsiRNA干涉质粒实现下调SCaBER细胞中TrkC的表达,以空载体pSilencer作为阴性对照,干涉过程中记录裸鼠种植瘤的体积变化,绘制种植瘤生长曲线,干涉结束后处死裸鼠,剥除肿瘤,拍照,称重,并提取蛋白,western blotting检测干涉效果。【结果】Western blotting检测发现,构建的TrkCsiRNA干涉质粒顺利实现了在SCaBER细胞裸鼠种植瘤中对TrkC的表达的下调(F=7.46,P<0.05),种植瘤生长曲线表明下调TrkC的表达可以抑制SCaBER细胞在裸鼠活体内的增殖,实验组肿瘤肿瘤体积(F=11.50,P<0.05)和重量(F=19.32,P<0.01)明显低于对照组。【结论】下调TrkC表达可抑制膀胱癌细胞SCaBER在活体内增殖,TrkC可能参与膀胱癌发生发展过程。     

探讨肝再生磷酸酶3在脑胶质瘤细胞SHG-44中作用

目的研究肝再生磷酸酶3（PRL-3）在胶质瘤细胞SHG-44中作用。方法采用siRNA干涉的方法下调SHG-44中PRL-3表达水平,通过Western blot方法检测干涉效果,绘制细胞生长曲线、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡以观察下调PRL-3对SHG-44细胞的影响。结果 Western blot提示siRNA能够下调PRL-3在SHG-44细胞中的表达,细胞生长曲线显示下调PRL-3能够抑制细胞的增殖,流式细胞仪检测发现下调PRL-3的表达可以促进SHG-44细胞G1期阻滞,S期减少,凋亡增加。结论下调PRL-3能够明显抑制SHG-44细胞的增殖,PRL-3很可能成为脑胶质瘤基因治疗的新靶点。     

Runx3-flag基因重组腺病毒载体的构建及其在前列腺癌细胞中的表达和定位分析

目的:构建携带Runx3-flag的腺病毒载体,通过感染PC-3前列腺癌细胞,分析其在PC-3中的表达及定位.方法:将Runx3-flag连接至pShuttle-CMV上构建出pShuttle-CMV-Runx3-flag,线性化后转化至E.coli BJ 5183-AdEasy-1内进行同源重组,抽提质粒鉴定正确的即为pAd-Runx3-flag,Pac I酶切回收后转染人胚肾293细胞,经过包装、扩增和纯化后,半数组织感染量法(TCID50)测定病毒滴度.以pAd-Runx3-flag感染PC-3细胞,western blot检测Runx3-flag的表达,间接免疫荧光分析其定位.结果:构建了包含Runx3-flag的腺病毒,即pAd-Runx3-flag,测病毒滴度为1.1×108 TCID5/mL.Western blot显示Runx3-flag表达于PC-3细胞中,间接免疫荧光显示其表达于细胞核中.结论:成功构建出包含Runx3-flag的腺病毒载体,证实Runx3-flag可表达于PC-3细胞核中.     

多西他赛治疗乳腺癌合并糖尿病的安全性观察

多西他赛对于乳腺癌具有较好的疗效,但因其可引起严重的体液潴留及皮肤过敏反应,所以在使用前必须应用地塞米松预处理。当患者有糖尿病时,预处理时应用地塞米松对血糖会有影响,这就成了能否使用多西他赛化疗的重要因素。本研究     

肾上腺囊性肿瘤16例

肾上腺囊性肿瘤临床少见.肿瘤内出血或坏死液化而形成的囊性为主的病变,易与肾上腺自发性出血性囊肿等病变相混淆.为提高诊治水平,总结我院1985年6月～2003年6月收治的肾上腺囊性肿瘤16例,报告如下.     

复方丹参注射液治疗冠心病心绞痛疗效观察

冠心病是由于冠状动脉粥样硬化导致心肌缺血，缺氧而引起的心脏病，是临床常见的老年多发病，严重危害老年人的健康。我们对2004年5月-2005年5月我院40例冠心病心绞痛患者应用复方丹参注射液治疗观察，报告如下。     

芪参降脂饮预防动脉粥样硬化发生的可能机制

目的:探讨芪参降脂饮防治动脉粥样硬化发生的作用机制。方法:24只SD大鼠随机分为3组:对照组8只,喂以普通饲料;模型组8只,喂以高脂饲料;中药组8只,喂以高脂饲料,同时给以芪参降脂饮灌胃。8周后急性处死大鼠。取血测血脂、血清丙二醛水平及超氧化物歧化酶活性;用免疫组化和Westernblot检测主动脉壁细胞间黏附分子1(ICAM1)蛋白表达水平。苏木素伊红染色观察主动脉组织形态学变化。结果:中药组主动脉内皮损伤明显轻于模型组,中膜平滑肌排列亦较模型组整齐。中药组血脂和丙二醛水平明显低于模型组(P<0.01),而超氧化物歧化酶活性则明显高于模型组(P<0.05)。模型组大鼠主动脉壁ICAM1蛋白表达量明显高于中药组(P<0.01)。结论:芪参降脂饮能够抑制实验大鼠动脉粥样硬化的发生发展,其作用可能是通过降低血脂,清除氧自由基来保护血管内皮免受损伤,同时下调ICAM1在主动脉壁的表达来实现的。